简介：杜兴氏肌肉萎缩症（DMD）是一种与X染色体相连的严重退行性遗传疾病，它是由于肌萎缩蛋白的缺乏表达或截断而造成的，肌萎缩蛋白是透膜性蛋白复合物中的一种。肌萎缩蛋白的缺乏可以迅速造成骨骼肌，平滑肌和心脏肌的退化。

简介：多不饱和脂肪酸（PUFA），尤其是n-3系的PUFA，可以降低脂肪酸以甘油三酯形式的沉积，同时促进脂肪酸氧化和葡萄糖合成糖原。其具体机制是PUFA通过激活过氧化物酶体活化增生因子受体α（PPARα）来控制氧化途径过程中的基因表达，而其对脂肪合成途径中有关基因的抑制则是通过降低能传递胰岛素和碳水化合物信息的转录因子与DNA的亲和力和转录因子的核内丰度。尤其是PUFA抑制了类固醇空单元结合蛋白－1（SREBP－1）的核内丰度和表达，降低了核因子Y(NF-Y)、Sp1和肝核因子－4（MNF－4）与DNA的亲和力。

简介：Toll样受体在对抗外来病原微生物的天然免疫应答中发挥中心作用.新发现的一种分子识别模型受体Toll样受体-9(TLR9),能特异性识别CpGDNA并起动信号转导级联反应,在不同种类中的TLR9具有对序列识别的特异性.本文概述国外在TLR9识别作用机制和生物学活性研究中已取得的进展,并提出了今后研究的发展方向.

简介：利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-D92P.将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达.与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PEL-D92P-GS最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性与野生型相当;突变体在40℃下的表达量为109U/mL,约为野生型的29%.结果分析表明,Pro替代Asp92后,可能是由于Pro一级结构的特点,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合.

简介：目的：Gankyrin作为一个新的癌基因,在细胞周期调控和肿瘤发生过程中有重要功能。建立Gankyrin过表达的细胞和动物模型,以便进一步研究其在肿瘤形成过程中的作用机制。方法：采用逆转录病毒感染细胞的方法构建Gankyrin稳定表达的细胞株,采用Western-blot检测Gankyrin的表达,采用软琼脂和裸鼠成瘤实验验证该细胞株的恶性转化效应。结果：构建了Gankyrin稳定过表达的NIH3T3细胞株,且该细胞株具有成瘤性。结论：采用逆转录病毒感染细胞的方法可以有效建立Gankyrin转化细胞株,为进一步研究Gankyrin的作用机制及其在肿瘤形成中的功能提供了基础。

简介：目的：本文的目的就在于分析垂体瘤切除后患者的心理护理干预方法的临床效果.方法：在本次实际的研究过程中,通过选取本院在2013年7月-2014年7月期间进行垂体瘤切除手术的共计80例患者,对其进行随机性的划分,其中将对照组的40例患者在进行垂体瘤的切除后,进行常规性的术后治疗.而对观察组的40例次的患者,在手术切除垂体瘤后,辅助以进行心理护理干预治疗.结果：通过观察和分析进行心理护理干预前后两组患者的现实情况,发现观察组的SAI和SDS评分要明显的好于对照组的患者,并且在一定程度上来看,实施心理干预后的患者在术后恢复的情况和生活质量较之于对照组都比较好,由于两组之间存在的差异较大,P小于0.05,具有统计学上的意义.结论：垂体瘤患者在进行切除术后,适当的进行心理护理干预治疗可以有效的恢复患者的心理健康,减少手术所带来的消极情绪,也有助于帮助患者早日重拾生活的信心,提高手术的治疗效果,值得在临床中推广.

简介：目的：探索联合免疫策略对人乳头瘤病毒16型（HPV16）治疗疫苗L2E7E6和rAdE7E6的免疫效果的影响。方法：用L2E7E6融合蛋白和重组腺病毒rAd5E7E6以不同的联合免疫程序分别免疫C57BL／6小鼠，通过检测其诱发的体液免疫和细胞免疫反应，以及观察其在HPV16小鼠治疗模型中的抑瘤效果，比较分析联合免疫对小鼠免疫反应及治疗肿瘤效果的影响。结果：异源性联合免疫组均可检测到较高水平的体液免疫，该2组针对E6、E7特异性的T细胞免疫反应与同源性联合免疫2组相比明显提高，并在小鼠肿瘤治疗模型中能抑制肿瘤生长.结论：异源性联合免疫策略可明显提高HPVl6L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的T细胞免疫反应，且有效治疗HPV16相关肿瘤．为HPVl6L2E7E6及rAd5E7E6疫苗的应用提供了实验基础。

简介：目的：克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因。方法：从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA，根据恒定区序列设计基因特异性引物，通过5’RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因，测定并分析可变区基因序列，并克隆入pMD18-T载体。结果：重链可变区基因序列全长450bp，编码150个氨基酸残基；轻链可变区基因序列全长429bp，编码143个氨基酸残基。在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析，二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征。根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区（CDR）、4个框架区（FR）和信号肽。结论：通过5’RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因，为进一步研究抗体三维结构，以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础。

简介：脑胶质瘤是颅内常见原发恶性肿瘤之一,约占颅内肿瘤发病率的40.49%.风药是一个法象药理名称,其本义为具有风木属性的一类药物.风药,也称风燥升阳药,是一类具有升发、疏散特性的药物.这类药物大多性温或平,味辛、苦或甘,归属于足阳明胃经、足太阳膀胱经、手太阴肺经和足厥阴肝经,发挥祛风、解热、升散、止痛等功效.

简介：目的:设计合成新型2-喹诺酮类Polo样激酶1(Plk1)抑制剂。方法:以Plk1抑制剂ON01910为先导化合物,利用生物电子等排原理设计一系列2-喹诺酮类衍生物,用Autodock软件将该类化合物与Plk1进行分子对接和虚拟筛选,计算结合自由能;以取代的氯(溴)苄为起始原料,先后经巯基乙酸取代、双氧水氧化、与(对甲氧基)苯胺酰化,再经环合、水解制得目标化合物。结果:设计的化合物大多数与Plk1的结合自由能均比ON01910的低,结合强度高、稳定性好;合成了16个2-喹诺酮类衍生物,产物结构经1H-NMR确证。结论:所得化合物中有15个为新化合物,化合物的结构设计科学合理,虚拟筛选结果良好,为后续实体筛选和化合物结构优化提供了理论依据和参考。

简介：目的：观察Kozak序列（＋4G）对稳定转染的人淀粉样前体蛋白（hAPP751）-EGFP融合真核表达载体在CHO细胞中表达的影响,为APP的水解代谢研究提供细胞模型。方法：分别将含Kozak序列（＋4G）和不含Kozak序列的hAPP751全长基因片段亚克隆入pEGFP-N1表达载体,得到pEGFP-hAPP751（＋4G）和pEGFP-hAPP751重组质粒,转染CHO细胞,通过G418筛选稳定转染细胞株,再用倒置荧光显微镜挑取绿色荧光强的细胞进行亚克隆,并观察融合蛋白的表达强度和细胞定位,最后用EGFP抗体通过Western印迹检测融合蛋白。结果：PCR、酶切和测序证明将含Kozak序列（＋4G）和不含Kozak序列的hAPP751全长基因片段分别连入了真核表达载体pEGFP-N1中;荧光显微镜下观察pEGFP-hAPP751（＋4G）稳定转染细胞的细胞膜和细胞质产生较强的绿色荧光,其中在细胞质中成不均匀颗粒状分布,Western印迹检测到相对分子质量约156000的融合表达蛋白,与预期相符;pEGFP-hAPP751转染细胞,其绿色荧光十分微弱且在整个细胞均匀分布,Western印迹检测到相对分子质量约26000的EGFP,但检测不到预期的hAPP751-EGFP融合表达蛋白。结论：Kozak序列（＋4G）可以明显促进hAPP751的表达,获得稳定转染且高水平融合表达hAPP751-EGFP的细胞株。

简介：目前，西班牙Navarra大学的研究人员BorjaSaezOchoa开发出了一种新的诊断多发性骨髓瘤（MM）的遗传方法，该方法可在早期阶段就检测到疾病。

简介：目的：探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗中的意义。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果：脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者（P〈0.05,Log-rank检验）。结论：MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,可能与肿瘤的发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。

简介：目的：比较国产重组C225与国外已上市同类药Erbitux是否具有相似或更好的与表皮生长因子受体（EGFR）的竞争结合力及体内外抗肿瘤药效。方法：构建EGFR高表达的人结肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤模型,观察静脉注射国产重组C225对肿瘤生长的抑制作用,并评价其对肿瘤细胞诱导细胞凋亡和增殖的抑制作用。结果：HT-29结肠癌裸鼠移植瘤模型对单独应用的国产C225或Erbitux敏感性都很差,对单独应用CPT-11的敏感性也较差,但当国产C225和CPT-11联合应用后抗肿瘤作用大大提高,2次实验的相对肿瘤增殖率T/C（%）分别为20.0%（P〈0.05）和19.0%（P〈0.05）。对人结肠癌HT-29细胞抑制增殖和诱导凋亡作用的影响研究结果显示,国产C225与CPT-11联合疗法的凋亡指数/增生指数比,是单独使用国产C225或单独使用CPT-11的4.3倍以上。结论：在人结肠癌HT-29裸鼠移植瘤模型中联合应用国产C225和CPT-11可以抑制EGFR,对肿瘤细胞有很好的诱导凋亡作用和抑制增殖作用,这种联合疗法对于CPT-11耐受的结直肠癌具有很好疗效。

简介：目的：观察DcR3基因小干扰RNA（siRNA）对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因表达的影响。方法：建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体注射脂质体与DcR3siRNA混合物,转染DcR3siRNA,免疫组织化学及RT-PCR检测观察DcR3基因的表达。结果：建立了结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型;治疗后,治疗组移植瘤明显减小,空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组（P〈0.01）;各组肿瘤组织中DcR3基因均有不同程度的表达,治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组（RT-PCRP〈0.05,免疫组化P〈0.01）。结论：人结肠癌SW480细胞在裸鼠皮下有良好的成瘤性;脂质体与DcR3siRNA混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤内DcR3基因的表达。

简介：目的：应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法：构建能共表达A/chicken/Jilin/2003（H5N1）禽流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）、A/PR/8/34（H1N1）流感病毒基质蛋白（M1）和离子通道蛋白（M2）的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果：HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论：应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

简介：目的：在类风湿性关节炎（RA）成纤维样滑膜（FLS）细胞中筛选并鉴定盘状结构域受体2（DDR2）的相互作用蛋白,并研究其对FLS细胞侵袭能力的影响。方法：首先利用免疫沉淀结合SDS-PAGE分离鉴定DDR2互作蛋白波形蛋白,进而采用免疫沉淀和激光共聚焦实验,进一步验证波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,最后采用Transwell实验考察波形蛋白对RAFLS细胞侵袭能力的影响。结果：Ⅱ型胶原刺激引起RAFLS细胞中DDR2的磷酸化水平升高,DDR2被活化,活化前后共有8个DDR2相互作用蛋白发生变化,经质谱分析,其中变化最大的是波形蛋白和膜联蛋白A2;在HEK293T细胞中,免疫共沉淀结果显示FcDDR2与波形蛋白存在相互作用;激光共聚焦结果显示在RAFLS细胞中,DDR2和波形蛋白存在共定位;下调RAFLS细胞中波形蛋白的表达后,细胞的侵袭能力较对照组显著下降。结论：波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,Ⅱ型胶原可引起RAFLS细胞的DDR2磷酸化水平升高,并通过波形蛋白促进RAFLS细胞的侵袭。