简介:摘要目的探讨微小RNA-139-5p(miR-139-5p)在食管鳞状细胞癌(ESCC)发生发展中的作用及其对ESCC细胞增殖和侵袭的影响和分子机制。方法收集2017年2月至2018年3月在郑州大学第一附属医院胸外科手术获得的75例ESCC组织和癌旁正常食管组织标本。实验分2组:ESCC(n=75)和正常食管组织(n=75)。采用GEO数据集和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ESCC组织和细胞中miR-139-5p的表达。将miR-139-5p抑制剂、miR-139-5p模拟物、阴性对照、对照siRNA、T盒转录因子1(TBX1) siRNA、pcDNA3.1和pcDNA3.1-TBX1转染ESCC Eca109和TE1细胞,用qRT-PCR检测转染后ESCC细胞中miR-139-5p和TBX1的表达水平,分别用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和Transwell小室检测ESCC细胞的增殖和侵袭。双荧光素酶报告实验分析miR-139-5p与TBX1的相互作用,qRT-PCR、Western印迹法和免疫组织化学检测TBX1在ESCC组织中的表达,Western印迹法检测转染后E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。结果ESCC组织中miR-139-5p水平明显低于正常组织(1.17±0.43比5.16±3.62,P<0.001)。Log-rank检验发现,高miR-139-5p表达水平的ESCC患者(n=43)生存率显著高于低miR-139-5p水平的ESCC患者生存率(n=32)(67.44%比25.00%,P=0.005)。ESCC细胞中miR-139-5p的表达水平均显著低于正常食管上皮细胞Het-1A(均P<0.001)。miR-139-5p高表达的Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭能力明显低于阴性对照(NC)转染的Eca109和TE1细胞(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验表明,miR-139-5p能结合致TBX1的3′-非翻译区。miR-139-5p模拟物或抑制剂分别抑制或促进Eca109和TE1细胞TBX1蛋白表达(均P<0.05)。TBX1下调显著抑制Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭,而TBX1的过表达显著促进Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭(均P<0.05)。此外,pcDNA3.1-TBX1能部分逆转miR-139-5p介导的细胞侵袭能力的抑制(均P<0.05),而TBX1 siRNA能部分逆转miR-139-5p抑制剂介导的侵袭能力的增强(均P<0.05)。结论miR-139-5p通过靶向TBX1抑制ESCC细胞的增殖和侵袭。
简介:研究全反式维甲酸(ATRA)抑制HGC-27人胃癌细胞系生长的作用.利用cck-8法分别在24h、36h、48h检测ATRA对人胃癌细胞株HGC-27的抑制率,并检测瘦素水平.不同浓度组间的生长抑制率与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05),各ATRA剂量组之间差异也存在显著性差异(P〈0.05).各个ATRA剂量组的细胞抑制率和ATRA浓度之间呈正相关.抑制作用与剂量和时间呈依赖关系,ATRA的最佳抑制浓度和时间分别是400μmol/L和48h,最大抑制率达92.27%,800μmol/LATRA可下调瘦素水平.利用光学显微镜观察不同浓度ATRA作用于HGC-27细胞的形态结构改变,显微镜观察显示ATRA使HGC-27人胃癌细胞生长受抑制,细胞出现皱缩变小、细胞核固缩等异常现象,细胞凋亡呈典型形态学改变;得出结论:ATRA对人胃癌细胞HGC-27生长有抑制作用,并与ATRA的浓度及作用时间密切相关,其机理可能与瘦素有关.
简介:摘要模型在教学中是一种解决问题的方法,模型教学的最大好处就是能将枯燥的微观结构知识转化成有趣的、比较容易理解的画面。能够打开学生的知识视野,能勾起学生的想象空间。对机电专业的教学有着重要意义。学生的理解就会更深入。本文针对机电专业特点,提出模型在课程的教学思路—合理利用不同类型的模型及模型制作过程的不同阶段,提高学生综合能力,重视对学生的实际操作技能和三维实体的造型经验培养。
简介:摘要:手工制作是中小学教育中不可或缺的重要组成部分,是初中美术教育培养学生动手能力、创造能力的主要课程。尤其是在新课程改革的推进下,我国初中美术教育更加注重学生学科核心素养的培养,使得美术教育的实践活动内容更加丰富,手工制作课更加突显“动手做”的这一特性。那么,动手实践的手工制作课中不仅丰富和活跃了初中美术教育教学内容,还不同程度上缓解学生紧张的学习压力,也有助于提升学生美术教育的学科核心素养。
简介:摘要:手工制作是中小学教育中不可或缺的重要组成部分,是初中美术教育培养学生动手能力、创造能力的主要课程。尤其是在新课程改革的推进下,我国初中美术教育更加注重学生学科核心素养的培养,使得美术教育的实践活动内容更加丰富,手工制作课更加突显“动手做”的这一特性。那么,动手实践的手工制作课中不仅丰富和活跃了初中美术教育教学内容,还不同程度上缓解学生紧张的学习压力,也有助于提升学生美术教育的学科核心素养。