简介：目的：基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯克斯体穿梭载体,建立贝氏柯克斯体转化系统。方法：利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan~R抗性基因、贝氏柯克斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P1169-Kan~R串联序列,经KpnⅠ和XhoⅠ酶切后,连接至经同样双酶切的pMMB207骨架上,构建穿梭载体p207-GK;将穿梭载体电转化至贝氏柯克斯体,用ACCM-2培养基进行传代培养或感染BGM细胞;利用倒置荧光显微镜观察eGFP基因的表达,传代至eGFP基因高表达时,用半固体平板培养法克隆分纯贝氏柯克斯体转化株。结果：构建了贝氏柯克斯体穿梭载体,获得了稳定表达eGFP的贝氏柯克斯体转化株,并完成了克隆分纯。结论：建立了完整的贝氏柯克斯体转化系统,为后续用遗传学方法研究贝氏柯克斯体奠定了基础。

简介：目的:探究肺癌患者与肺部良性结节病人血浆外泌体中蛋白质组的差异。方法:收集肺癌与肺部良性结节病人的术前血浆,随机选取肺腺癌病人血浆15例、肺鳞癌病人血浆10例作为实验组,肺部良性结节病人血浆5例作为对照组,采用超速离心法分离得到外泌体,定量质谱鉴定分析肺癌病人与肺部良性结节病人血浆外泌体蛋白质表达的差异性,SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检验提取到的蛋白质。结果:共检测到血浆外泌体蛋白质253个,并初步确定其中18个在肺癌病人血浆外泌体中表达上调,8个在肺癌病人血浆外泌体中表达下调,免疫印迹法验证了上调蛋白质中的补体蛋白C4a。结论:鉴定出26个外泌体差异表达蛋白质,为肺癌早期诊断提供了新的候选分子。

简介：为适应经济社会快速发展的需要,加快技能人才队伍建设,已经到了刻不容缓的地步。根据《国家中长期人才发展规划纲要(2010—2020)》、《湖北省国民经济和社会发展第十二个五年规划纲要》和有关专项规定,到2017年,培养开发紧缺技能人才50万人,其中紧缺高技能人才10万人。然而却出现一方面社会对人才的需求量大,另一方面,据调查40%以上的园林中高职学生毕业后却并没有从事园林行业。就人才知识、能力、素质的结构来看,究其主要原因还是学校的培养方向与社会需求还存在着明显的脱节。因此,如何进行一体化教学改革,提高人才培养质量是职业院校的当务之急。

简介：内部核糖体进入位点（IRES）是mRNA5端非编码区的一段特殊序列，允许核糖体直接在此序列结合mRNA并起始翻译。对IRES的发现、分类、特征，以及细胞中是否存在该元件进行了简要综述。

简介：泛素蛋白酶体水解途径是蛋白质的选择性降解中一种非常重要的机制,它通过选择性地降解蛋白质控制着体内许多重要的生物学过程。病毒侵染宿主细胞后,细胞的泛素蛋白酶体途径与一些重要的病毒蛋白相互作用,参与调节病毒的生命周期。同时,病毒的某些蛋白也会影响泛素蛋白酶体途径,以逃避宿主的防御机制。

简介：基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道的一种表型克隆的新方法,是目前寻找差异表达基因的较有效方法,较过去的方法有许多先进之外。本文对此方法的原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

简介：目的：建立盐酸雷尼替丁有关物质高效液相色谱检测方法及方法学研究.方法：采用色谱柱：AgelaVenusilASBC184.6×150mm,流动相为0.08mol/L柠檬酸溶液（用三乙胺调节pH至3.5）-乙腈（80∶20）,检测波长为314nm.流速为1.0ml/min;柱温为30？C.结果：采用该方法能将杂质与主成分有效分离,专属性良好,耐用性强,10小时内溶液较稳定,经检测限试验证明该方法能有效检出杂质.结论：高效液相方法简便,准确度高,专属性好,建议采用此法测定盐酸雷尼替丁的有关物质.

简介：泛素-蛋白酶体途径是真核细胞内降解蛋白质的重要途径，对于维持细胞的正常功能起着重要作用。雌激素受体α（ERα）作为转录因子，与乳腺癌的发生及进展关系密切，抑制ERα的功能已经成为治疗乳腺癌的主要策略之一。目前发现泛素-蛋白酶体途径能够促进ERα降解，影响其转录。简要综述了泛素-蛋白酶体途径对雌激素受体α的转录及降解调控的研究进展。

简介：在真核生物细胞中,许多具有生物活性的多肽和蛋白是在其分泌过程中由前体蛋白经内切蛋白酶切割后激活形成的.弗林蛋白酶(Furin)就是这个内切蛋白酶家族重要成员之一,它可以识别剪切多种蛋白质,如生长医子、血清蛋白、基质金属蛋白酶、受体、病毒囊膜蛋白和细菌外毒素等.近年来Furin得到了迅速而广泛的研究,本文简介了它的表达与加工运输、生物学功能、与病毒侵染的关系,以及它的抑制剂.

简介：目的：构建40S核糖体蛋白S6的原核表达载体,表达并纯化S6蛋白,将其作为底物用于S6激酶（S6K）的体外活性测定。方法：采用RT-PCR方法从人胚肾细胞HEK293中获取S6cDNA,将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体中,进行酶切及测序鉴定;IPTG诱导GST-S6融合蛋白在大肠杆菌中表达,用谷胱甘肽亲和层析纯化GST-S6,免疫沉淀法检测该蛋白是否可作为底物用于S6K的体外激酶活性测定。结果：酶切及测序鉴定表明构建了S6原核表达载体,并表达及纯化出GST-S6融合蛋白,相对分子质量为55×103。该蛋白可用于S6K的体外激酶活性测定,特异性强。结论：S6蛋白的克隆、表达与纯化成功,可用于S6K的体外激酶活性测定,为研究S6K的功能奠定了基础。

简介：提高消防装备效能一直是消防工作的研究重点问题之一。从装备的配置要符合实际需要、普及装备常识、确保特殊装备专人负责、强化装备维护保养以及加强人和装备的结合方法研究五个方面进行了研究。

简介：目的探讨高龄患者经皮穿刺椎体成形术的临床护理特点及注意事项.方法经皮穿刺椎体成形术的患者30例,按照入院顺序随机分为两组,各15例.对照组给予常规护理,干预组行全面护理.对比两组的下床活动时间、VAS评分、活动能力及止痛药应用情况.结果干预组患者的下床运动时间、住院时间均较对照组有所提前,差异具有显著性（P〈0.05）;护理干预后干预组的VAS评分、活动能力评分及止痛药应用评分显著优于对照组（P〈0.05）结论高龄经皮穿刺椎体形成术患者的运动存在很大障碍,需要接受常规护理配合心理、运动、饮食等方面全面护理.

简介：目的：评价综合治疗胸腰椎骨质疏松性椎体压缩性骨折的临床疗效.方法：2011年2月～2015年1月,医院综合治理胸腰椎骨质疏松性椎体压缩性骨折73例,包括手术治疗、康复训练、骨质疏松症治疗、食疗.结果：末次随访VAS评分、术前Cobb角低于治疗前,末次随访伤椎椎体前缘高度、骨密度高于治疗前,差异具有统计学意义（P〈0.05）;疼痛遗留5例,腰部活动受限11例,未见再骨折.结论：胸腰椎骨质疏松性椎体压缩性骨折多见老年人,除手术恢复伤椎正常高度外,还应积极预防并发症,治疗骨质疏松症,加强康复训练,促患者功能恢复.

简介：目的：探讨Ca2＋和Na＋诱导细胞凋亡的最佳浓度及时间，并用甲基绿一派诺宁染色法检测凋亡细胞的形态变化。方法：分别用不同浓度梯度及时间梯度的Ca2＋和Na＋胁迫处理洋葱鳞茎内表皮细胞，得诱导的最佳浓度及时间；用甲基绿一派诺宁染色法检测诱导凋亡的洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞和鸡血红细胞的形态特征变化。结果：诱导处理的最佳Ca2＋和Na＋浓度为0．4mol／L，最适时间约为8h，且CaCl2的诱导效果较NaCl好；经甲基绿一派诺宁染色，洋葱鳞茎内表皮细胞、大蒜根尖细胞、鸡血红细胞凋亡细胞的细胞核均呈蓝紫色，细胞质呈红色。结论：找出了诱导细胞凋亡的最适Ca2＋和Na＋浓度和时间，并检测到细胞凋亡。

简介：锈斑楔天牛大面积危害青杨林,近年来气候干旱少雨,气温偏高,在我县浅山、半脑山地区青杨林不同程度受锈斑楔天牛危害,严重的影响了树木的生长,使青杨林面临绝亡,本文通过对锈斑楔天牛形态和生活习性及对青杨林危害规律的描述,提出对锈斑楔天牛的防治方法,以拯救面临绝亡的青杨林种。

简介：随着经济社会的飞速发展和生活水平的不断提高,人们越来越关注和重视由于微生物毒素所导致的食品污染问题.在当前涉及的所有食品安全问题,最为突出的是微生物污染而引发的食源性疾病.鉴于此,使用科学的方法准确、快速地对食品微生物进行检测,对于有效预防肠道传染病和食物中毒至关重要.随着科学技术的不断进步,检测食品微生物的相关技术也得到了飞速发展,主要包括传统的PCR检测技术、电阻电导测定法、快速测试片法、重量分析稀释计和理化检测法等.

简介：本文针对APPJ射频流等离子体,采用大肠杆菌为实验菌种,研究了氩气低温等离子体在静态下的灭菌作用.考察了电压、气层厚度,气体种类等因素对杀菌效果的影响,初步探讨了灭菌基本机理.

简介：比较了不同偶合方法及裂解条件对ω－芋螺毒素及其衍生物线性肽合成效率的影响。结果表明，Ｂｏｃ／Ｂｚｌ策略、Ｆｍｏｃ／Ｂｕｔ策略、手工及仪器对总偶合率影响较小，但裂解条件及保护策略对肽－树脂裂解影响很大，氟化氢体系裂解Ｂｏｃ／Ｂｚｌ法合成树脂副产物较多，且主链易发生断裂，以低高法裂解效率最高。三氟乙酸体系裂解Ｆｍｏｃ法合成树脂效率高，主要副产物是含Ｔｒｔ基的线性肽，增加１，２－二巯基乙醇可提高肽纯度。

简介：英国桑德兰大学科学家领导的研究团队开发出致命超级病菌早期检测术。可在未来一年内用于临床实践。

简介：目的：通过对TRIzol一步法进行改进，建立一种从富含胶原蛋白、多糖及色素的仿刺参体壁提取总RNA的有效方法。方法：样品在液氮中研磨并用TRIzol匀浆后再进行抽提；对TRIzol一步法提取的总RNA进行DNaseⅠ消化和酚氯仿抽提，用2.5mol/L的醋酸钾沉淀，并加入适量糖原（10mg/mL）与RNA共沉淀。结果：琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法以及RT-PCR检测结果表明，改进的方法能够有效去除基因组DNA、蛋白、多糖及色素的污染，RNA的产率提高。结论：制备的总RNA纯度高，完整性好，能够满足mRNA差异显示RT-PCR等分子生物学研究的要求，是一种提取仿刺参体壁及其他富含黏多糖、胶原蛋白和色素的动物组织总RNA的有效方法。