简介：摘要目的研究阿司匹林对小鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）时心肌组织炎症反应的影响。方法将60只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组（每组20只）：假手术组（S组）、缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组（I/R组）、阿司匹林+I/R组（A+I/R组）。小鼠心肌I/R模型采用结扎左冠状动脉前降支（left anterior descending coronary artery, LAD）30 min后恢复血液灌注24 h建立。阿司匹林按100 mg/kg于术前2 h及再灌注结束前2 h通过腹腔注射分别给药。伊文蓝及2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC）双染色法测定心肌梗死面积，H-E染色观察心肌组织病理改变。实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）检测心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平，ELISA法测定血清阿司匹林诱生型脂氧素A4（15-epi-lipoxin A4, 15-epi-LXA4）浓度，Western blot法检测心肌组织中甲酰肽受体2（formyl peptide receptor 2, FPR2）蛋白水平。结果与S组比较：I/R组和A+I/R组心肌缺血面积及心肌梗死面积增加，TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高，血清15-epi-LXA4水平升高（P<0.05）；I/R组心肌损伤加重，炎症细胞浸润明显；A+I/R组FPR2蛋白水平升高（P<0.05）。与I/R组比较，A+I/R组心肌梗死面积减小，心肌损伤减轻，炎症细胞浸润减少，TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA水平降低，血清15-epi-LXA4水平升高，FPR2蛋白水平升高（P<0.05）。结论阿司匹林可减轻小鼠MI/RI，其机制可能与阿司匹林促进15-epi-LXA4合成以及激活FPR2受体发挥抗炎作用有关。

简介：摘要目的探讨右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）预处理对大鼠心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）时心肌组织内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）的影响。方法雄性SD大鼠45只，230~270 g，按随机数字表法分为3组（每组15只）：假手术组（S组）、缺血／再灌注组（I/R组）、右美托咪定＋缺血／再灌注组（D+I/R组）。采用结扎左冠状动脉前降支（left anterior descending coronary artery, LAD ）30 min后松结再灌注6 h的方法构建MI/RI模型。Dex经右侧颈内静脉泵注，先以1.0 μg‧kg-1‧h-1泵注10 min，再以0.7 μg‧kg-1‧h-1泵注15 min。通过伊文蓝和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）双染色法检测心肌缺血面积及心肌梗死面积，实时荧光定量PCR （real-time quantitative PCR, RT-qPCR）检测心肌组织ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78）、C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein, CHOP）及炎症因子IL-1β、IL-6 mRNA的表达水平，Western blot检测心肌组织GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量。结果与S组比较，I/R组和D+I/R组心肌梗死面积和心肌缺血面积增加（P<0.05），GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高（P<0.05），GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高（P<0.05）。与I/R组比较，D+I/R组心肌梗死面积减少（P<0.05），GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平降低（P<0.05），GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量降低（P<0.05）。结论Dex预处理可以有效抑制大鼠MI/RI时的ERS，减轻心肌细胞凋亡和炎症反应。

简介：摘要非心脏手术后心肌损伤（myocardial injury after non-cardiac surgery, MINS）是非心脏手术后患者死亡的主要原因，与患者的术后心血管并发症和预后密切相关，早期对MINS进行监测和诊断具有极其重要的临床意义。文章介绍了MINS的定义、危害、诊断依据以及现有的监测手段，从心肌损伤标志物的角度指出目前常用监测MINS的标志物的局限性，并对近年来新型心肌损伤标志物的研究进展进行综述，说明其检测的可行性。对于MINS的预警分层、围手术期监测以及预后判断，不同心肌损伤标志物之间的组合或许能为早期监测MINS提供新的思路和参考。新型心肌损伤标志物用于早期监测MINS的发生，将为减少非心脏手术后心血管并发症和病死率提供更多的指导价值。

简介：摘要目的探讨磷酸化叉头框O4型（phosphorylated forkhead box subtype O4, p-FoxO4）在H9c2心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation, H/R）损伤过程中的作用。方法H9c2细胞正常培养24 h后，均匀接种于6孔板中，密度为4.5×105个/ml，每组≥3次重复，按照随机数字表法分为4组：对照组（Control组）、缺氧1 h复氧1 h组（H1R1组）、缺氧1 h复氧3 h组（H1R3组）和缺氧1 h复氧6 h组（H1R6组）。采用细胞增殖-毒性检测法检测4组细胞相对存活率；实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR）法检测叉头框O4型（forkhead box subtype O4, FoxO4）、Bcl-2细胞死亡的相互作用介质（Bcl-2 interacting mediator of cell death, Bim）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl2-Associated X, Bax）的mRNA含量，以此确定最佳H/R时间点。Control组与H1R1组分别通过Hoechst染色检测细胞凋亡程度，Western blot法检测FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax蛋白含量。将6~8周C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组（每组3只）：假手术组（sham组）、缺血30 min再灌注3 h组（R3组）、缺血30 min再灌注6 h组（R6组）、缺血30 min再灌注12 h组（R12组）、缺血30 min再灌注24 h组（R24组）。采用qPCR法检测结扎小鼠左前降支后导致缺血的左心室前壁的FoxO4、Bim、Bcl-2和Bax的mRNA含量。结果与Control组比较，H1R1组、H1R3组和H1R6组细胞相对生存率下降，H1R1组最低（P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组和H1R6组细胞相对存活率升高（P<0.05）；与H1R3组比较，H1R6组细胞相对存活率升高（P<0.05）。与Control比较，H1R1组、H1R3组、H1R6组FoxO4 mRNA表达增加（P<0.05），H1R1组Bim mRNA表达增加（P<0.05），H1R1组Bcl-2 mRNA表达降低（P<0.05），H1R1组Bax mRNA表达增加（P<0.05），H1R3组、H1R6组Bax mRNA表达减少（P<0.05）；与H1R1组比较，H1R3组、H1R6组Bim mRNA表达和Bax mRNA表达降低（P<0.05）。与Sham组比较，R12组、R24组FoxO4 mRNA含量增加（P<0.05），R6组Bim mRNA减少（P<0.05），R24组Bim mRNA含量增加（P<0.05），R3组、R12组、R24组Bcl-2 mRNA含量减少（P<0.05）；R6组和R24组Bax mRNA含量增加（P<0.05）；与R3组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量增加（P<0.05），R12组和R24组Bim mRNA含量增加（P<0.05），R6组、R12组和R24组Bax mRNA含量增加（P<0.05）。与R6组比较，R12组和R24组FoxO4 mRNA含量及Bim mRNA含量增加（P<0.05）；与R12组比较，R24组FoxO4 mRNA、Bim mRNA、Bax mRNA含量增加（P<0.05）。与Control组比较，H1R1组出现较多核固缩、高亮的凋亡细胞，凋亡率差异有统计学意义（P<0.05）。与Control组比较，H1R1组FoxO4、p-FoxO4、Bim、Bax蛋白含量增高，Bcl-2蛋白含量降低（P<0.05）。结论p-FoxO4可能通过调控细胞凋亡内在途径参与H9c2心肌细胞的H/R损伤。

简介：摘要目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK）-肌质网Ca2+-ATP酶2α（sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2α, SERCA2α）信号通路在大鼠心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury, I/RI）中的作用。方法采用随机数字表法将45只雄性SD大鼠（体重250~300 g）分为A组、B组和C组（每组15只），其中A组用于测定心肌梗死面积，B组用于检测心肌组织p38MAPK和SERCA2α蛋白量，C组用于检测心肌组织SERCA2α mRNA。分别将A组、B组和C组组内大鼠按随机数字表法分为3组（每组5只）：假手术组（Sham组）、缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组（I/R组）、I/R+SB203580组（I/R+S组）。I/R+S组于术前1 h腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580（2 mg/kg），其余两组于术前1 h仅注射等体积生理盐水。采用结扎冠状动脉左前降支（left anterior descending, LAD）30 min后再灌注10 min的方法建立大鼠心肌I/RI动物模型。再灌注结束后，动脉血气分析法监测大鼠内环境状态，Western blot法检测心肌组织磷酸化p38MAPK（phospho-p38MAPK, p-p38MAPK）、SERCA2α蛋白水平，实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）法检测心肌组织SERCA2α mRNA水平，伊文蓝及2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）双染色法测定心肌缺血和心肌梗死面积。结果各组大鼠血气分析结果差异无统计学意义（P>0.05）。与Sham组比较，I/R组与I/R+S组心肌梗死面积与心肌组织中p-p38MAPK蛋白水平明显增加（P<0.05）、SERCA2α蛋白及mRNA水平明显降低（P<0.05）。与I/R组比较，I/R+S组心肌梗死面积明显减少、p-p38MAPK蛋白水平明显降低（P<0.05），SERCA2α蛋白和mRNA水平明显升高（P<0.05）。结论p38MAPK可能通过介导SERCA2α参与大鼠心肌I/RI。

简介：摘要目的研究大鼠在体心肌过表达血管紧张素转化酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2）是否通过迷走神经调控高迁移率族蛋白B1 （high mobility group box 1, HMGB1 ），从而对大鼠心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）产生保护作用。方法雄性SD大鼠50只，体重220~280 g，按随机数字表法分为5组（每组10只）：假手术组（S组）、缺血／再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组、单侧迷走神经切断术（unilateral vagotomy, VG）+I/R组（V组）、ACE2+I/R组（A组）、VG+ACE2+I/R组（VA组）。ACE2过表达在术前3周通过经腹心包腔注射腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）获得。I/R模型为结扎左冠状动脉前降支（left anterior descending coronary artery, LAD) 30 min后恢复灌注24 h。ELISA法测定血清中肌钙蛋白I (cardiac troponin I, cTnI）浓度，Western blot法检测心肌组织中HMGB1水平，实时荧光定量PCR （real-time quantitative PCR, qPCR）检测心肌组织中TNF-α mRNA和IL-6 mRNA水平，伊文蓝及2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑双染色法测定心肌梗死面积。结果与I/R组比较，A组心肌梗死面积明显减少（P<0.05），心肌组织HMGB1蛋白水平下调（P<0.05）、TNF-α mRNA和IL-6 mRNA下调（P<0.05），血清cTnI浓度明显降低（P<0.05）；与A组比较，VA组以上指标均明显升高（P<0.05）。结论ACE2过表达通过迷走神经调控HMGB1能够减轻MI/RI，对大鼠心肌产生保护作用。