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  • 简介:摘要目的对妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡情况进行比较。方法选择我院2012年9月-2014年9月间25例肝内胆汁淤积症孕妇和25例正常孕妇,采用免疫细胞化学染色技术对两组孕妇的外周血以及脐血间淋巴细胞进行检测。结果正常组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率为(182±052)%,新鲜脐血凋亡率为(193±047)%,两组比较无明显差异,P>005;培养48h后外周血淋巴细胞凋亡率为(2719±603)%,新鲜脐血凋亡率为(3436±791)%,两组比较则具有显著差异,P<005;肝内胆汁淤积症组新鲜外周血淋巴细胞凋亡率与脐血比较同样无差异,P>005;培养后48h则具有显著差异,P<005。结论妊娠晚期母体外周血与脐血间淋巴细胞凋亡情况存在明显差异,且基因表达也存在明显差异。

  • 标签: 妊娠晚期 淋巴细胞凋亡 胎儿脐血 母体外周血中图分类号R2 文献标号A 文章编号2095-7165(2015)07-0299-02
  • 简介:摘要目的探讨IL-1β在人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)调节类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者活化外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)向CD8+IL-10+T细胞亚群分化中的作用。方法应用CBA试剂盒检测RA患者血清IL-1β水平;酶消化法分离健康人hPMSCs;Ficoll密度梯度离心法分离RA患者和健康人PBMCs,分别应用PHA和CD3/CD28单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)活化PBMCs,并与hPMSCs进行共培养。流式细胞术(flow cytometry,FCM)分别分析在程序性死亡配体1(programmed death ligand,PD-L1)和/或PD-L2 McAb阻断及IL-1β刺激条件下hPMSCs对活化PBMCs向CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力;应用RT-PCR和FCM分析IL-1β刺激条件下,hPMSCs中PD-L1和PD-L2的表达水平。结果RA患者血清IL-1β水平明显升高。在PHA和CD3/CD28 McAb活化条件下,RA患者PBMCs中CD8+IL-10+T细胞亚群比例明显低于健康对照组,且hPMSCs共培养组CD8+IL-10+T细胞亚群比例明显升高;IL-1β处理后,hPMSCs对活化PBMCs向CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力比未处理组明显增强。IL-1β能够上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达;阻断PD-L1和/或PD-L2的表达后,hPMSCs对CD8+IL-10+T细胞亚群的诱导分化能力明显减弱。结论IL-1β通过上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达,增强hPMSCs对RA患者CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力。

  • 标签: 间充质干细胞 胎盘 IL-1β CD8+IL-10+T细胞
  • 简介:摘要目的分析慢性鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数和嗜酸性粒细胞(Eos)比例与鼻窦CT评分的相关性。方法抽取2020年5月至2021年5月在郑州大学附属郑州中心医院治疗的200例慢性鼻-鼻窦炎患者,设为研究组,另抽取同期在医院体检的200例健康人群为参照组,给予研究组及参照组CT检查及血常规检测,根据Lund-Mackay评分标准对患者进行鼻窦CT评分,记录并比较两组外周血白细胞计数、Eos比例,鼻窦CT中嗅裂、筛窦、上颌窦评分及双侧筛窦总分/双侧上颌窦总分(E/M),鼻窦CT总评分,分析慢性鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数、Eos比例与鼻窦CT中嗅裂、筛窦、上颌窦评分,E/M,鼻窦CT总评分的相关性,分析各年龄段慢性鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数、Eos比例与鼻窦CT总评分的相关性。结果研究组外周血白细胞计数、Eos比例,嗅裂、筛窦、上颌窦评分,E/M,鼻窦CT总评分均高于参照组(P均<0.05)。外周血Eos比例与筛窦评分(r=0.138,P=0.046)、上颌窦评分(r=-0.124,P=0.041)、E/M(r=0.135,P=0.045)、鼻窦CT总评分(r=0.132,P=0.045)有显著相关性,与嗅裂评分(r=0.122,P=0.052)无相关性,外周血白细胞计数与嗅裂评分(r=0.152,P=0.023)、筛窦评分(r=0.158,P=0.017)、上颌窦评分(r=-0.134,P=0.045)、E/M(r=0.285,P<0.05)、鼻窦CT总评分(r=0.162,P=0.005)有显著相关性,不同年龄段鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数、Eos比例与鼻窦CT总评分存在相关性(P<0.05)。结论慢性鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数和Eos比例与鼻窦CT评分存在相关性,不同年龄段慢性鼻-鼻窦炎患者外周血白细胞计数、Eos比例与鼻窦CT总评分存在相关性,可根据患者临床症状及其他检查给予患者病情评估,为慢性鼻-鼻窦炎的治疗提供参考。

  • 标签: 嗜酸性粒细胞 白细胞 慢性鼻-鼻窦炎 Lund-Mackay鼻窦CT评分
  • 简介:摘要目的探讨二十二碳五烯酸(DPA)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向软骨细胞分化的影响。方法通过Binding DB寻找DPA潜在的作用靶点,利用京都基因及基因组百科全书(KEGG)和Gene ontology(GO)富集DPA靶点调控通路及生物学过程。在hBMSCs诱导成软骨分化中添加DPA,培养15 d进行实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测(n=3),比较DPA组与CON组软骨分化关键基因性别决定区Y框蛋白9(SOX9)和聚蛋白聚糖(ACAN) mRNA的表达量。培养21 d后用鬼笔环肽染色和免疫荧光染色检测细胞骨架和ACAN蛋白分布(n=10),采用独立样本t检验分析组间差异。结果DPA具有16个潜在作用靶点,这些靶点可能参与过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路和脂质代谢相关生物学过程。分化中的软骨细胞,SOX9和ACAN的mRNA表达DPA组均高于CON组(1.965±0.118比1.002±0.041,q=9.974,P<0.01)和(1.216±0.018比1.000±0.018,q=3.057,P<0.05)。细胞骨架重建DPA组低于CON组(9.682±0.762比21.450±1.653,t=6.466,P<0.01);而ACAN蛋白积累DPA组高于CON组(12.510±1.215比9.539±0.746,t=2.087,P<0.05)。结论DPA促进hBMSCs成软骨细胞分化。

  • 标签: 软骨细胞分化 二十二碳五烯酸 多不饱和脂肪酸 软骨再生
  • 简介:摘要目的探讨安徽省7 646例送检女性标本宫颈上皮细胞病变类型及其HPV感染亚型,为我省开展宫颈癌预防控制提供依据。方法采用液基细胞学检测技术、流式荧光杂交分型等方法对宫颈刷出物进行宫颈上皮细胞病变及HPV感染亚型检验。结果细胞学检测总阳性检出率为20.25%;≥60岁组细胞学检测阳性检出率最高(28.41%),其次为10~19岁年龄组(26.32%);≥60岁年龄组(atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS)、(atypical squamous cells: cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion,ASC-H)、(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)的阳性检出率均是最高;10~19岁年龄组(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)的阳性检出率最高;在ASC-H、HSIL患者中,40~49岁年龄段患者的构成比均是最高的;不同宫颈上皮细胞病变的单一感染率均高于多重感染率;随着病变程度的加深,从ASCUS、LSIL、ASC-H到HSIL,HPV高危单一感染率呈递增趋势;(negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM)中HPV感染常见型别为52型、16型、58型、53型、6型,ASCUS常见型别为52型、16型、53型、58型、51型,ASC-H常见型别为18型、58型、16型,LSIL常见型别为16/52型、56型、58型、53型、66型,HSIL常见型别为16型、58型、33型、52型、59型。结论安徽省女性宫颈上皮细胞病变的HPV感染均以高危单一型别感染为主;对≥60岁年龄段女性应加以重视,要定期进行HPV检测和宫颈癌筛查;不同宫颈上皮细胞病变的HPV感染亚型有所不同,常见的感染亚型有HPV52、16、58、53、33,其中HPV16、58、33型是不同上皮细胞病变都检出的感染亚型。

  • 标签: 安徽省 宫颈上皮细胞病变 细胞学 人乳头瘤病毒 型别
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA-155(miR-155)在转化生长因子β2(TGF-β2)诱导的人视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化过程中的作用及其机制。方法取视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞系分为对照组和TGF-β2组,分别用DMEM培养液和含10 ng/ml TGF-β2的DMEM培养液培养,另取ARPE-19细胞系分为miR-155抑制剂组和miR-155阴性对照组,分别用含miR-155抑制剂和miR-155阴性对照序列转染细胞,并在含10 ng/ml TGF-β2的DMEM培养液中培养,于培养后48 h采用逆转录PCR法检测细胞中miR-155表达,采用细胞划痕实验、Transwell小室实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,采用Western blot法检测细胞中磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt及上皮间质化标志物钙黏蛋白E(E-cad)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、F-肌动蛋白(F-actin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白1(FN-l)和vimentin蛋白表达。利用靶基因预测库预测miR-155靶基因,荧光素酶报告载体鉴定靶基因。结果培养后48 h,对照组细胞状态良好,细胞间连接紧密,形状规则。TGF-β2组细胞呈较明显的梭形或纺锤体形状,多数细胞表现为纤维状,细胞排列松散。TGF-β2组细胞miR-155相对表达量为0.92±0.14,明显高于对照组的0.35±0.06,差异有统计学意义(t=7.242,P=0.003);miR-155抑制剂组细胞miR-155相对表达量为0.21±0.03,明显低于miR-155阴性对照组的0.98±0.09,差异有统计学意义(t=12.421,P<0.01)。TGF-β2组细胞迁移率明显高于对照组,穿过基底膜的细胞数明显多于对照组;miR-155阴性对照组细胞迁移率明显高于miR-155抑制剂组,穿过基底膜的细胞数明显多于miR-155抑制剂组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与对照组比较,TGF-β2组细胞PTEN蛋白相对表达量降低,PI3K相对表达量升高,p-Akt/Akt比值升高,上皮细胞标志蛋白E-cad、ZO-1、F-actin相对表达量降低,间质细胞标志蛋白α-SMA、FN-l、vimentin相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与miR-155阴性对照组比较,miR-155抑制剂组细胞E-cad、ZO-1、F-actin上皮细胞标志蛋白相对表达量升高,α-SMA、FN-l、vimentin间质细胞标志蛋白相对表达量降低,PTEN蛋白相对表达量升高,PI3K相对表达量降低,p-Akt/Akt比值下调,差异均有统计学意义(均P<0.01))。靶基因预测库预测及荧光素酶报告载体鉴定证实PTEN为miR-155下游靶基因。结论miR-155在TGF-β2诱导ARPE-19细胞上皮-间质转化的过程中具有促进作用,其作用机制可能与抑制靶基因PTEN的表达,刺激PI3K/Akt信号通路活化有关。

  • 标签: 微小RNA-155 人视网膜色素上皮细胞 上皮-间质转化 PTEN