简介:【摘要】 目的 探究束缚应激结合慢性不可预知性温和应激()影响小鼠卵母细胞发育能力的机制。方法 选取20只雌性KM小鼠,遵循随机原则,划分为慢性不可预知性温和应激组(CUMS组)、束缚应激组(WRS组)、慢急性联合应激组(CACS组)、对照组等4组,每组5只。CUMS组每日随机使用一种或多种不可预知性温和应激。WRS组前三周小鼠正常饲养,后将小鼠置于适宜大小的细铁丝笼子中进行束缚应激处理。CACS组前三周刺激同CUMS组,刺激结束1天后立即给予束缚应激同WRS组。建模成功后,麻醉小鼠取双侧卵巢以获取卵母细胞,并计数;卵母细胞体外成熟后激活,计算激活率;获得原核胚继续培养,观察记录2-细胞、囊胚的发育情况,对囊胚细胞数进行记录。结果 在超排后卵母细胞获卵数、囊胚形成率上,相较对照组,应激组有显著降低;在卵母细胞体外成熟率上,应激组也有降低。结论 束缚应激结合慢性不可预知温和应激可损伤小鼠的卵母细胞发育能力。
简介:摘要目的探讨早期母婴分离应激联合成年慢性不可预知性应激制备成年SD大鼠抑郁模型,观察大鼠行为学表现和突触蛋白的表达。方法将刚出生的24只雄性大鼠随机分为空白组(CON组)、慢性不可预知性应激组(CUMS组)、母婴分离联合慢性不可预知性应激组(MS+CUMS组),每组8只。CUMS组大鼠成年期采用慢性不可预知性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立抑郁模型,MS+CUMS组大鼠采用母婴分离+慢性不可预知性应激建立大鼠成年期抑郁模型。采用体质量和外观观察、糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验评价大鼠抑郁模型;免疫组化检测海马中Syn的表达以及Western blot检测大鼠海马PSD-95、Syn蛋白表达水平。结果(1)应激造模结束后,与CON组相比,CUMS组和MS+CUMS组大鼠体质量明显降低[(126.43±3.88) g,(91.04±3.85) g,(69.89±6.67) g;t=5.03,8.03,均P<0.01],糖水偏好度显著下降[(94.21±0.56)%,(79.30±1.13)%,(72.73±1.82)%;t=8.24,11.87,均P<0.01),不动时间明显增加[(3.50±0.84) s,(13.59±2.40) s,(15.70±2.97) s;t=3.16,3.82,均P<0.01];其中,MS+CUMS组的体质量和糖水偏好度比CUMS组大鼠的更低(t=3.00,3.63,均P<0.01)。(2)与正常组相比,MS+CUMS大鼠的中央区域活动时间明显缩短[(21.41±4.65) s,(8.96±2.37) s;t=2.66,P<0.05]。(3)在免疫组化实验中,与正常组相比,CUMS组和MS+CUMS组大鼠海马Syn阳性面积百分比明显减少[(24.42±0.76)%,(14.00±0.95)%,(10.38±1.38)%;t=6.93,9.33,P<0.01)]。(4)Western blot结果显示,与CON组相比,CUMS组和MS+CUMS组大鼠海马中PSD-95[(1.18±0.02),(0.74±0.06),(0.52±0.05);t=6.29,9.31,均P<0.05]和Syn[(1.12±0.08),(0.95±0.06),(0.90±0.07);t=3.10,4.04,均P<0.05]蛋白的表达情况明显下降;其中,与CUMS组相比,MS+CUMS组的PSD-95的蛋白表达更低[(0.74±0.06),(0.52±0.05);t=0.93,P<0.05]。结论母婴分离联合CUMS应激造模能诱发大鼠出现抑郁样行为,降低海马突触可塑性相关蛋白的表达。
简介:【摘要】目的:验证A型肉毒毒素对抑郁小鼠生殖系统损伤的治疗效果。方法:80只雄性KM小鼠随机抽出40只作为对照组,每天为剩余小鼠施加束缚应激结合慢性不可预知温和应激(CUMS),持续28d,刺激结束后小鼠反应敏感程度显著降低、快感明显缺乏,即为建模成功。将成功建模的小鼠等分为两组,为其中一组小鼠注射0.18UA型肉毒毒素,于注射后14d处死全部小鼠,HE染色法观察小鼠睾丸形态及生精小管直径变化;ELISA法检测小鼠血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平。结果:模型组小鼠睾丸组织明显破坏,血清CRH水平增高;A型肉毒毒素组小鼠睾丸组织损伤情况减轻,血清CRH水平有所下降。结论:A型肉毒毒素可以通过降低小鼠血清中CRH水平,改善抑郁小鼠生殖系统损伤情况。
简介:摘要目的探讨氟西汀(fluoxetine,Flx)对慢性不可预见应激抑郁(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠海马脂质的影响。方法30只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法随机分为Sham组、CUS组和CUS+Flx组,每组10只。CUS组和CUS+Flx组大鼠连续28 d每天接受一至两种随机的刺激,进行CUS造模,随后这两组大鼠分别接受腹腔注射1 ml/kg生理盐水和10 mg/kg氟西汀,每天1次,连续14 d。Sham组大鼠在笼中正常饲养28 d,然后腹腔注射生理盐水(1 ml/kg),每天1次,连续14 d。在最后一次注射后24 h进行糖水偏好实验,随后处死大鼠,分离大鼠海马,通过高效液相色谱-质谱联用技术进行脂质水平检测,采用SIMCA-P 14.1和LipidSearch software version 4.1软件进行脂质相对含量分析。运用SPSS 19.0进行统计分析。运用单因素方差分析或Kruskal-Wallis检验进行多组间的比较,Bonferroni进行事后检验。运用Pearson相关或Spearman相关进行大鼠行为学指标和海马脂质分子水平的相关分析。结果3组大鼠糖水偏好实验差异有统计学意义(F=12.830,P<0.001)。其中,CUS组大鼠[(43.57±12.38)%]糖水偏好率明显低于Sham组[(67.09±11.81)%]和CUS+Flx组[(62.74±8.58)%],均差异有统计学意义(均P<0.05)。脂质检测分析显示,三组间存在95个差异性脂质小分子,主要分布于甘油磷脂类和鞘脂类。相关分析发现磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)类的脂质小分子中PE(34∶1e)+H、PE (18∶1p/20∶1)+H、PE(18∶1/18∶1)+Na、PE(36∶2p)-H、PE(16∶0/20∶4)-H、PE(18∶0/18∶2)-H、PE(16∶0e/22∶6)-H、PE(18∶1/20∶4)-H及鞘脂类的CerG1(d18∶2/24∶0+O)+H与大鼠糖水偏好率呈负相关(r=-0.477,-0.433,-0.603,-0.382,-0.464,-0.482,-0.514,-0.511,-0.490;均P<0.05)。而PE(42∶6p)+Na、PE(34∶0p)-H和鞘脂类SM(d22∶1/16∶0)+HCOO与大鼠糖水偏好率呈正相关(均r=0.379,0.397,0.388;均P<0.05)。结论氟西汀对CUS模型大鼠的抑郁样行为的改善作用可能与其调节海马甘油磷脂及鞘脂类水平有关。
简介:摘要目的在CUMS抑郁模型上观察硫化氢对大鼠行为学的影响,以探讨硫化氢的抗抑郁作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、慢性不可预测性温和性应激组及高、低剂量NaHS治疗组(1.68mg/kg、5.6mg/kg)。采用CUMS建立抑郁模型,NaHS为硫化氢供体,强迫游泳实验和悬尾实验评价大鼠的抑郁水平。结果1.悬尾实验及强迫游泳实验结果显示CUMS组大鼠不动时间137.71±29.80和170.50±33.43较对照组不动时间58.25±7.41和110.25±20.02有明显提高,差异有统计学意义(T=6.83,P<0.001;T=3.29,P<0.005);2.悬尾实验结果显示,NaHS治疗组大鼠(5.6mg/kg、1.68mg/kg)不动时间67.50±10.25和40.22±11.67较CUMS组不动时间137.71±29.80有显著下降,差异有统计学意义(T=6.03,P<0.001;T=-10.42,P<0.001);强迫游泳实验结果显示,NaHS治疗组大鼠(5.6mg/kg)不动时间155.25±17.46较CUMS组不动时间170.50±33.43有显著下降,但差异不具有统计学意义(T=-0.96,P>0.05),NaHS治疗组大鼠(1.68mg/kg)不动时间106.33±32.79较CUMS组不动时间170.50±33.43有显著下降,差异具有统计学意义(T=-3.84,P<0.005)。结论CUMS可以诱导大鼠产生抑郁,硫化氢对CUMS所致抑郁样状态具有改善作用。
简介:小红是公共汽车售票员,她的售票夹上有面值1元、1元5角、2元的三种车票。她习惯把收的硬币都放在车厢里的小桌上,这样,她就可以随时知道自己有没有出差错了。有一次,下班前,她先数了数小桌上的硬币,一共是8元6角。她自言自语道:
简介:摘要目的探讨银杏二萜内酯对慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠抑郁样行为的作用及其机制。方法40只SD大鼠随机分为对照组、慢性应激组,以及慢性应激+银杏二萜内酯低剂量(1.5 mg·kg-1·d-1)组、中剂量(3 mg·kg-1·d-1)组和高剂量(6 mg·kg-1·d-1)组。除对照组,各组造模3周后给予药物治疗,持续给药3周并同时造模。应激期间和结束后测试行为学,取血清和海马下丘脑组织用于炎症因子、神经递质等试剂盒检测。结果慢性应激造成大鼠出现抑郁样行为,持续给予银杏二萜内酯可以改善大鼠糖水偏好、强迫游泳不动时间和旷场试验评分。银杏二萜内酯能够显著改善CUMS造成的血清中免疫细胞因子IL-1β、IFN-γ分泌减少,显著升高IL-10、IL-4分泌水平。此外,CUMS造成大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴功能亢进,增加促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和血浆皮质醇(cortisol,COR)的分泌,负反馈调节海马中神经递质释放,造成CUMS大鼠脑中神经递质水平如5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid, 5-HIAA)和去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)含量降低。银杏二萜内酯能够显著抑制HPA轴功能亢进,增加脑中神经递质水平。结论银杏二萜内酯可能通过调节机体免疫环境,抑制HPA轴亢进,增加神经递质释放改善大鼠抑郁样行为。
简介:摘要目的探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对慢性不可预见应激(chronic unpredictable stress,CUS)大鼠抑郁样行为及海马脂质的影响。方法将24只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(sham组)、模型组(CUS组)和rTMS治疗组(CUS + rTMS组),每组8只。适应性饲养7 d后,CUS组和CUS + rTMS组大鼠接受为期28 d的CUS造模。造模结束后,CUS + rTMS组大鼠接受rTMS干预7 d(5 Hz,1.26 Tesla),sham组和CUS组大鼠接受假rTMS干预7 d。干预结束24 h后进行糖水偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为;随后处死动物,收取海马组织,通过高效液相色谱-质谱联用技术检测脂质变化,采用Lipid Search software version 4.1和SIMCA-P 14.1软件分析脂质相对含量。采用SPSS 19.0进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Tukey检验。结果(1)3组大鼠旷场实验、糖水偏好实验和强迫游泳实验的结果均差异有统计学意义(F=6.853~7.466,均P<0.05)。在旷场实验中,CUS组大鼠[(50.72±6.38)s,(11.41±1.55)%]在旷场中央区的探索时间和中央区运动距离百分比明显少于sham组[(86.06±7.31)s,(18.60±1.21)%]和CUS + rTMS组[(79.87±7.87)s,(16.74±1.27)%](均P<0.05);糖水偏好实验中,CUS组[(37.63±6.06)%]大鼠糖水摄取百分比明显少于sham组[(68.30±6.39)%]和CUS + rTMS组[(62.68±5.50)%](均P<0.05);强迫游泳实验中,CUS组[(137.60±13.36) s]大鼠不动时间明显多于sham组[(80.57±10.36 )s]和CUS + rTMS组[(86.14±11.49)s](均P<0.05)。(2)3组大鼠海马脂质水平差异有统计学意义(F=3.826~15.440,均P<0.05)。与sham组[(20 850.00±956.56)×107,(788.78±136.11)×107,(340.29±35.66)×107,(239.65±18.14) ×107,(22.96±4.04)×107,(3.35±0.85)×107,(6.71±0.82) ×107,(424.52±33.38)×107,(2.68±0.33)×107]相比,CUS组[(24 133.33±1 242.04)×107,(953.65±131.26)×107,(275.32±35.78)×107,(293.82±38.28) ×107,(15.36±3.87)×107,(4.57±1.02)×107,(7.94±0.91) ×107,(509.22±42.09)×107,(3.39±0.33)×107]大鼠海马的磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE),磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI),溶血卵磷脂(lysophosphatidylcholine, LPC),磷酸肌酸(ceramide phosphates,CerP),鞘氨醇(sphingosine,So),甘油二酯(diglyceride,DG)和单甘油酯(monoglyceride,MG)等7类脂质分子在大鼠海马中的相对含量增加(均P<0.05),磷脂酸(phosphatidic acid,PA)和酰基肉碱(acyl carnitine,AcCa)相对含量减少(均P<0.05)。rTMS治疗有效逆转了CUS导致的大鼠海马脂质水平改变,与CUS组相比,CUS + rTMS组[(21 816.67±928.26)×107,(783.16 ±91.52)×107,(323.59±33.91)×107,(236.39±32.02)×107,(23.35±4.46)×107,(3.16±0.85)×107,(7.03±0.26)×107,(421.55±44.28)×107,(2.56±0.32)×107]大鼠海马的PE,PI,LPC,CerP,So,DG和MG含量降低,PA和AcCa脂质含量升高(均P<0.05)。结论CUS模型大鼠海马的甘油磷脂、甘油糖脂、鞘脂、脂肪酸等多种脂质水平异常,而5 Hz的rTMS干预可以改善CUS模型大鼠的抑郁样行为和海马脂质紊乱。