简介：摘要糖尿病(DM)是一组常见的内分泌紊乱的疾病,糖尿病导致的死亡率及与其相关的并发症的发病率逐年增加,使之已成为全球一个急待解决的重要问题,中医在治疗预防糖尿病中具有自己的优势.导师冯明清教授亦根据自己诊疗经验以及现代糖尿病的临床变化特点和对“脾虚致消”理论的研究认为其实质应是“脾虚不及游移精气”的理论,自制复脾汤在临床治疗中取得了良好的效果.并进一步从实验的角度探讨脾胃与消渴病发病机理的研究具有重要的意义.关键词糖尿病复脾汤糖尿病大鼠胰腺GCKmRNA和GLUT２mRNA表达的影响中图分类号R５８文献标识码B文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－０１３７－０２

简介：在脂肪和肌肉房间，刺激胰岛素的葡萄糖举起被葡萄糖transporter主要调停4(GLUT4)，哪个到响应胰岛素刺激的房间表面的从细胞内部的分隔空间的translocates。AS160是Akt的底层之一并且在调整胰岛素的GLUT4translocation起重要作用。在这研究，(RUVBL2)象RuvB一样蛋白质2用与集体spectrometry相结合的哺乳动物的双人脚踏车亲密关系纯化(龙头)作为新AS160有约束力的蛋白质被识别。在3T3-L1adipocytes，RUVBL2高度被表示并且在cytosol主要是分布式的。在adipocytes的RUVBL2的弄空通过减少刺激胰岛素的AS160phosphorylation禁止刺激胰岛素的GLUT4translocation和葡萄糖举起。然而，人的RUVBL2的介绍能颠倒这禁止的效果。这些数据建议RUVBL2通过它和AS160的相互作用在刺激胰岛素的GLUT4translocation起一个重要作用。

简介：Thepurposeofthestudyistoestablishafluorescencequantitativereversetranscriptionpoly-merasechainresponse(FQ-RT-PCR)methodforthequantitativedeterminationofIL-2mRNAandIL-4mRNAinThcells,withwhichtheThcellsstatusofthepatientswithgynaecologicaltumorsandchronicrenalfailure(CRF)canbeanalyzed.IL-2cDNAandIL-4cDNAwereprepared,andtheplasmidpMD18carryingIL-2cDNAorIL-4cDNAfragmentwasconstructedandclonedasthetemplateforquantitativedetermination.Theprimersandprobeslabelledwith6-carboxy-fluorescein(FAM)and6-carboxy-tetrarnethylrhodamine(TAMRA)wereprepared,andtheexperimentalconditionswereoptimizedtosetuptheFQ-RT-PCRmethodforquantitativedeterminationofIL-2mRNAandEL-4mRNA.Thcellsenrichedfromperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)of20healthyvolunteers(HVs),16gynaecologicalbenign(GB)cases,18gynaecologicalmalignant(GM)tumorcasesand16chronicrenalfailure(CRF)patientsweretestedforIL-2mRNAandIL-4mRNAbyFQ-RT-PCR.Thehouse-keepinggeneβ-actinwasusedastheinternalcontrolgeneoftheexperiment.Thestandardcurveforlogconcentrationofseriesofquantitativetemplatesvsthresholdcycle(CT)wasestablishedbylinearregression,andthelinearrangewas102-107copies/μl.TheimprecisiontestshowedtheCVofinter-assayandintra-assayofahighcontentsamplebyFQ-RT-PCRwere7.8%and12.5%,respectively.TheCVofinter-assayandintra-assayofalowcontentsamplewere10.8%and19.5%,respectively.TheIL-2mRNAexpressionsinThofthepatientswithgynaecologicalmalignanttumor(comparedwiththeHVsandthepatientswithgynaecologicalbenigndisease)andinThoftheCRFpatients(comparedwiththeHVs)weredeclinedsignificantlyandatthesametimetheIL-4mRNAexpressionincreasedsignificantly(P<0.001).Asimple,sensitiveandaccurateFQ-RT-PCRmethodforthequantitativedetectionofIL-2mRNAandIL-4mRNAhasbeenestablished.TheIL-2mRNAandIL-4m

简介：目的：探讨运动对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠心肌葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）含量的影响,以期为运动预防胰岛素抵抗及其相关的心肌代谢性疾病提供新的理论依据。方法：雄性SD大鼠45只给予普通标准饲料适应性喂养1周后,随机分为3组：正常对照组（NC）、高脂饮食对照组（HC）、高脂饮食训练组（HE）。经16周高脂配方饲料喂养以诱发胰岛素抵抗（IR）,同时对HE组大鼠实施无负重游泳运动干预。选用胰岛素放射免疫分析法测定血清胰岛素（FINS）,铜显色法测定心肌游离脂肪酸（FFA）含量,采用Westernblotting方法测定大鼠心肌组织GLUT4含量来揭示运动干预改善胰岛素抵抗大鼠心肌代谢可能的作用机制。结果：HC组FINS明显高于NC组,ISI明显低于NC组,差异非常显著（P〈0.01）。HC组心肌FFA含量显著高于NC组,差异显著（P〈0.05）。HC组心肌组织GLUT4蛋白含量明显低于NC组,差异显著（P〈0.05）。HE组FINS明显低于HC组,ISI高于HC组,差异非常显著（P〈0.01）。HE组心肌FFA也明显低于HC组,但差异不具有显著性。HE组心肌组织GLUT4蛋白含量明显高于HC组,差异非常显著（P〈0.01）。结论：16周高脂饮食可以诱导大鼠IR的形成,而长期的运动训练可能主要通过影响心肌GLUT4活性而预防IR的形成。

简介：通过过度训练和补糖观察在过量运动后的不同血糖和肌糖原条件下大鼠骨骼肌的糖转运和PKb活性的变化，旨在从分子水平探寻过度训练的发生机制，为研发预防过度训练的手段和方法提供理论依据。

简介：目的：比较研究三黄降糖方和达美康对糖尿病性心肌病变的作用及心肌GluT4mRNA表达的影响。方法：以STZ造成大鼠糖尿病模型，灌胃三黄降糖方和达美康8周后，检测血糖、胰岛素、血脂、心脏重量，以RT－PCR法测定心肌GluT4mRNA。结果：糖尿病大鼠心脏重量增加，血糖升高，血清胰岛素水平降低，血清TC、TG、LDL－ch升高，心肌GluT4mRNA表达降低。三黄降糖方和达美康均可使糖尿病大鼠心脏重量减轻，两药对血糖有轻微降低作用，而对血清胰岛素水平无明显影响；两药均可防止心肌GluT4mRNA降低。达美康还可降低血清TC和LDL－ch。结论：三黄降糖方和达美康对糖尿病性心肌病变具有对抗作用，其作用与促进心肌局部GluT4mRNA表达，改善心肌细胞能量代谢有关。达美康还可能通过降低血脂而起作用。

简介：摘要目的寻找对肝移植受者术后早期发生重症监护室获得性衰弱(intensive care unit acquired weakness，ICUAW)有诊断价值的生物标记物。方法前瞻性纳入2017年9月至2019年8月期间收治的昆明市第一人民医院肝移植受者共62例，移植术后使用相同的免疫抑制方案治疗。术后入ICU时留取血液标本进行腺苷酸活化蛋白激酶-α(AMPK-α)、葡萄糖转运子-4(GLUT-4)的检测，采集临床和生化数据。移植受者清醒配合时使用医学研究委员会(Medical Research Council，MRC)评分表进行肌力检测并评分，<48分诊断存在ICUAW，据此将62例受者分为ICUAW组(17例)和非ICUAW组(45例)，对比两组受者年龄、性别、机械通气时间、ICU住院时间、血氧分压、收缩压、中心静脉压(CRP)、血糖、总胆红素、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GGT)、血尿素氮、血肌酐和AMPK-α、GLUT-4是否存在差异。使用受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve，ROC)及曲线下面积(area under the curve，AUC)评价AMPK-α和GLUT-4对ICUAW的预测价值。结果62例肝移植受者中有17例诊断ICUAW，占总受者数的27.42%。ICUAW组受者机械通气时间较长(27 h比10 h，P<0.05)，ICU住院时间较长(4 d比3 d，P<0.05)。ICUAW组受者与非ICUAW组受者AMPK-α比较，差异无统计学意义[(1.01±2.43)U/ml比(1.74±4.24)U/ml，95%CI：-2.92~1.45，P>0.05)]，GLUT-4在ICUAW受者中表达下降[(137.86±127.87)ng/L比(419.15±267.68)ng/L，95%CI：－417.13~－145.45，P<0.05]。GLUT-4 ROC曲线提示对ICUAW的发生有一定的阴性预测价值：AUC为0.88，SE为0.05，P<0.05，95%CI：0.78~0.98。结论ICUAW受者机械通气时间和ICU住院时间较长。GLUT-4的监测对肝移植受者发生ICUAW有一定的预测价值，GLUT-4升高受者出现ICUAW的几率较低。临床工作中可以通过测定GLUT-4的血清浓度来指导ICUAW的诊断和治疗。

简介：

简介：Glucosetransporter4(GLUT4)isresponsibleforinsulin-stimulatedglucosetransportingintotheinsulin-sensitivefatandmusclecells.ThedynamicsofGLUT4storagevesicles(GSVs)remainstobeexploredanditisunclearhowGSVsarearrangedbasedontheirmobility.Weexaminedthisissuein3T3-L1cellsviainvestigatingthethree-dimensionalmobilityofsingleGSVlabeledwithEGFP-fusedGLUT4.Athinlayerofcytosolrightadjacenttotheplasmamembranewasilluminatedandsuccessivelyimagedat5Hzunderatotalinternalreflectionfluorescencemicroscopewithapenetrationdepthof136nm.Employingsingleparticletracking,thethree-dimensionalsubpixeldisplacementofsingleGSVwastrackedataspatialprecisionof22nm.Boththemeansquaredisplacementandthediffusioncoefficientwerecalculatedforeachvesicle.Trackingresultsrevealedthatvesiclesmovedasifrestrictedwithinacagethathasameanradiusof160nm,suggestingthepresenceofsomeintracellulartetheringmatrix.ByconstructingthehistogramofthediffusioncoefficientsofGSVs,weobservedasmoothdistributioninsteadoftheexistenceofdistinctgroups.TheresultindicatesthatGSVsaredynamicallyretainedinacontinuousandwiderangeofmobilityratherthanintoseparateclasses.

简介：摘要目的研究姜黄素对STZ诱导糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的影响及其机制。方法雄性SD大鼠腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠模型。成模大鼠分为糖尿病组(DM)，糖尿病＋姜黄素组(DM＋Cur)，糖尿病＋缓冲液对照组(DM＋NC)。以正常SD大鼠为正常对照组(NC)。DM＋Cur组予姜黄素灌胃治疗，DM＋NC组给予等体积缓冲液灌胃。连续给药12周。12周后检测血糖变化，高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验检测外周胰岛素抵抗。实验结束处死大鼠，取骨骼肌提取总蛋白及细胞膜蛋白，Western blot法检测骨骼肌磷酸化PI3K及AKT和总PI3K及AKT水平，检测骨骼肌总GLUT4及细胞膜上GLUT4水平，免疫荧光检测骨骼肌细胞膜上GLUT4水平。多组间的比较采用单因素方差分析，评估PI3K、AKT磷酸化程度及GLUT4向细胞膜转位的变化。结果姜黄素治疗组血糖水平低于糖尿病组[(18.67±1.99对24.38±2.88) mmol/L，P<0.05]，胰岛素抵抗较糖尿病组减轻[平均GIR(14.69±0.29对10.25±0.30) mg·kg-1·min-1, P<0.01]，胰岛素信号通路中p-PI3K、p-AKT水平升高，GLUT4向细胞膜转位增多。结论姜黄素通过激活PI3K/AKT通路，促进GLUT4向细胞膜转位，增加骨骼肌葡萄糖摄取，最终改善胰岛素抵抗。

简介：目的：观察小鼠艾灸血清体外对EL-4淋巴瘤细胞Fas、bcl-2mRNA及蛋白表达的影响。方法：采用小鼠艾灸血清培养EL-4淋巴瘤细胞24h后，应用原位杂交方法检测EL-4细胞Fas、bcl-2mRNA的表达，免疫细胞化学方法观察Fas、bcl-2蛋白表达。结果：与正常小鼠血清比较，艾灸血清培{f-EL-4细胞后，在bcl-2mRNA及蛋白水平上，阳性细胞百分率均明显降低（P〈0．05），在FasmRNA及蛋白水平上，阳性细胞百分率均明显升高（P〈0．05）。结论：艾灸血清能够下调EL-4细胞bcl-2mRNA及蛋白的表达，上调FasmRNA及蛋白的表达。

简介：目的观察急性脑梗死患者Toll样受体4（TLR4）mRNA表达及与TNF-α仅浓度的相关性，初步探讨TLR4在急性脑梗死缺血炎性损伤中的作用，为临床治疗脑梗死提供新的思路。方法分别运用RT-PCR法、ELISA法测定35例急性脑梗死患者的外周血单个核细胞（淋巴细胞、单核细胞）TLR4mRNA表达及血清TNF-α仅浓度，同期与20例正常者、20例动脉粥样硬化患者比较。结果脑梗死组发病第1天TLR4mRNA表达、血清TNF-α仅浓度均显著高于正常对照组和动脉粥样硬化组（P〈0．01）。TLR4mRNA表达与血清炎性因子TNF-α仅浓度呈正相关（P〈0．01）。结论脑梗死患者急性期外周血单个核细胞TLR4mRNA表达上调，可能通过促使炎性因子产生分泌增多来介导脑缺血炎性损伤。

简介：目的：研究不同肌糖原状态下运动诱导肌源性白细胞介素6（Interukin-6,IL-6）表达及蛋白释放与葡萄糖转运体4（GlucoseTransport4,GLUT4）基因表达的关系。方法：通过特定的运动方案和饮食方案造成大鼠在运动前体内肌糖原含量不同,再观察定量负荷跑台运动后肌源性IL-6表达及释放与葡萄糖转运体GLUT4基因表达的变化规律。结果：血清IL-6浓度在运动30min后显著增加,运动120min后达到峰值,运动后逐渐降低;骨骼肌IL-6mRNA在运动120min后显著增加,运动后3-6h继续增加至峰值;骨骼肌GLUT4mRNA在运动时并未增加,而在运动后3h开始增加,运动后6h达到峰值。上述三个指标在低肌糖原组的增加与正常糖原组相比更加显著。结论：低肌糖原含量可以促进运动中IL-6的释放及运动后恢复期IL-6和GLUT4的基因表达;运动导致恢复期GLUT4基因表达的增加很有可能与肌源性IL-6的表达及IL-6的自分泌作用有关。

简介：

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简介：摘要目的探讨CXCL12/CXCR4/CXCR7 mRNA及其蛋白在子宫腺肌病(AM)患者子宫内膜与肌层组织的表达及其临床意义。方法选择2016年1月至2017年12月，于台州市第一人民医院妇产科接受子宫全切及次全切术或病灶切除术，并经术后组织病理学检查确诊为AM的30例患者为研究对象，纳入研究组(n＝30)。选择同期于同一家医院接受子宫全切及次全切术，并经术后组织病理学检查确诊为子宫肌瘤的30例患者作为对照，纳入对照组(n＝30)。研究组患者术中留取在位子宫内膜及含异位病灶子宫肌层组织，对照组患者术中留取在位子宫内膜及子宫正常肌层组织，采用实时荧光定量PCR和Western blotting，分别检测子宫内膜及肌层组织中CXCL12/CXCR4/CXCR7 mRNA及其蛋白表达水平。采用成组t检验，对2组患者CXCL12/CXCR4/CXCR7 mRNA及其蛋白相对表达水平进行比较。本研究遵循的程序符合病例收集医院人体试验委员会所制定的伦理学标准，得到该委员会批准(审批文号：2015-KY004-08)，并与受试者签署临床研究知情同意书。2组患者年龄等一般临床资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结果①研究组患者在位子宫内膜及子宫肌层组织CXCL12 mRNA表达水平，分别为(0.05±0.01)与(0.24±0.03)，均显著高于对照组的(0.02±0.01)与(0.11±0.02)，并且差异均有统计学意义(t＝2.707、P＝0.014，t＝3.196、P＝0.009)。研究组患者在位子宫内膜组织CXCR7 mRNA表达水平为(0.007±0.002)，显著高于对照组的(0.002±0.000)，并且差异有统计学意义(t＝2.226、P＝0.035)；而在2组患者子宫肌层组织的表达水平比较，则差异无统计学意义(P>0.05)。2组患者在位子宫内膜及子宫肌层组织CXCR4 mRNA表达水平分别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。②2组患者在位子宫内膜及子宫肌层组织CXCL12蛋白表达水平分别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组患者在位子宫内膜组织CXCR7蛋白表达水平为(0.88±0.19)，显著高于对照组的(0.72±0.17)，而在子宫肌层组织的表达水平为(0.69±0.21)，显著低于对照组的(1.09±0.29)，2组分别比较，差异均有统计学意义(t＝2.016、P＝0.046，t＝－2.807、P＝0.019)。研究组患者在位子宫内膜组织的CXCR4蛋白表达水平为(2.08±0.27)，显著低于对照组的(2.99±0.87)，并且差异有统计学意义(t＝－2.228、P＝0.036)，而2组患者子宫肌层的表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论CXCL12/CXCR4/CXCR7在AM的发生、发展中发挥作用，其机制可能与CXCR7有关。CXCL12在AM发病中存在转录后调节。

简介：

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简介：目的探讨GATA-3及Th2细胞因子IL-4与多发性肌炎（PM）/皮肌炎（DM）的关系。方法用RT-PCR方法检测PM/DM患者外周血单个核细胞（PBMC）中GATA-3、IL-4的mRAN表达,并与正常健康人进行比较。结果PM、DM组中GATA-3mRNA表达阳性率（85.7%,86.4%）均高于正常对照组（25%）（P〈0.05）;PM、DM组GATA-3的表达强度（0.268,0.411）均高于正常对照组（0.000）（P〈0.05）;皮肌炎IL-4mRNA的表达强度（0.251）高于正常对照组（0.000）（P〈0.05）;GATA-3与IL-4的表达强度呈正相关（r=0.475,P〈0.05）。结论皮肌炎的Th2细胞过度分化及体液免疫增强可能与GATA-3表达增强有关。

简介：目的探讨多粘菌素B(PMB)对内毒素(LPS)刺激的巨噬细胞Toll4、TNF-α、IL-6mRNA表达的抑制作用.方法应用鲎试剂法测定PMB对LPS的中和作用,运用鼠腹腔巨噬细胞分离培养,并加入PMB与LPS培养3h,RT-PCR检测Toll4、TNF-α、IL-6mRNA转录水平变化.结果PMB具有较强的中和LPS能力,其IC50约为4.35±0.91μmol·L-1;PMB1.75mg·ml-1能够显著抑制1μg的LPS刺激的鼠腹腔巨噬细胞Toll4、TNF-α、IL-6mRNA的表达水平(P<0.05).结论PMB可能通过对LPS的中和作用,进而抑制LPS刺激细胞因子的mRNA表达.