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  • 简介:杆状病毒表面展示系统(BaculovirusSurfaceDisplay,BSD)是近年来发展起来的一种崭新的膜展示技术。其主要原理是通过基因工程的方法,将杆状病毒表面囊膜蛋白基因与所要展示的目的蛋白基因进行融合,形成重组杆状病毒。重组杆状病毒的囊膜蛋白在表达同时,目的蛋白也随即进行表达,并与囊膜蛋白共同运输至病毒囊膜处,特异的与锚定部位结合,展示在杆状病毒表面。该系统由于具有较强的可控性和较高的展示效率,目前已经被广泛应用于基因转导与基因治疗、较复杂的真核蛋白展示、新型疫苗研发以及单克隆抗体的制备等领域。本文对杆状病毒表面展示系统的研究现状进行了阐述和总结.并对其发展和应用前景做出了展望。

  • 标签: 杆状病毒 表面展示 囊膜蛋白 融合表达
  • 简介:目的利用昆虫细胞,杆状病毒系统表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白,用于E2蛋白功能、开发CSF新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法采用RT—PCR扩增CSFVE2基因,将PCR产物克隆到pGEM—T—Easy载体,将该基因插入到pFast—BacHTA载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western-blot及免疫组化鉴定。结果成功克隆CSFVE2基因,其核苷酸序列为1119bp。SDS-PAGE电泳结果显示表达E2蛋白相对分子质量约为43×10^3,Western-blot和免疫组化结果证实表达蛋白能够被CSFV标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒系统中的成功表达了CSFVE2蛋白,与CSFV标准阳性血清具有较好的反应性。

  • 标签: 猪瘟病毒 E2基因 杆状病毒 表达
  • 简介:目的探讨带有绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒修饰后的小鼠羊水干细胞(nlouseamnioticfluidstemcells,mAFSs)是否仍保持成骨分化潜能。方法体外原代培养小鼠羊水干细胞,并进行成脂成骨诱导分化,鉴定多向分化潜能;体外构建并扩增重组杆状病毒(Baculovirus—CMV—GFP,By—GFP);By—GFP体外转导小鼠羊水干细胞,流式细胞仪检测其转导效率;经Bv—GFP基因修饰后的小鼠羊水干细胞进行成骨诱导分化。结果小鼠羊水干细胞体外具有良好的增殖能力,3代后的细胞呈现较均一的梭形、漩涡状生长,且小鼠羊水干细胞体外具有成脂成骨分化潜能。体外成功构建重组杆状病毒,经Sf9细胞扩增后,极度稀释法测定其滴度可达10^9v.g/ml;Bv—GFP体外可较有效转导小鼠羊水干细胞,其转导效率为52.85%,且经Bv—GFP基因修饰后的小鼠羊水干细胞仍保持成骨分化潜能。结论小鼠羊水来源干细胞是一种理想的干细胞,杆状病毒是一种新型病毒基因载体,体外能较有效转导小鼠羊水干细胞且不改变其成骨分化潜能。经重组杆状病毒基因修饰的羊水干细胞会为今后的骨组织工程提供一种新的治疗模式。

  • 标签: 杆状病毒 羊水细胞 基因修饰 成骨分化
  • 简介:摘要昆虫杆状病毒表达载体系统是基于昆虫杆状病毒及其宿主细胞建立的真核表达体系,具有安全性高、重组蛋白表达水平高、能同时表达多个基因,可对重组蛋白进行正确折叠和翻译后修饰等优势,主要应用于预防性及治疗性疫苗和基因治疗药物的研发及生产。本文对该载体系统的关键技术及应用进展作一综述。

  • 标签: 昆虫细胞 杆状病毒 培养工艺 重组蛋白 基因治疗
  • 简介:目的研制人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1/E7CTL重组杆状病毒载体。方法以包含HPV16标准病毒株的质粒pHPV16为模板,采用PCR技术扩增HPV16主要衣壳蛋白L1(1-471aa)的基因序列,同时人工合成E7蛋白CTL表位E749-57的编码序列,将两个目的基因逐步连接构建重组质粒pUC19HPV16L1/E7CTL,HPV16L1/E7CTL片段经质粒pFastBac1转位至BacmidDNA后通过PCR鉴定重组杆粒。结果成功构建了包含融合基因HPV16L1/E7CTL片段的克隆质粒puc19HPV16L1/E7CTL,制备了L1/E7CTL重组杆状病毒载体杆粒BACMIDDNA。结论采用分子克隆技术构建了包含L1/E7CTL的重组杆粒BACMIDDNA,有利于下一步融合蛋白的表达,制备一种能够更有效激发CTL杀伤作用的嵌合病毒样颗粒疫苗,为疫苗研制打下基础。

  • 标签: 乳头瘤病毒16型 重组杆状病毒 疫苗
  • 简介:摘要目的评价重组流感病毒H7N9血凝素(hemagglutinin,HA)亚单位疫苗在动物中的免疫效果。方法利用杆状病毒系统表达分泌型的HA片段,单独或联合Al(OH)3佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠后,对小鼠进行H7N9毒株的攻击。分析重组H7N9 HA(rH7HA)的免疫保护效果。结果rH7HA加Al(OH)3佐剂与rH7HA单独免疫相比,在血清中诱导了更高的IgG滴度。最高剂量(1.500 μg)rH7HA加佐剂组诱导IgG滴度达215,单独诱导IgG滴度达213。但两者之间差异无统计学意义,说明免疫小鼠的rH7HA量达到1.5 μg即能够对同源病毒的感染提供保护。结论杆状病毒系统表达的分泌型HA通过腹腔注射能够保护小鼠抵抗致死性剂量的同源病毒的感染。

  • 标签: 流感病毒A型,H7N9亚型 重组H7血凝素 氢氧化铝佐剂 疫苗,亚单位
  • 简介:近年来,随着小龙虾价格持续走高,养殖周期短,效益好,养殖面积不断扩大,很多养殖朋友为了追求高产,密度放养也越来越大,养殖遇到的问题也越来越多;这其中,尤其以小龙虾白斑病毒病最为发病严重,死亡大,发病周期长,难治疗,很多养殖朋友部是病急乱投医,导致最后死亡是越来越大。白斑病毒属秆状病毒属C杆状病毒亚群中新病毒,当水温达到17-30℃的时候,即可产生毒力,也就是5、6月份,尤其是在25-28℃的水温条件下,毒力最强,当水温低于17摄氏度的时候,处于潜伏期,毒力最弱,养殖品种不受影响,当水温达到30℃以上的时候,病毒可被高温灭活,失去毒力;当池塘的pH低于5以下或高于12以上时,病毒可在一定时间内丧失活性。

  • 标签: 小龙虾 白斑症病毒病 防控措施
  • 简介:中国传统农业中,耕田的称农民,放蚕的呼蚕民,捕鱼的叫渔民。突然有一天,泥腿泥胳膊的农民,有了几亩圈,撂下锄杆子去养对虾,身份便成了民。其实,农民、蚕民、民都没走出农业学科。耕田、养蚕是传统的谋生手段,养是他们斗胆干起前人没有干过的农事,旨在追求更加美好的生活。

  • 标签: 对虾 传统农业 谋生手段 养蚕 农民 耕田
  • 简介:王与贼张相林时间:现在。地点:海边。养虾池边小屋门前。人物:王──养专业户。贼──外号“一顺手”的小偷。[台上一桌一凳,竖一木牌,上写:“对虾养殖培训班报名处”。[幕启:王正送一报名者离去。王(对边幕招手叮嘱)好好记着,后天上午八点准时...

  • 标签: 对虾养殖 虾池 边幕 给你 登记本 虾眼
  • 简介:阆中位于四川省南充市,嘉陵江中游,是国内硕果仅存的四大古城之一。古城之所以逐渐受到世人的追捧,那是因为物以稀为贵,因为人们想在古城的老建筑群里、老物件里,触摸到祖先曾经历过的那种烟火味儿,从而跨越时空,与先人展开一场心灵上的交流。

  • 标签: 嘉陵江中游 南充市 四川省 古城 建筑群
  • 简介:摘要目的总结人类免疫缺陷病毒(HIV)相关的杆状体肌病(NM;HIV-NM)的临床、病理和肌肉磁共振成像(MRI)特点。方法报道1例23岁男性HIV感染患者,出现进行性肢体近端无力、萎缩10个月余,于2021年6月初收入首都医科大学附属北京地坛医院神经内科。肌电图检查提示肌源性损害。血清肌酸激酶为202.4 U/L,CD4+淋巴细胞计数为585×106/L。血清单克隆免疫球蛋白(M蛋白)阴性。对该患者进行双大腿肌肉MRI检查、左侧肱二头肌活组织检查及基因检测。复习文献报道的HIV-NM患者的临床、病理和MRI改变。结果该患者的双大腿肌肉MRI显示水肿改变;肌肉活组织检查显示部分肌纤维内出现杆状体结构,伴随肌纤维萎缩和再生改变;基因二代测序未发现与NM相关的基因突变。给予静脉注射免疫球蛋白联合口服泼尼松治疗,患者无力症状明显改善。已报道的17例患者(含本例)年龄为(33.7±9.1)岁,男女比例15∶2,均出现肢体近端无力。肌酸激酶正常或轻度升高;血清M蛋白阳性患者3例(3/7);免疫抑制治疗有效。结论HIV-NM的主要临床特征为进行性肢体近端无力和肌肉萎缩,肌肉病理特点为萎缩肌纤维内出现大量杆状体,肌肉MRI可见肌肉水肿。这是首次报道的国内HIV-NM病例,该病可能为免疫性肌肉病的一个特殊亚型。

  • 标签: 肌病,杆状体 HIV 活组织检查 炎性肌肉病
  • 简介:,主要分为淡水和海水。我们常见的青虾、河虾、草虾、小龙虾等都是淡水;对虾、明虾、基围、琵琶、龙虾等都是海水

  • 标签: 淡水虾 小龙虾 基围虾 海水
  • 简介:  一天,我在妈妈的菜篮子里发现了一个活蹦乱跳的小生命.哦,原来是一个"漏网之鱼"--小虾.我赶紧拿来盛满水的杯子,小心翼翼地将小虾放入杯中.她一到水里,便一下子高兴了起来,欢快地在杯中跳起舞来.……

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  • 简介:在水里是透明的,看不见身体,只看见一双眼睛,黑漆皮灯笼似的,一闪而至。近了,脊背隐隐现出一条线,然后是弓起的尾巴,由于不断弯曲,仿佛棕色深重了。两排细爪急速划动,看上去却委婉之至,像是一个衣饰清爽的妇人在絮絮叨叨诉说往事。两排小黑点,如细碎的珠子,轮转不休。

  • 标签: 随笔 杂文 杂谈 阅读知识
  • 简介:雨溪两语:读完“舒心茶座”之后,你一定在思考关于男孩女孩的话题了。那么,著名作家秦文君的女儿、初二学生戴萦袅又是怎么看待男孩女孩的问题呢?她身边的男孩女孩们又在演绎怎样的故事呢?《男派·女派》,生动的情节不可不读。读完前面关于母亲节的文章,你是否深有感触?萦袅只是给堂妹的母亲夹了一只,就使堂妹的母亲深为感动。而不懂事的堂妹却使她的父母“叹了口气”又“叹了口气”。读读《》吧,文字真实朴质,却颇为感人。

  • 标签: 堂妹 母亲节 狼吞虎咽地吃 秦文君 初二学生 大虾
  • 简介:疣虫(bopyrids)隶属于节肢物动门,甲壳纲,软甲亚纲,等足目,寄生亚目,鳃虱科。寄生的等足类,根据其寄主的不同可以分为两大类,一类以鱼为宿主;另一类则寄生在甲壳类,而后者又以鳃虱科的种类最多和最为常见。隶属鳃虱科的疣虫又名“鳃虱”,多寄生在类或蟹类的鳃腔内,使鳃腔膨胀呈疣状,放名。

  • 标签: 虾疣虫 形态特征 生物学特性 生活史 寄生对象