简介：实时荧光定量PCR是目前基因表达量差异分析的首选方法之一。虽然其操作简单,但如何保证其定量结果的可信度一直是个难题,特别是针对只有20多个碱基的miRNA的定量分析。本研究以水稻miR408在不同组织中的表达差异为实例,系统地优化和阐述了有关荧光定量的新标准及要求。结果表明,引物的浓度对于荧光定量PCR体系的优化至关重要。

简介：采用GUS基因瞬时表达检测方法，通过正交试验以AS浓度、侵染菌液OD值、侵染时间、共培养时间和恢复培养时间5个因素在4个水平上进行分析，优化了农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系，并在此基础上进行了抗逆基因GmPK的遗传转化。结果表明，采用共培养培养基中添加100μmol／LAs、侵染菌液OD600值0．9、侵染15h、共培养5d和恢复培养3d的转化条件最佳，GUS阳性率达74．59％，经PCR及RT—PCR进一步验证获得了转基因阳性植株。利用优化的最佳条件进行抗逆基因GmPK的转化，炼苗移栽成活的再生植株经PCR及PCR—Southernblotting验证，初步证明外源基因已经整合至大豆基因组，转化率为0．6％。

简介：科学仪器设备产业是典型的国家战略性产业。我国要想实现建设创新型国家的战略目标，必须具备独立制造和发展高精尖科学仪器的能力。1我国科学仪器自主创新缺乏战略统筹近年来，我国逐步加大了对科学仪器设备自主创新的支持力度，但从整体和长远看，我国科学仪器发展至今尚未彻底摆脱内忧外困的不利局面。I）内忧。目前我国科学仪器设备原始创新能力薄弱；缺乏能有效带动和引领科学仪器产业发展的核心技术和关键部件；高端通用科学仪器设备研发和制造能力明显不足；能源、材料、环境、公共安全等战略性新兴产业和民生领域急需的、量大面广的科学仪器设备国产率不高。依靠进口科学仪器进行科学研究，已成为我国原始创新能力低于国际水平的重要原因之一。