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  • 简介:丝状真菌,俗称霉菌,在食品工业中被用于生产多种生物酶和有机酸。近年来,人们发现丝状真菌具有分泌量大、表达的蛋白有天然活性等特点,非常适合作为同源和重组蛋白的表达宿主,因此被广泛研究和探讨。简要综述了以黑曲霉为代表的几种常被用作蛋白表达宿主的丝状真菌的特点、应用中的主要问题和基本解决方案,以及近年关于丝状真菌表达系统的最佳培养条件和发酵条件的研究进展。

  • 标签: 丝状真菌 黑曲霉 异源表达
  • 简介:生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。

  • 标签: 青海弧菌 荧光素酶 优化 生物发光
  • 简介:为探讨方法模式对ELISA法各分析参数的影响情况及影响机理,设计并合成了4种与对硫磷结构相似的竞争半抗原,通过建立不同模式的同源与ELISA分析法,比较了不同模式下的抗原抗体用量、灵敏度、检测限及不同样品添加回收率。结果表明,分析对抗原和抗体的用量比同源分析有所增加,但分析可大大提高方法的检测灵敏度。在分析中,直接竞争包被抗原的ELISA(CC模式)方法重现性较差;直接竞争包被抗体的ELISA(AC模式)抗原抗体用量最多,检测灵敏度较低;间接竞争ELISA法(IC模式)具有较好的检测灵敏度,抗环境和基质干扰的能力较强,为ELISA分析中较优的模式。

  • 标签: 对硫磷 异源分析 ELISA 农药残留
  • 简介:汽车在行驶过程中。无论发动机或底盘均有噪声发出,正确判定噪声发出的部位、确定引起噪声和响有关机件,有助于迅速排除故障,使车辆恢复良好的状态。但由于驱动桥距驾驶室较远,有时响和噪声需按比较分辨法进行确定。

  • 标签: 驱动桥 异响 行驶过程 排除故障 噪声 发动机
  • 简介:利用植物表达系统生产外蛋白是一个有吸引力的廉价生产系统,它有可能替代外蛋白的发酵生产系统。本文对分子农业的意义、植物表达蛋白的影响因素和植物生产外蛋白质的研究进展等方面作了论述

  • 标签: 分子农业 基因表达 异源蛋白
  • 简介:摘要目的评价核因子E2相关因子2 (Nrf2)在μ-δ二聚体下调兴奋性氨基酸转运体3(EAAT3)表达导致大鼠吗啡复吸中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠32只,体重200~240 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、吗啡戒断组(E组)、吗啡复吸组(R组)和吗啡复吸+干扰质粒组(RI组)。腹腔注射吗啡10 mg/kg,建立大鼠条件性位置偏爱(CPP)模型;停止给药使CPP逐渐消退;再次腹腔注射小剂量吗啡5 mg/kg诱导已消退的CPP恢复,记录伴药箱停留时间。CPP模型建立成功后RI组大鼠侧脑室注射μ-δ二聚体干扰质粒5 μl。采用高效液相色谱法测定海马谷氨酸含量,采用Western blot法检测海马内Nrf2和EAAT3的表达,采用RT-PCR法检测海马内Nrf2 mRNA的表达,采用蛋白免疫共沉淀法检测μ-δ二聚体与Nrf2相互作用情况。结果与C组比较,R组和RI伴药箱停留时间延长,海马谷氨酸含量和μ-δ二聚体/Nrf2比值升高,E组和RI组海马Nrf2和EAAT3表达上调,E组、R组和RI组海马Nrf2 mRNA表达上调(P<0.05);与E组比较,R组和RI组伴药箱停留时间延长,海马谷氨酸含量和μ-δ二聚体/Nrf2比值升高,Nrf2和EAAT3表达下调(P<0.05),海马Nrf2 mRNA表达差异无统计意义(P>0.05);与R组比较,RI组伴药箱停留时间缩短,海马谷氨酸含量和μ-δ二聚体/Nrf2比值降低,海马Nrf2和EAAT3表达上调(P<0.05),海马Nrf2 mRNA表达差异无统计意义(P>0.05)。结论μ-δ二聚体形成后结合Nrf2,导致海马Nrf2含量减少,引起EAAT3表达下调,从而导致大鼠吗啡复吸的形成。

  • 标签: 受体,阿片样 吗啡依赖 兴奋性氨基酸转运体3 NF-E2相关因子2 海马 异源二聚体
  • 简介:通过对571名高职高专学生学习策略的测验研究发现:高职高专学生学习策略水平高于中学生平均水平;普高生在情感策略上占优势,而对口生在调控策略上水平较高;不同届别入学新生的学习策略水平差异不显著,但对口生入学学习策略水平提升明显;访谈研究结果分析表明,对口生学习更具情绪化,对环境和制度敏感。结果分析表明,高职高专学生学习策略有使学习异化的可能性,建议课程计划要重视高职高专学生学习策略的差异,创造科学民主的多元化学习环境,加强学习策略的培养和使用导向,从价值观层面阻断学生学习异化发生的途径。

  • 标签: 高职高专学生 学习策略 学习异化 诉求
  • 简介:[摘要]目的探讨卵巢伴有异性Sertoli-Leydig细胞瘤的临床病理学特征,提高正确诊断水平,指导治疗。方法对1例巨大卵巢有异成份Sertoli-Leydig细胞瘤进行临床资料、组织病理和免疫表型观察,复习相关文献。结果患者年龄21岁,左侧卵巢25cm×20cm×18cm,有巨大包块相应症状体征。行左侧卵巢肿瘤剔除术,病理报告为左卵巢Sertoli-Leydig细胞中分化并伴有异性(肠上皮和骨组织),免疫组化Inhibin(+),VIM(+)。术后化疗6次。随访2年预后好。结论网状、性卵巢Sertoli-Leydig细胞瘤诊断主要依据病理形态学特征,免疫组化有一定的辅助作用。该瘤总预后较好,手术是主要治疗方式,有高危因素患者术后辅助化疗。

  • 标签: []卵巢肿瘤 Sertoli-Leydig 细胞瘤 免疫组化 诊断,治疗
  • 简介:目的:为进一步研究CLP(coactosin-likeprotein)与5’-脂氧合酶、肌动蛋白的相互作用机制及功能,开展CLP克隆表达、分离纯化研究,以得到高纯度的CLP,并对其生物化学特性进行分析测定。方法:从人的胎肝cDNA文库中经PCR扩增得到CLP基因,克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中并获得高效表达,经过GlutathioneSepharose4B亲和层析和Su-perdex75分子筛纯化,得到高纯度的CLP;在此基础上进行SDS-PAGE、动态光散射和分析型超速离心等实验,并进一步分析实验结果。结果:CLP在溶液中主要以单体形式呈现;CLP的摩擦率为1.909,证实该蛋白质具有线性化趋势存在的可能性,且线性化程度较高。结论:实验结果揭示了CLP作为线性化蛋白质的可能性,为进一步搭建CLP和丝状肌动蛋白的作用模型奠定了一定的数据基础。

  • 标签: 人源CLP 表达 纯化 生化特性
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  • 简介:摘要:为降低电力单位自助缴费风险,本文通过交叉回归分析方法设计营销自助缴费风险控制系统。首先在及时性指标基础上引入归一化风险度量,建立层次判断矩阵;其次,定义风险控制,将控制过程分为六个程序,构建神经网络混合归一化模型;分析交叉回归算法;最后,将该算法引入到控制系统中,对系统登录界面、数据库以及查询模块进行设计,根据输入内容,系统会自动输出风险控制对应措施。仿真实验证明,该系统控制性能较好,提高了欠费回收效率,可以结合风险预警等级,给出合理政策性建议。

  • 标签: 异源交叉回归 电力营销 自助缴费 风险控制系统
  • 简介:摘要:为降低电力单位自助缴费风险,本文通过交叉回归分析方法设计营销自助缴费风险控制系统。首先在及时性指标基础上引入归一化风险度量,建立层次判断矩阵;其次,定义风险控制,将控制过程分为六个程序,构建神经网络混合归一化模型;分析交叉回归算法;最后,将该算法引入到控制系统中,对系统登录界面、数据库以及查询模块进行设计,根据输入内容,系统会自动输出风险控制对应措施。仿真实验证明,该系统控制性能较好,提高了欠费回收效率,可以结合风险预警等级,给出合理政策性建议。

  • 标签: 异源交叉回归 电力营销 自助缴费 风险控制系统
  • 简介:摘要肝细胞癌(HCC)早期诊断和有效治疗,仍然是困扰医学界的难题。外泌体是直径为40~100 nm的微小囊泡,内含蛋白质、脂质和核酸,作为信息物质交换的转运载体,在调控生物分子功能、维持细胞内环境中起重要作用。HCC外泌体功能包括胞间信息交换、新血管生成、癌细胞转移与多药耐药等,可介导微小RNA(miRNA)转化以调控肿瘤进展的微环境,进而影响癌细胞的病理生理学行为。外泌体性miRNA可用于HCC监测或为早期诊断潜在特异标志物,且可作为HCC治疗靶目标,具有开发应用前景。现综述HCC外泌体性miRNA研究的新进展。

  • 标签: 癌,肝细胞 诊断 靶向治疗 外泌体 微小RNA
  • 简介:乳酸克鲁维酵母已成功地应用于多种蛋白的表达生产之中。与其他酵母相比,乳酸克鲁维酵母具有许多优点,如超强的分泌能力,良好的大规模发酵特性、食品安全的级别及整合表达能力等,其作为宿主系统表达药用蛋白也已显示出巨大的潜力。从不同的菌属、遗传工程和分子生物学技术(如启动子、表达载体)等方面简要综述了乳酸克鲁维酵母作为蛋白表达宿主系统的优势。

  • 标签: 乳酸克鲁维酵母 异源重组蛋白 生物技术
  • 简介:利用转sck基因高代稳定水稻亲本和组合为材料,研究了外sck基因的遗传表达特性。结果表明:外sck和hpt基因都能自交连锁稳定遗传到T11并表达,且连锁基因和表达活性可杂交转移到不育系和杂交组合中,外sck基因在杂种F2代以单基因显性遗传3:1的模式进行分离,但也出现自交hpt基因丢失,杂交hpt基因甚至sck基因未获得成功转移的现象。田间抗虫性观测表明,转sck基因水稻对钻蛀性螟虫抗性不足,对卷叶螟具有一定抑制作用。外sck基因在转化或杂交转育的亲本及组合中均获得表达,且具有一定的空间分布特性和基因累加效应,基本为叶片的表达活性高于叶鞘。

  • 标签: 转基因水稻 sck基因 hpt基因 遗传表达
  • 简介:摘要:每个孩子都是地球上的星星,有的十分亮眼、但更多的只发着微弱的亮光,有的甚至蒙上了一层灰,但只要帮他拂去尘埃,再弱小的星星都能发出耀眼的光芒。正如老师的观点——对于某些特别的学生,在‘差”和“”的偏重中,一般教师注意的重点常常在“差”,而优秀教师则更加看重学生的“”。具体的工作中,还是会遇到诸多的困难,有时显得有些有心无力,或者不知道从哪里着手。孩子们总有各种疑难杂症,如何正确引导和惩戒,总觉得自己还需要多学习多摸索。

  • 标签: 关注 尊重 异 真诚
  • 简介:摘要目的构建肝恶性肿瘤人种移植(PDX)模型,分析影响PDX模型成瘤率的相关因素,并比较原代肿瘤和PDX模型的生物学特点。方法通过手术收集新鲜肝恶性肿瘤组织样本(天津市第一中心医院),接种于BALB/c-nu小鼠皮下,分析患者临床病理信息与PDX模型成瘤率的相关性,并比较PDX模型和原代肿瘤的病理学形态和特异性蛋白的表达。结果从63例肝恶性肿瘤样本中成功构建出33例PDX模型,整体成瘤率达到52.4%(33/63),其中原发性肝癌成瘤率为46.3%(25/54),肝转移癌成瘤率为88.9%(8/9)。影响成瘤率的主要因素是患者肿瘤的病理类型、远处转移和TNM分期(均P<0.05)。PDX模型和原代肿瘤的病理学形态和组织特异性蛋白的表达相似。结论成功构建了肝恶性肿瘤PDX模型,且成瘤率较高,并能保持原代肿瘤的生物学特性。

  • 标签: 肝肿瘤 人源性异种移植 成瘤率
  • 简介:摘要细胞种移植(CDX)与原发肿瘤比较失去了肿瘤的异质性。虽然这种种移植模型容易构建,但由于这种肿瘤模型不能充分代表每个癌症患者的独特特征,因此具有一些局限性。通过将患者新鲜的肿瘤组织植入免疫缺陷小鼠,从而构建人性肿瘤组织种移植(PDX)模型,保留了原发肿瘤的分子学、基因学和病理生理学特征,为肿瘤的精准治疗提供了更好的临床前模型。PDX模型在药物筛选、生物标志物开发和肿瘤精准治疗中已显示出作为临床前模型的优势。本综述介绍目前构建PDX模型的方法及PDX的最新应用,并对该模型未来的研究方向进行讨论。

  • 标签: 人源性肿瘤组织异种移植 细胞源性异种移植 免疫缺陷小鼠 转化医学 精准医疗
  • 简介:《万在贯》题为万邦宁撰,原序中称其成书于1567年,但据对大量史料的考证,尤其是通过对《万氏医贯》的版本印行情况、历代目录对此书的著录情况以及对原序内容的考证发现,此书即万全《万氏家传幼科发挥》之赝品。作者对与此二书有关的各种历史线索以及两书内容作了一系列考证,但有些疑问考证未果,希望医史界同仁参与讨论,提出见解。

  • 标签: 万全 《万氏家传幼科发挥》 万邦宁 《万氏医贯》 源同名异
  • 简介:《炎黄颂-》是周湘林2018年创作完成并在当年"上海之春国际音乐节"闭幕式上成功首演的一部管弦乐作品。文章以该作品为研究对象,从文化立意、手稿研读、技法表达等角度切入,探究该作品创作技法特点以及技法手段在实现文化立意和形象塑造方面的功能和作用。

  • 标签: 周湘林 《炎黄颂》 《源》 技法表达 文化立意 形象塑造