简介：目的探讨猪肌腱细胞、真皮成纤维细胞、骨髓问充质干细胞中何种细胞最适宜作为体外组织工程化肌腱构建的种子细胞.方法收集猪肌腱细胞、真皮成纤维细胞及骨髓间充质干细胞,以50×106个细胞密度均匀接种于圆柱状聚羟基乙酸(Polyglycolicacids,PGA)上,按细胞种类分为三组,每组n=3,体外培养,并于1、2、6周取材,进行组织学检测、免疫组化检测、胶原定量测定和大体观察.结果细胞-PGA复合物体外培养时有细胞外基质产生,六周时肌腱细胞组产生胶原量最多,明显优于真皮成纤维细胞和骨髓间充质干细胞(p＜0.01).免疫组化显示形成的主要为Ⅰ型胶原.结论体外构建组织工程肌腱时肌腱细胞合成胶原能力最强,在现有条件下是体外构建组织工程肌腱的最佳种子细胞.

简介：摘 要：创伤、感染、巨大肿瘤的手术切除等导致的大面积骨缺损一直是外科临床急需解决的难题。骨组织工程为骨组织再生修复提供了新思路，也是最有前景的治疗手段之一。种子细胞是骨组织工程技术的3个基本要素之一。干细胞是骨再生中最合适的细胞来源，骨髓基质细胞(BMSCs)、脂肪源性间充质细胞(ASCs)和骨膜源性干细胞(PDSCs)三种主要的细胞类型作为种子细胞，用于成骨分化后形成新的、有功能的骨组织。

简介：目的本研究主要比较了应用免疫磁珠（MACS）和流式细胞仪（FACS）两种分选手段,从ES分化细胞中获得血管平滑肌细胞和内皮细胞的效率。方法利用MACS和FACS从ES分化细胞中分选出FLK-1阳性细胞,分别在VEGF和PDGF诱导培养下获得血管平滑肌细胞和血管内皮细胞,运用MACS和FACS进行细胞性质和纯度鉴定,并对两种方法所获细胞的活力和细胞得率进行比较研究。结果利用MACS分选获得的FLK-1阳性细胞经过PDGF诱导培养后可以得到108～109量级和纯度超过90%的血管平滑肌细胞,可满足构建血管的需要,而利用FACS分选难以获得构建血管肌层所需的大量细胞。利用FACS分选的FLK-1阳性细胞经过VEGF诱导培养后的纯度约60%,表达vWF和吸收低密度脂蛋白（Ac-LDL）的血管内皮细胞;而利用MACS从ES细胞中分选获得的血管内皮细胞纯度较低,两种分选方法获得的细胞活力无明显差别。结论因组织工程血管构建所需要的平滑肌细胞数量巨大,宜选用MACS从ES分化细胞中分选获得;而血管内皮细胞宜选用FACS分选获得。

简介：为探讨一个新的细胞凋亡相关基因－ＴＦＡＲ１９所参与的凋亡途径，我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡过程中ＴＦＡＲ１９表达的变化。采用去除血清，ＶＰ－１６作用及Ｆａｓ单抗活化受体等方法诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡后，以ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ水平ＴＦＡＲ１９的表达，用流式细胞术及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白水平ＴＦＡＲ１９的表达。实验结果显示，Ｊｕｒｋａｔ细胞在去除血清１２小时，

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简介：摘要目的探讨三叶香茶菜种子的发芽特性。方法在不同温度、光照、pH值、水势、播深、发芽床、盐处理、贮藏方式下考察三叶香茶菜种子发芽特性。结果三叶香茶菜种子在20～30℃条件下萌发率较高，其中在25℃下，萌发率达90.0%.种子的pH值适应范围较小，在pH值为4～6时，萌发率较高，为79.8%～82.3%.最适萌发水势为-0.2MPa，萌发率达90.5%，而最适播深为0～2cm，出苗率达84.3%.在不同的发芽床中，纸上（TP）处理的发芽率最高，为91.3%.光照和赤霉素处理有利于种子的萌发；在冰箱和干燥器中保存，可以较长时间保持种子的活力。结论三叶香茶菜种子适应性相对较低，但萌发率高，合适的贮藏方式可保持较长时间。

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简介：目的：探讨不同子宫全切术的临床疗效和安全性。方法将行子宫全切术的90例患者按随机数字表法分为A组、B组和C组，每组30例。A组接受腹腔镜下子宫全切术，B组接受经阴道子宫全切术，C组接受传统开腹子宫全切术，比较3组的临床效果。结果A组肛门排气时间、下床活动时间、住院时间明显低于B、C组（P＜0.05），A组住院费用明显高于B、C组（P＜0.05）。A组患者术前及术后3个月雌二醇、卵泡刺激素（ESH）、黄体生成素（LH）及孕酮水平与B组和C组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。A组远期并发症发生率（23.3%）明显低于A组（73.3%）及B组（76.7%）（P＜0.05）。结论腹腔镜子宫全切术效果更好，但费用较贵。

简介：目的观察HBsAg疫苗对细胞免疫应答的影响及其诱生的免疫反应类型。方法低、中、高剂量HBsAg疫苗两次免疫小鼠后，采用酶免疫法检测鼠血清抗HBsIgG2a，并用乳酸脱氢酶分析法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤靶细胞的活性。结果HBsAg疫苗可诱导小鼠产生抗HBsIgG2a，中、高剂量组阳转率显著高于低剂量组，P值<0．0l；低、中、高剂量组部分鼠特异性CTL释放率>60％，达到特异性CTL活化，与对照组比较P值均<0．0l。结论HBsAg址疫苗可增强特异性细胞免疫反应，而且对非溶细胞性和溶细胞性免疫应答均可上调。

简介：背景:单细胞纳米包裹技术是用极薄(<100nm)纳米膜包裹单个细胞的一项新技术。被纳米包裹的细胞已被广泛应用于医学生物学研究等各个领域。目的:综述单细胞纳米包裹技术的最新研究进展及应用,展望该技术未来的发展方向。方法:利用计算机在PubMed、CNKI、万方数据库中进行相关文献检索,中英文检索关键词为“singlecell,nano-coating,nano-encapsulation,cell-in-shellstructure;单个细胞,纳米覆盖,纳米包裹”,最终纳入52篇文献进行综述。结果与结论:多聚电解质的层层自组装技术具有过程简单、可调节,能形成性质多样的纳米膜等特征,已成为最广泛应用于合成单细胞外有机纳米膜的技术。应用多酚类物质的广泛黏附性及某些有机物能在细胞外自聚集的特性,也可形成性能较好的有机纳米包裹。除此之外,利用仿生矿化技术及利用某些无机物能直接在细胞表面结晶的性质,可在细胞表面形成无机纳米包裹。被纳米包裹的细胞已被广泛应用于单个细胞催化、细胞治疗、细胞保护、细胞生物学研究等各个领域。在未来的研究中,被包裹细胞的用途将更多地指导纳米膜材料的选择。

简介：树突状细胞（DC）在诱导和调节固有及适应性免疫应答方面具有显著的可塑性。在人类和小鼠，产生干扰素（IFN—α）的浆细胞样树突状细胞（pDC）能在体外调节同种T细胞免疫应答。越来越多的证据表明，pDC也能在体内调节免疫反应，包括移植物抗宿主病和器官移植排斥反应。这些细胞也许能介导负免疫应答，从而延长移植物的存活时间，为器官移植的免疫治疗提供了新的思路。

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简介：摘要目的探究CIK细胞治疗老年非小细胞癌患者循环肿瘤细胞EMT的影响。方法选取本院2015年1月~2017年1月收治的98例老年肺癌患者为观察组，并选择同期42例体检健康人员为对照组，分析CIK患者与临床病理特征的关系、治疗前后循环肿瘤细胞中EMT标志物表达变化、卡式行为状态评分、毒副反应。结果上皮细胞标志物CK19、E-cadherin及EMT标志物Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率分别为89.80%、17.35%，65.31%、62.24%；治疗后卡式行为状态评分明显优于治疗前（P<0.05）。大部分患者都没有显著不适感。结论老年肺癌患者循环肿瘤细胞内有EMT，和肿瘤发展具有相关性，自体CIK细胞治疗对EMT有抑制作用，改善患者生活质量。

简介：摘要：桔梗是一种常见的中草药，其种子具有较高的营养价值和药用价值。然而，由于桔梗的种子生长周期长且需要特殊的环境条件才能正常发育，因此在种植过程中容易受到各种因素的影响而导致种子质量下降。不过，通过对桔梗种子的科学研究，可以找到一些有效的方法来改善桔梗种子的质量并保证其产量稳定。基于此，本文围绕提高中药材桔梗种子播种品质的方法展开探讨，以供参考。

简介：目的探讨自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）细胞治疗对老年非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞上皮间质转化（EMT）的影响.方法应用免疫磁珠分选循环肿瘤细胞;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测EMT标记物CK19、E-cadherin、Vimentin、SnaiI在CIK治疗前后的表达变化,分析其与临床病理特征的关系,比较CIK治疗前后患者卡氏行为状态（KPS）评分的变化.结果40例肺癌患者中,上皮细胞标志物CK19、E-cadherin的mRNA阳性表达率分别是90％（36/40）和17.5％（7/40）,间质细胞标记物Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率分别是60％（24/40）和62.5％（25/40）.CK19、Vimentin、Snail的阳性表达率与性别无关（P＞0.05）,与肿瘤的大小、病理分型、分期、淋巴结转移、血行转移明显相关（P＜0.05）.E-cadherin的阳性表达率极低,与临床病理特征均无相关性.CIK治疗后CK19、E-cadher、Vimentin、Snail的mRNA阳性表达率均显著下降,分别为62.5％（25/40）、0％（0/40）、20％（8/40）、10％（4/40）,而且CIK治疗后患者KPS评分显著提高（P＜0.05）.结论老年肺癌患者循环肿瘤细胞存在EMT,并与肿瘤进展正相关,自体CIK细胞治疗抑制了EMT,并提高了患者的生活质量.

简介：本研究观察人树突状细胞（dendriticcells，DC）来源的外泌体（DC—derivedexosome，DCex）对人骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC）成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex，应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC，设3组培养诱导体系：①对照组：d—MEM基础培养液组；②实验组：d—MEM基础培养液＋DCex（10μg/m1）组；③α-MEM基础培养液＋标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2mRNA的表达情况，并进行碱性磷酸酶（ALP）活性检测。另外，荧光染料DiI标记DCex，应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示，在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构，直径为40—100nm，并表达DC细胞的标志物CD83，CD86，CD80和HLA—DR。在DCex处理MSC后6h时，可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex，随着作用时间延长，细胞荧光强度增加。按组培养第7天，DCex实验组Runx2表达较对照组增高，差异有统计学显著性（P〈0．05）；MSC培养第14天，DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2．22±0．27，显著高于阴性对照组（1．20±0．21）（P〈0．01），但低于标准诱导组（3．22±0．24）（P〈0．05）。结论：DCex可以促进MSC向成骨细胞分化，其且体机制仍需讲一步研穷证实．

简介：目的探索流式细胞术单种CD分子（CD146）标记法和三种CD分子（CD45CD31CD146）标记法对非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞（circulatingendothelialcells,CECs）检测效果的影响。方法采用流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法检测60例非小细胞肺癌患者及20例健康人外周血CECs。结果流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法对非小细胞肺癌患者和健康人外周血循环内皮细胞检测成功,两种方法显示肺癌患者外周血CECs均高于健康对照,差异有统计学意义（P〈0.05）。两种方法测定CECs的结果呈正相关,有统计学意义（r=0.834,P〈0.01）。精密度试验显示三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。结论单种CD146和三种CD分子标记非小细胞肺癌患者和健康人外周血细胞均可经流式细胞术用于测定CECs,三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。

简介：摘要目的探讨自体活力细胞对改善皮肤细胞活性的研究；方法利用随机数字表法将上述研究对象分为试验组和对照组，其中试验组给予自体活力细胞技术配合高浓度生长因子，对照组给予电针透刺法。结果（1）试验组、对照组治疗后与治疗前相比有差异，且差异有统计学意义（P<0.05)；（2）治疗后试验组与对照组在各部位皱纹评分比较有差异，且差异有统计学意义（P<0.05)。结论自体活力细胞术作为一种新型的皮肤手术治疗方式具有很大的应用空间。

简介：目的：检测人表皮细胞中是否存在侧群（sidepopulation,SP）细胞,并研究该表型细胞是否表达通用干细胞标志物ABCG2和表皮干细胞的标志物整合素α6和β1。方法：运用中性蛋白酶和胰蛋白酶两步消化法从手术切除的人包皮组织中分离获得表皮细胞。经Hoechst33342荧光染料和PI染色,流式细胞仪分析并分选SP细胞。采用流式细胞仪分析SP细胞ABCG2、整合素α6和β1的表达情况。结果：人表皮细胞中存在SP细胞,其比例为0.2%～0.3%。用流式细胞仪可检测到在SP细胞以及总表皮细胞中均有少量细胞表达通用干细胞标志物ABCG2以及表皮干细胞的标志物整合素α6和β1,但二者阳性细胞百分比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：表皮细胞中的SP细胞是否是富集的表皮干细胞仍存在疑问,还需要进一步的动物体内移植实验、克隆形成能力和增殖能力的研究证实。

简介：糖尿病是由于胰岛素分泌或作用不足引起以血糖增高为主要特征的代谢性疾病，糖尿病严重威胁人类的健康和生命，其发病率呈逐年上升趋势。对于糖尿病的治疗多采用药物和外源性胰岛素替代的治疗方法，但仍缺乏根治方法。