简介:从1985年以来,世界各国先后应用不同外源基因导入虹鳟鱼、鲤鱼、鲶鱼等有经济价值的养殖鱼类。但受精卵发育到何时注基因源射外获得高的成活率(孵化率)和整合率一直是研究人员所关心的问题。法国的Chourout等在1986年就做了虹鳟鱼受精卵不同发育时期注射外源基因与孵化率关系实验。美国的Thoms.T.then等人也做了鲤鱼等受精卵在不同发育时期注射外源基因对其成活率、整合率影响的研究。由于外源基因对受体鱼的整合机理比较复杂,不仅这方面的研究不多,而且各实验室之间的研究结果也很不一致,因此至今对某种鱼类的受精印发育到何时是注射外源基因的最佳时期还没有形成一致的意见。本研究以鲤鱼受精卵为材料,通过显微注射技术,在受精卵的不同发育时期把鲤鱼MT启动因子基因,大麻哈鱼CH基因的融合基因导入受精卵中,按孵出的鱼苗数分别计算成活率,再通过斑点杂交和SouthernBlot杂交检查整合情况,计算整合率,以探索外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期。
简介:摘要成功的繁殖需要配子成熟、受精和早期胚胎发育。卵母细胞成熟包括一系列形态学和分子学变化,经历生发泡期、减数分裂I中期和减数分裂II中期(MⅡ)。而后精子与MⅡ期的卵母细胞融合,启动胚胎发育,逐步形成各种器官及组织。因此,卵母细胞发育过程中任何一个步骤失败都会导致不孕。然而,人类卵母细胞发育停滞的遗传学病因大多仍不甚清楚。母源RNA和蛋白质对维持正常的胚胎早期发育至关重要。皮质下母源复合体组分基因及其他特定基因的突变与临床上一些体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)反复失败的女性不孕症相关。本文结合近期研究就人类卵子生成、受精及早期胚胎发育异常的遗传学基础进行简要综述。
简介:摘要目的本文主要探讨的是通过对胚胎发育速度及形态评级,进而再参考受精卵原核评级的方法来确定体外受精之后通过选择移植胚胎的研究意义。方法采取回顾式的研究方式,对我院2013年12月至2014年12月期间采取联合评级进行移植胚胎的2700个受精卵进行深入分析,移植周期为429个,2700个受精卵均为正常的受精卵。而后根据受精卵原核发育的状态将2700个受精卵分为两组,一组是受精卵原核同步发育组,另一组则是受精卵原核不同步发育组,并观察两组受精卵原核的发育状况和发育的潜力,之后通过胚胎发育速度及形态评级和受精卵原核评级联合选择移植胚胎,胚胎进行移植之后进行观察,分析受精卵原核同步发育组和受精卵原核不同步发育组在移植胚胎后的着床率以及在临床中所表现的妊娠率。结果通过对2700个处于正常状态的受精卵进行观察分析后发现,受精卵原核同步发育组有1760个正常受精卵,其中处于优质状态的胚胎共有738个,比例约为41.93%;受精卵原核不同步发育组有940个正常受精卵,其中处于优质状态的胚胎共有317个,比例约为33.73%,通过比较上述两组优质胚胎率的数据可以得知两组的差异P<0.01,具有统计学上的意义。受精卵原核同步发育组中的胚胎的移植周期为389个,其中临床妊娠周期185个,临床妊娠率约为47.56%,着床胚胎269个,移植胚胎989个,着床率约为27.20%;受精卵原核不同步发育组中的胚胎的移植周期为40个,其中临床妊娠周期19个,临床妊娠率约为47.50%,着床胚胎22个,移植胚胎86个,着床率约为25.58%,通过比较上述两组临床妊娠率和着床率的数据可以得知两组的差异P>0.05,不具有统计学上的意义。结论通过联合评级观察发现受精卵原核同步发育组和受精卵原核不同步发育组在临床妊娠率和着床率上没有显著差异,所以受精卵原核评级只能在一定程度上影响胚胎的发育潜力,但却不会产生更高的临床妊娠率和着床率。
简介:采用液相色谱法测定了太门哲罗鱼Huchotaimen成熟卵子氨基酸组成,并用相关分析、通径分析和多元线性回归分析方法分析了氨基酸组成对受精率和发眼率的影响。结果表明:剔除对受精率决定性较小的影响因素,精氨酸(X1)、氨基酸总量(X2)和丝氨酸(X3)3个对受精率起决定性的因变量,与受精率的相关性依次为0.982、0.901和0.596,对受精率(Y)的决定程度由大到小依次为精氨酸>氨基酸总量>丝氨酸,拟合方程为Y=-2.892+0.960X1+0.062X2+0.367X3。剔除对发眼率决定性较小的影响因素,保留精氨酸和氨基酸总量2个对发眼率起决定性的因变量,与发眼率的相关性依次为0.954和0.902,精氨酸对发眼率的决定程度大于精氨基酸总量,拟合方程为Y=-2.917+0.742X1+0.096X2。
简介:摘要目的建立一个能够对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)卵子受精失败进行早期判断进而实施早期补救性人工激活的技术体系,并探讨其激活效率及应用价值。方法首先回顾性分析2017年1月至2018年3月期间广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心150个采用时差胚胎动态监测系统(Time-lapse)系统培养的ICSI周期第二极体(Pb2)释放时间分布及其与受精及胚胎发育结局的关系,探讨Pb2释放作为ICSI受精失败早期判断指标的可行性。其次采用随机对照试验,收集2018年3月至2019年6月期间93个ICSI助孕周期的225个受精失败卵子,根据人工激活方式不同分为未激活组(NAOA组)、早期激活组(RAOA组)、晚期激活组(LAOA组),同时将其余ICSI注射卵子作为对照组,比较4组受精及胚胎发育参数,探讨ICSI受精失败早期补救性人工激活的效率和应用价值。结果Time-lapse监测ICSI注射后卵子有Pb2释放组的受精率(99.91%)、双原核(2PN)受精率(97.76%)显著高于无Pb2释放组(0.03%、0.00%)且差异均具有统计学意义(P均<0.001);ICSI注射后卵子Pb2释放时间为(3.04±1.45) h,Pb2释放时间分布及占比分别为0~3 h(58.58%)、3~5 h(36.29%)、5~8 h(3.92%)、>8 h(1.21%);NAOA组Pb2释放率、受精率、2PN受精率均为0%,LAOA组2PN受精率(36.00%)、第3日(D3)优质胚胎率(8.00%)、第5日(D5)囊胚转化率(0%)、D5优质囊胚转化率(0%)均显著低于RAOA组(60.00%、44.19%、51.16%、25.58%)且差异均有统计学意义(P=0.005,P=0.002,P<0.001,P=0.005),同时均显著低于对照组(97.63%、48.62%、63.23%、37.94%)且差异均有统计学意义(P均<0.001);RAOA组Pb2释放率(84.00%)、受精率(81.33%)、2PN受精率(60.00%)、2PN卵裂率(95.56%)均显著低于对照组(100.00%、99.68%、97.63%、99.51%)且差异均具有统计学意义(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P=0.04),但D3优质胚胎率、D5囊胚转化率、D5优质囊胚转化率2组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论Time-lapse监测Pb2释放可以作为早期判断ICSI卵子受精失败的指标,在ICSI注射后5 h对受精失败卵子进行早期补救性人工激活可以获得正常受精和理想的胚胎发育结局。
简介:案例简介:某大学成教处处长曾某,党员。1999年4月以来利用职权擅自决定将收取学员的学杂费、住宿费大笔外借。先后借给私营企业某甲30万元、股份公司某乙50万元、集体企业某丙20万元进行经营。借期均一年,按吸收公款存款的20%计息。一年后该三家企业均按期归还了本息共120万元。问:曾某的行为如何定性?分歧意见:第一种意见认为曾某外借三笔款未经校方同意,但都全部收回,未造成损失,还为校方赢利20万元。其行为没有违反党纪,不构成违纪错误,不应追究其责任;第二种意见认为:曾某出借某乙和某丙项的行为属于单位之间的互借,可不构成违纪,但将学校30万元公款借给私营企业某甲进行经营的行为应以挪用公款定性;第三