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  • 简介:荧光定量PCR(qRT-PCR)是研究分子生物学中基因表达一种新型核酸定量技术,具备快速高效、特异性强、重复性好、灵敏度高和自动化程度高等优点,因而根据相应实验材料选择适宜内参基因对于提高qRT-PCR分析准确性显得尤为重要。Actin基因表达范围广且表达稳定,常常作为内参基因应用于qRT-PCR表达分析中。前期利用转录组测序(RNA-seq)技术获得了西葫芦低温弱光转录组数据库,本研究从中筛选到1条长达2543bpcDNA,并对其进行了序列分析。生物信息学分析结果表明,该序列包含1个开放读码框(ORF),大小为2064bp,预测编码氨基酸数为682个,理论分子大小约为79.67kD,蛋白质等电点为6.28。WolfPsort分析发现,CpActin蛋白亚细胞定位于细胞核中。MotifScan分析显示,CpActin蛋白质氨基酸序列207~406位和558~682位分别为Actin中端和C端保守区域。同源性分析表明,基因编码蛋白质同为南瓜属中国南瓜和印度南瓜同源蛋白相似性达到99%,具有高度保守性。基于所获得基因全长cDNA序列,设计了基因ORF全长引物对CpActin-F、CpActin-R,经PCR扩增得到一条特异、明亮条带,经测序验证,序列RNAseq数据库cDNA序列一致,基因命名为CpActin,GenBank登录号为MH211008。在此基础上,设计了一对荧光定量PCR引物CpActin-Fq、CpActin-Rq,分析显示,该引物具有较高特异性和扩增效率,且在西葫芦不同组织(根、茎、花和果)和不同胁迫处理[正常(25℃,300μmol/m^2·s)、低温处理(4℃,300μmol/m^2·s)、弱光处理(25℃,80μmol/m^2·s)、低温弱光处理(4℃,80μmol/m^2·s)、强光处理(25℃,2000μmol/m^2·s)和高温处理(38℃,300μmol/m^2·s)]叶片中均能稳定表达,适合在西葫芦基因qRT-PCR表达分析研究中作为候选内参基因。

  • 标签: 西葫芦 内参基因 CpActin 表达分析
  • 简介:近年,人们对毛霉毛霉病关注度不断提高。这不仅由于毛霉感染发生率快速上升,更因为其临床诊治尚有许多问题悬而未决,加之分子分类学技术巨大进步,毛霉相关种系发生、分类鉴定、新种变种等方面开始出现不少新甚至使人困惑意见或争议,值得医学真菌学领域研究者和临床医生予以重视。为此,本文就近期毛霉相关分类命名变化、新出现病原菌、实验室快速诊断鉴定、毛霉病流行病学及临床表现、毛霉体外药敏实验及联合治疗等方面研究进展和动态结合笔者自己观点做一简要评述。

  • 标签: 毛霉 分类 体外药敏 诊断鉴定 治疗
  • 简介:葡萄产量品质和花序数量、特点、结构等密切相关。葡萄品种资源众多,不同品种结实系数、花序着生节住以及花序结构等存在差异,花芽分化高低修剪有关。为对葡萄花序有更好认识,以及为更好地利用葡萄种质资源、葡萄育种亲本选择以及栽培管理措施实施提供一定理论参考,本研究对205份葡萄种质资源花序特点进行了调查分析。研究发现:葡萄花序类型有花序紧凑型、花序松散型、无卷须型、卷须紧靠花序型、卷须非紧靠花序型等。欧美杂种花序着生初节位分布在3和4,其结实系数为1或2。欧亚种初节位分布在4和5,其结实系数主要为l。抽生花序节位芽比非抽生花序节位芽大。花序增长速度在开花前7d时最大。

  • 标签: 葡萄 种质资源 花序
  • 简介:真菌感染临床地位日益突出,已成为医院感染重要组成。随着国内外对真菌感染和致病真菌研究不断深入,新挑战也应运而生。近年来,真菌感染致病菌谱以往相比不尽相同,许多新致病菌种被逐一报道,而原有的真菌引起疾病也出现了新临床表现。抗真菌药物研发加速和广泛应用同时,各种简捷灵敏药敏试验方法被建立起来并加以标准化,但致病真菌耐药现象则成为困扰临床难题。从分子耐药机制入手寻找打破真菌耐药壁垒突破口,是真菌学研究和新药研制目标;注重早期诊断,完善治疗方案,是治疗真菌感染关键。

  • 标签: 真菌病 医院感染 耐药
  • 简介:冀豆4号是邯郸市农业科学院通过有性杂交选育出集优质、高产、抗病和适应性广等优良性状于一体大豆品种。该品种于1990年获得国家科技进步三等奖。利用冀豆4号及其衍生材料,通过杂交育种、诱变等手段,河北、山西、陕西3省育成了16个品种通过省审或国审,其中国审品种7个、高油品种5个,脂肪含量为21.79%~23.97%。育成品种适宜我国黄淮和北方两大大豆主产区种植,在大豆生产中发挥了重要作用。冀豆4号在育种上广泛应用,证明其不仅是一个优良品种,也是难得优异种质。筛选和培育优异种质是大豆品种选育前提,也是大豆研究重要基础性工作。

  • 标签: 大豆 冀豆4号 选育 优异种质
  • 简介:为了研究花生EMS诱变后代变化趋势,以期得到有益变异和创造新花生种质,本研究以2个花生品系花U416、花U606为供试诱变亲本,利用0(CK)、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%5个EMS浓度直接注入花生花器得到诱变后代,分析M1、M2农艺性状品质变化,结果表明,EMS对2个花生品系诱变效应明显,2个品系畸变率随EMS浓度增加而增大;EMS注入的当代植株结实率和M1出苗率均低于对照,2个品系M2均产生了多种类型突变植株,突变性状大部分可以稳定遗传。而这些遗传多样性突变材料,为花生种质创新及品种遗传改良提供基础性材料。

  • 标签: 花生 EMS 突变体
  • 简介:目的构建烟曲霉kipA基因突变株。方法通过In-Fusion技术将kipA基因上下游基因抗性基因顺序链接,以潮霉素抗性基因替换靶基因,达到用同源重组手段敲除烟曲霉kipA基因目的,以realtime-PCR对基因突变株进行鉴定和验证。结果RT-PCR结果显示,成功构建烟曲霉kipA基因突变株。结论烟曲霉kipA基因突变株构建,为后续烟曲霉极性生长血管侵袭性研究提供了实验基础。

  • 标签: 烟曲霉 kipA基因 极性生长
  • 简介:甲真菌病是真菌引起指(趾)甲感染,病原菌包括皮肤癣菌、酵母菌(主要是念珠菌)和霉菌,在2002~2004年对中国部分地区甲真菌病致病菌调查研究表明,皮肤癣菌感染占甲真菌病66.4%-67.9%,多数为红色毛癣菌和须癣毛癣菌。甲真菌病约占浅部真菌病30%,

  • 标签: 甲真菌病 失败 对策
  • 简介:为了解本地区头癣患者病原菌家养宠物关系流行分布情况,我们对来本院1998—2004年就诊1020例头癣病患者及其所养宠物进行了病原菌培养分离、鉴定结果进行分析,现将培养分离和鉴定结果报告如下。

  • 标签: 头癣 宠物 病原学 探讨
  • 简介:目的了解我国无绿藻病发病现状及流行病学特征。方法通过对国际及国内已报道无绿藻病相关文献分析,归纳其病因、发病机制、临床表现、诊断治疗及预后,并对病原菌分类、鉴定及体外药敏试验作描述。结果根据众多对无绿藻病相关文献综合分析,导致人动物致病无绿藻现被确认为有3个种:大型无绿藻、中型无绿藻及小型无绿藻。而与人类疾病相关仅是中型及小型两种。无绿藻病临床表现主要分为3类:皮肤及皮下组织感染、滑膜炎及其纤维组织炎、系统性感染。结论随着各种原因导致免疫缺陷患者增多,无绿藻病发病在全球有上升趋势,此病呈慢性、无痛性,未发现有自愈倾向。我国无绿藻病诊断率可能远低于实际感染率,无绿藻病治疗至今尚无明确方案及标准。

  • 标签: 无绿藻 抗真菌药物 真菌鉴定
  • 简介:本文对20个玉米优异地方品种资源主要农艺性状进行了研究,运用灰色系统理论方法,分析了资源综合性状及各性状间关系.研究结果表明,株高影响穗粗,穗位高影响穗长,株高和穗位均低资源不会有较高单株粒重;叶片数对资源筛选、利用有一定影响,对穗长、穗粗、单株粒重有显著影响;利用生育期较短资源可能会选出单株粒重较高自交系和杂交种.据此结果结合育种目标评价,筛选出白头霜、高油玉米、洛阳85、白鹤、二夏、品综2号、本地黄玉米、金皇后8个玉米地方品种,综合农艺性状好,具有较高利用价值.

  • 标签: 玉米 种质资源 筛选 评价 地方品种 灰色关联度
  • 简介:目的评价肝移植术后曲霉气道定植及其发生侵袭性感染风险。方法回顾2003—2004年南京八一医院和上海长征医院56例肝移植患者进行连续组织学检查和曲霉培养结果。结果24例患者被分离出曲霉,2例发生侵袭性烟曲霉感染。这2例患者在移植后6个月内都有烟曲霉定植,并且都死亡,占所有移植后死亡29%。无曲霉定植者都未发生侵袭性曲霉感染。结论肝移植术后侵袭性曲霉感染较为少见,但常致死,曲霉定植常见但为一过性,由于气管侵袭性曲霉感染只发生在有烟曲霉定植移植后6个月内患者,所以在此期间进行预防性治疗能否有效降低侵袭性曲霉感染值得研究。

  • 标签: 肝移植 曲霉定植 真菌培养
  • 简介:采用多样性指数分析了102份山东水稻地方品种抽穗期、株高、穗长等13个农艺性状和蛋白质含量、直链淀粉含量、胶稠度及RVA谱特征值等12个品质性状多样性。结果表明,山东地方水稻品种农艺性状存在较高多样性,多样性指数(H')范围为1.42~2.05,株高、穗颈长、每穗粒数多样性指数较高,分别为2.01、2.02、2.05;品质性状多样性指数范围为0.99~2.04,其中蛋白质含量、胶稠度、最高粘度、热浆粘度、崩解值多样性指数分别为2.00、2.04、2.04、2.01、2.04。结果表明,山东地方水稻农艺性状品质性状存在较为广泛多样性,可为山东地方水稻品种有效利用提供依据。

  • 标签: 水稻 地方品种 农艺性状 品质性状 RVA谱 多样性指数
  • 简介:马拉色菌是人类及温血动物皮肤上正常菌群之一,其花斑癣、马拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、银屑病等多种疾病相关性日益受到关注,作者对马拉色菌分类及其相关疾病发病机制、病因、临床表现及诊断作一综述。

  • 标签: 马拉色菌 脂溢性皮炎及头皮屑 特应性皮炎 银屑病
  • 简介:韧皮部蛋白在维持植物形态、物质转运以及植物伤口保护等方面起着重要作用。本研究以地域来源和性状特性差异均较大2个芹菜品种六合黄心芹和美国西芹为试验材料,利用RT-PCR技术获得这2种芹菜韧皮部蛋白基因cDNA序列。结果显示:这2种芹菜来源韧皮部蛋白基因全长均为546bp,编码181个氨基酸。两者核苷酸序列有3个位点不同,分别为:88G/A、399T/C和489T/C;在氨基酸序列上有1个位点不同,为30T/A。预测其蛋白质分子量为19kD,pI值为9.18。六合黄心芹和美国西芹韧皮部蛋白忽地笑等植物韧皮部蛋白相似度较高,在保守位置分别具有5个亮氨酸残基和4个色氨酸残基。实时定量PCR表达分析表明,该基因主要在芹菜茎和根等部位表达,具有明显组织特异性。

  • 标签: 芹菜 韧皮部蛋白 实时定量PCR 基因克隆 表达分析
  • 简介:真菌孢子和(或)菌丝经各种途径进入人体后,都有可能引起过敏反应,呼吸道和皮肤是真菌致敏主要反应器官。该文就常见致敏真菌、真菌致敏机制、真菌所致呼吸道和皮肤变态反应性疾病等进行综述。

  • 标签: 真菌 呼吸道 皮肤 变态反应性疾病
  • 简介:通过检索近10a国内外期刊发表资料包括以往河北医科大学第四医院皮肤科报道临床资料,复习、探讨国内外有关儿童和老年人真菌感染概况和防治对策。结果发现儿童和老年人真菌感染有上升趋势。儿童浅部真菌病主要是皮肤念珠菌病和头癣,老年人浅部真菌病主要是手、足癣和甲癣;深部真菌病主要是念珠菌病,其他依次为隐球菌病、曲霉病、马尔尼菲青霉病、毛霉病等。由于深部真菌病诊断困难,目前主张对高危人群,应及早给予预防治疗和经验治疗,一旦确诊应根据患者具体情况和药敏监测等确立具体治疗方案。

  • 标签: 真菌感染 儿童 老年人
  • 简介:植物种子油含有多种脂肪酸,是一种重要种子贮藏化舍物。种子油既是人类食品,又是重要工业原料。代谢物组学发展加深了对种子油生物合成途径全景式认识,应用基因工程改良种子油品质和价值研究已取得长足进展。本文分析了种子油及脂肪酸合成调控机制复杂性,论述了转基因提高种子油及高营养品质脂肪酸含量和培育能大量合成积累工业用脂肪酸油料作物技术策略、存在问题和发展前景。

  • 标签: 种子油 脂肪酸 代谢调控 基因工程
  • 简介:黑素是生物界普遍存在一类暗褐色或黑色物质,在真菌主要存在于细胞壁,真菌形态和毒力密切相关,具有增强真菌在逆环境中存活力、抵抗宿主免疫攻击和耐受抗真菌药物等作用。随着临床真菌感染发病率逐渐上升,对抗真菌药物耐药现象增多,探讨真菌黑素与其抗药性关系将为阐明真菌感染发病机制奠定基础,为开发新型抗真菌药物提供依据。本文重点从真菌黑素生物学特性及其与人类致病真菌抗药性方面研究进展进行阐述。

  • 标签: 真菌黑素 抗药性 致病性真菌
  • 简介:种子衰老是一个复杂从量变到质变生物学过程。种子衰老线粒体功能异常密切相关,衰老线粒体学说认为,线粒体中活性氧过量产生是种子衰老主要原因。深入了解种子衰老过程中线粒体变化对于揭示种子衰老机理和种子安全保存具有重要意义。本文主要介绍了当前有关种子衰老过程中线粒体结构、呼吸作用和抗氧化系统研究现状,并对种子衰老线粒体关系研究中存在问题进行了讨论。

  • 标签: 种子 衰老 线粒体 呼吸作用 抗氧化系统