化学发光免疫分析技术测定肿瘤标志物的临床应用

(整期优先)网络出版时间:2025-01-24
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化学发光免疫分析技术测定肿瘤标志物的临床应用

王宇田

南京鼓楼医院集团宿迁医院  江苏 宿迁223800

摘要:肿瘤的早期诊断对于提高患者的生存率和治疗效果至关重要。然而,单一肿瘤标志物(TM)的诊断准确性往往受到一定的限制,可能出现假阳性或假阴性结果。为了提高肿瘤的早期筛查效果,联合多种TM检测方案逐渐成为研究的重点。目的评价化学发光免疫分析技术(CLIA)检测肿瘤标志物(TM)的应用效果。法:观察组92例肿瘤患者,对照组92例健康体检者。对两组样本的TM阳性检出率进行对比。结果观察组样本的TM水平明显高于对照组,结果比较具有明显差异性(P<0.05)。论:采用CLIA检验TM具有较高的阳性检出率,为肿瘤早期诊断提供有效的参考依据。

关键词化学发光免疫分析技术;肿瘤标志物;肿瘤早期提示

Clinical application of chemiluminescence immunoassay technology for detecting tumor markers

Wang Yutian

Nanjing Drum Tower Hospital Group Suqian Hospital, Suqian, Jiangsu 223800

Absrtact Objective:To evaluate the application effect of chemiluminescence immunoassay (CLIA) technology in detecting tumor markers (TM). Method: An observation group of 92 cancer patients and a control group of 92 healthy inpiduals undergoing physical examinations. Compare the TM positive detection rates of two groups of samples. Result: The TM level of the observation group samples was significantly higher than that of the control group, and the results showed significant differences (P<0.05). Conclusion: The CLIA test for TM has a high positive detection rate, providing effective reference for early diagnosis of tumors.

Keywords: chemiluminescence immunoassay technology; Tumor markers; Early Warning of Tumors

肿瘤是当前全球范围内致死率较高的疾病之一,其早期诊断和治疗对于提高患者生存率和生活质量至关重要[1]。随着医学研究的深入,肿瘤标志物(Tumor Markers, TM)的应用在肿瘤的早期筛查、诊断、疗效评估和预后监测中逐渐占据了重要地位。TM是一类在肿瘤细胞增殖过程中由肿瘤细胞合成、分泌或由机体免疫反应异常产生的物质。不同的TM可能在多种类型的肿瘤中出现,且其水平的升高在早期可能并不伴随显著的临床症状或影像学表现。因此,TM具有作为肿瘤早期诊断的重要潜力。

目前,临床上使用的TM标志物种类繁多,涵盖了不同肿瘤的血清标志物,常见的TM如AFP、CEA、CA125、CA19-9等,虽然可以用于某些肿瘤的初步筛查,但单一标志物在提高诊断准确性方面的局限性逐渐显现。如何提高TM检测的灵敏度和特异性成为当前肿瘤诊断中的一个关键问题。采用CLIA对TM进行检测,有助于发现早期肿瘤,为早诊早治赢得时间[2]。笔者对观察组和对照组的血液样本进行TM检测,并评估该检测方法的有效性和应用价值。本研究通过比较观察组与对照组在多项肿瘤标志物(TM)水平和阳性检出率方面的差异,探索了联合TM检测方案在早期肿瘤筛查中的应用价值。研究旨在验证联合TM检测对于提高肿瘤诊断准确性、减少假阳性/假阴性率的作用,并为临床实践中肿瘤的早期筛查和治疗监控提供参考依据。

1材料与方法

1.1仪器试剂

本研究采用MAGLUMI X8型化学发光免疫分析仪,配套使用原厂提供的试剂、校准物和质控品。所有操作严格遵循使用说明书和操作规程。

1.2评价指标

本次研究选取15种常见的肿瘤标志物进行检测,具体包括:甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原15-3(CA15-3)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原50(CA50)、糖类抗原242(CA242)、糖类抗原72-4(CA72-4)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)、前列腺特异抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、联合人附睾蛋白4(HE4)。

1.3数据来源

本研究数据来自我院2023年10月至2024年12月期间的肿瘤患者和健康体检人群。观察组包括92例肿瘤患者,对照组包括92名健康体检者。观察组中男性48例,女性44例;年龄范围22-65岁,均值(45.72±1.63)岁;对照组中男性50例,女性42例;年龄范围20-67岁,均值(42.81±1.93)岁。两组的年龄、性别等基本资料对比,P>0.05,差异无统计学意义,可进行对比分析。

1.4检验方法

样本采集与处理:使用双向采血针采集3ml清晨空腹静脉血,保存于无添加剂的真空采血管中,避免溶血或污染。血液样本离心后收集上层血清。如不能立即检测,样本应冷冻保存。所有样本均使用同一台MAGLUMI X8化学发光免疫分析仪进行检测。

1.5数据分析

数据使用SPSS软件进行统计分析,计量资料采用均数±标准差(x̄±s)表示,组间差异采用t检验;计数资料以例数(%)表示,组间差异采用卡方检验(X²检验)。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2质量控制

2.1质控品使用前状态的确认

2.1.1室内质控

购买后须详细阅读质控品说明书,按照说明书要求保存、冻融,检查该批质控品的外观、有效期,确认该批质控品符合要求。

2.1.1室间质评

样本接收时应对其进行状态确认,如果冷链异常、包装破损泄漏等情况及时反馈。

2.2室内质控规则

本研究采用Westgard控制规则进行室内质量控制,及时对质控数据进行分析并记录,若发现失控情况,需进行原因分析并采取纠正措施。

2.3室间质量评价

参与省和国家临床检验室间质量评价,及时分析本实验室的准确度和精密度。

2.4检测样本质量控制

血液标本的采集和处理:采集后的血液标本尽快分离出血清或血浆,避免红细胞和血小板对TM的影响。离心时间和速度严格按照实验室标准操作程序SOP进行,确保血清或血浆的分离质量。标本存放温度通常是2-8°C,避免长时间冷藏或冷冻导致成分变化。因为TM在血液中的生物学半衰期不同,如AFP:2~7天、PSA:2~3天,SCCA、NSE、CYFRA21-1仅1天等。血液标本避免溶血、污染和反复冻融,这些因素都会影响TM的结果准确性。

2.5性能验证

对使用的化学发光免疫分析仪进行性能验证,确保其准确度和重复性符合要求。

3结果

3.1比较两组样本的TM水平

相较于对照组样本,观察组样本的TM水平明显更高,结果具有明显差异性(P<0.05),详见表1。

3.2比较两组样本的TM阳性检出率

相较于对照组样本,观察组样本的TM的阳性检出率明显更高,结果比较具有明显差异性(P<0.05),详见表2。

3.3肿瘤的联合TM检测方案

联合TM检测方案对于肿瘤诊断的有效性如下表3所示:

表1 两组样本的TM水平比较(x̄±s)

标志物

观察组

对照组

t

AFP(ng/ml)

124.83±113.65

3.45±1.08

125.12

CEA(ng/ml)

78.69±65.21

2.31±0.97

78.26

CA125(U/ml)

88.56±74.42

17.8±4.03

87.92

CA15-3(U/ml)

64.32±34.78

11.5±2.76

63.51

CA19-9(U/ml)

95.64±89.39

20.2±4.16

94.12

CA50(U/ml)

61.38±42.35

10.68±3.21

60.27

CA242(U/ml)

50.64±48.25

9.56±1.12

49.28

CA72-4(U/ml)

25.84±14.32

4.06±0.56

24.34

NSE(μg/ml)

30.25±15.63

3.34±0.36

29.51

SCCA(ng/ml)

5.84±2.97

0.98±0.76

4.57

ProGRP(pg/ml)

150.1±56.28

45.80±10.65

3.23

CYFRA21-1(ng/ml)

15±5.12

0.38±0.11

14.69

HE4(pmol/L)

201.58±98.45

80.23±26.35

279.18

PSA(ng/ml)

18.23±3.57

2.12±1.22

18.51

fPSA(ng/ml)

2.6±0.82

0.67±0.28

0.96

注:表1两组数据相比较,P<0.001,差异有统计学意义。

表2 比较两组样本的TM阳性检出率(n,%)

标志物

观察组

对照组

X2

AFP(ng/ml)

52(56.52)

1(1.09)

51

CEA(ng/ml)

80(86.96)

0(0.00)

78

CA125(U/ml)

53(57.61)

0(0.00)

51

CA15-3(U/ml)

49(53.26)

0(0.00)

47

CA19-9(U/ml)

50(54.35)

0(0.00)

48

CA50(U/ml)

35(38.43)

0(0.00)

33

CA242(U/ml)

56(60.87)

0(0.00)

54

CA72-4(U/ml)

55(59.78)

0(0.00)

53

NSE(μg/ml)

60(65.22)

0(0.00)

58

SCCA(ng/ml)

51(55.43)

0(0.00)

49

ProGRP(pg/ml)

58(63.04)

0(0.00)

56

CYFRA21-1(ng/ml)

57(61.96)

0(0.00)

55

HE4(pmol/L)

59(64.13)

0(0.00)

57

PSA(ng/ml)

12(98.65)

0(0.00)

10

fPSA(ng/ml)

12(98.65)

0(0.00)

10

注:表2两组数据相比较,P<0.001,差异有统计学意义。

表3 肿瘤的联合TM检测方案

肿瘤类型

肿瘤标志物

NSE+CYFRA 21-1+CEA+SCC+ ProGRP

结、直肠

CEA+CA19-9+CA242+CA72-4

CA72-4+CEA+CA242+CA19-9

AFP+CEA

食管

CEA+CA19-9+SCCA

CEA+CA19-9+CA242+CA50

乳腺

CA15-3+CEA

宫颈

CEA+SCCA

胆管

CEA+CA19-9

卵巢

CA125+HE4+CEA+CA72-4

子宫

CEA+SCCA

前列腺

fPSA/PSA

4讨论

肿瘤患者早诊早治很重要,从无症状人群中寻找可疑者,国内外一直致力于通过筛查来实现,TM是指在肿瘤发生和增殖过程中,由肿瘤细胞的基因表达而合成分泌的、或由机体对肿瘤反应而异常产生或升高,良性肿瘤的TM升高为一过性,恶性肿瘤的TM升高为持续性,反映肿瘤存在和生长的一类物质[3]。TM水平的异常可早于临床症状、是提示性指标,在肿瘤发生明显影像学改变之前就可以通过血清学方法检测出来,是肿瘤早期筛查重要手段,而且样本为静脉血液,获取容易、方法简便,动态监测患者的病情变化情况,有助于帮助临床医生确定和调整治疗方案,显著延长生存期[4]

有些肿瘤细胞可产生多种TM,同一项TM可以在不同的肿瘤中出现。单一的TM难以准确反映肿瘤的复杂性。为提高TM的辅助诊断价值和确定何种标志物作为疗效随访监测指标,可进行TM联合检测[5]。动态观察TM进行性升高具有明确诊断意义,因此,采用联合检测将是提高TM诊断价值的有效方法。例如,联合检测NSE、ProGRP、CYFRA21-1、CEA和SCCA可提高肺癌鉴别准确率,建议对部分肿瘤采用联合检测的方案[6]

CLIA在临床上较为常见,检测患者体内TM水平能达到预期的效果[7]。当催化氧化化学发光物质后所形成的激发态中间体处在稳定基态时,可发射一定量的光子,其能够被发光信号测量仪所测定,进而明确目标物质的含量[8]。该检测手段的敏感度及特异性均较高,操作简便、重复性好,无同位素或放射性,安全性高且无污染等情况[9]。此外,CLIA配套的试剂成本合理,可在基层医疗机构普及应用。

综上所述,CLIA应用于TM检验,具有准确、快速、重复性好、阳性检出率较高等特点,可为肿瘤的早期提示、鉴别诊断、观察疗效、监测复发和预后评价提供有效的临床价值[10]

参考文献

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[10]中华医学会肿瘤学分会.中华医学会肺癌临床诊疗指南(2024版).中华医学杂志,2024,104(34):3175-3213.