简介：摘要目的建立以高效液相色谱法测定人血清中甲氨蝶呤浓度的方法。方法采用Shim-packVP-ODS(150mm×4.6mm,5μm)的色谱柱；流动相乙腈—0.3%磷酸（1585，V/V，用三乙胺调pH2.5）；紫外检测波长为302nm;柱温40℃;流速0.8mL•min-1。结果MTX在0.1～100.0μg•mL-1质量浓度内线性关系良好，Y=0.2+30174X，r=0.9994；MTX低、中、高(0.25μg•mL-1、12.50μg•mL-1、100.00μg•mL-1)3种浓度的平均回收率分别为104.0%、102.3%、102.5%。日内、日间RSD均<3%，最低血清检测浓度50ng•mL-1。结论高效液相色谱法测定甲氨喋呤的血药浓度灵敏度高，结果准确可靠，操作简便，能满足MTX血清浓度的测定。
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