简介：摘要目的探讨脂多糖（LPS）诱导的O-连接的N-乙酰葡萄糖胺（O-GlcNAc）修饰是否参与内皮细胞炎症信号通路。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC），取对数生长期细胞用于实验，分为空白对照组、LPS组（2 000 mg/L的LPS）、O-GlcNAc转移酶（OGT）过表达（OGT-OE）+LPS组（转染OGT-OE质粒+2 000 mg/L的LPS）、蛋白激酶C（PKC）抑制剂+LPS组（10 μmol/L的Go 6983+2 000 mg/L的LPS）、Rho蛋白家族RhoA抑制剂+ LPS组（40 μmol/L盐酸罗红+ 2 000 mg/L的LPS）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂+LPS组（1 μmol/L的SL-2052+2 000 mg/L的LPS）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）抑制剂+ LPS组（10 μmol/L的PP2+2 000 mg/L的LPS）和小干扰RNA（siRNA）作用的Akt（si-AKT）+LPS组（si-Akt+2 000 mg/L的LPS）。各组细胞经LPS处理24 h后，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测炎症细胞因子〔白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）〕的转录水平；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）测定OGT、O-GlcNAc、Akt、细胞外信号调节激酶（ERK）、p38丝裂素活化蛋白激酶（p38MAPK）、核转录因子-κB p65（NF-κB p65）和信号转导及转录激活因子3（STAT3）的蛋白表达或磷酸化水平。结果与空白对照组相比，LPS组细胞中OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均降低，并伴随ERK、p38MAPK和STAT3的磷酸化水平升高，且炎症因子的转录水平亦显著升高〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：4.71±0.60比1.03±0.29，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：1.89±0.11比1.04±0.35，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.06±0.18比1.02±0.21，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：2.94±0.57比1.01±0.17，均P<0.05〕，说明LPS会导致O-GlcNAc修饰水平降低、炎症信号通路激活及炎症因子表达升高。与LPS组相比，OGT-OE+LPS组细胞ERK、p38MAPK、NF-κB p65和STAT3磷酸化水平下降，伴随炎症因子表达显著下降〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：0.12±0.01比0.90±0.17，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.31±0.01比0.91±0.14，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.64±0.02比1.13±0.16，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.11±0.01比0.93±0.11，均P<0.05〕，说明OGT水平增高可抑制LPS作用下的内皮细胞炎症信号通路部分激活。与空白对照组比较，LPS组Akt磷酸化水平升高；与LPS组相比，给予PKC抑制剂、RhoA抑制剂、PI3K抑制剂和Akt抑制剂预处理后，OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均下调；其中PP2+LPS组IL-6、TNF-α、ICAM-1的转录水平均较LPS组明显下降〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：1.46±0.16比3.55±0.87，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.98±0.14比1.76±0.10，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：1.39±0.24比2.04±0.13，均P<0.05〕，而VCAM-1无明显变化。与LPS组相比，si-Akt+LPS组OGT表达及O-GlcNAc修饰水平均下降，且炎症因子的转录水平亦明显下调〔IL-6 mRNA（2-ΔΔCt）：0.75±0.03比0.99±0.09，TNF-α mRNA（2-ΔΔCt）：0.69±0.01比1.10±0.08，ICAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.76±0.01比0.99±0.02，VCAM-1 mRNA（2-ΔΔCt）：0.93±0.08比1.20±0.21，均P<0.05〕，说明Akt参与了LPS对OGT的作用过程，并影响了炎症因子表达。结论LPS作用下的内皮细胞O-GlcNAc修饰水平下降，促进了炎症信号通路部分激活，主要涉及ERK、p38MAPK和STAT3，并影响了炎症因子表达；Akt可能参与了LPS对O-GlcNAc修饰的抑制作用。

简介：目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）在肝癌细胞增殖中的作用及其机制.方法利用靶向C/EBPα的RNAi慢病毒感染Hep3B肝癌细胞系,构建C/EBPα肝癌细胞系敲减模型.采用qRT-PCR和Westernblot分别检测C/EBPαmRNA和蛋白表达水平,采用CCK-8检测敲减C/EBPα后对Hep3B细胞增殖的影响,采用在正常高葡萄糖（NG,4.5g/L）和低葡萄糖（LG,1g/L）条件下培养细胞的增殖变化,采用Westernblot法检测不同葡萄糖浓度条件下在C/EBPα敲减细胞和对照细胞乙酰葡糖胺转移酶（OGT）、乙酰葡糖胺水解酶（OGA）和整个O-GlcNAc糖基化水平.结果靶向C/EBPα的RNAi慢病毒感染Hep3B肝癌细胞后,C/EBPαmRNA水平下调了（7.5±2.3）倍（P〈0.05）,蛋白表达水平下调了（8.8±0.25）倍（P〈0.001）,提示C/EBPα敲减细胞系构建成功;敲减C/EBPα后明显促进肝癌细胞的体外增殖;在低葡萄糖条件下刺激48h和72h,敲减C/EBPα分别促进细胞增殖15.4%（P〈0.05）和25.0%（P〈0.01）;敲减C/EBPα后细胞OGA蛋白表达水平在正常高糖和低糖刺激24h和48h时分别下调了70.1%（P〈0.01）、51.4%（P〈0.05）和61.2%（P〈0.05）,整体O-GlcNAc糖基化表达水平上调,在低糖刺激48h时升高80.6%.结论敲减转录因子C/EBPα可以提高细胞整体O-GlcNAc糖基化水平,从而促进肝癌细胞的体外增殖.

简介：关于O2+、O2-、O22-、O3、O3-结构,是一个很重要的问题.弄清楚它们的结构就不难了解由它们所引起的化学反应及形成的化合物的性质.本文只想简析它们的结构,而对于它们的性质将不加详细讨论.

简介：O2O的概念之争O2O即OnlineToOffline，它将线下商务的机会与互联网相结合，使互联网成为线下交易的前台。

简介：“上火”为民间俗语，又称“热气”，中医认为人体阴阳失衡，内火旺盛，即会一L火。因此所谓的“火”是形容身体内某些热性的症状，而上火也就是人体阴阳失衡后出现的内热症候。一般认为“火”可以分为“实火”和“虚火”两大类，

简介：O2O模式是2010年由AlexRampell提出来的，英文为OnlinetoOffline，意思是将线下商务的机会与互联网结合在一起，让互联网成为线下交易的前台。这个模式使线下服务可以在线揽客，消费者可以在线筛选服务，成交可以在线结算，很快达到规模。该模式最重要的特点是：推广效果可查，每笔交易可跟踪。020模式简化了中间渠道，使得整个物品或服务的流转成本大大降低，这种模式正成为一种潮流。

简介：语言的运动,在西方理性和逻辑的后面,也在东方“不立文字”“无言”的后面。语言(尤其是汉语)运动的轨迹才呈现生命的疆界。

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简介：在一份份＂O2O死亡名单＂陆续公布后，医药O2O领域也终于迎来了视野当中的首例--药给力的跌倒。自此，有大量持悲观论点的文人墨客开始漫天抛洒谣言：医药O2O将死。事实上，笔者从开始就笃定医药O2O具有顽强的生命力，而信心正来自其存在的合理性：

简介：各路概念新颖的租赁平台在资本市场中春风得意，激烈地争夺着用户和数据资源，它们之间的较量正在倒逼传统租房行业变革。“互联网＋”的热风一起，吹燥了无数蠢蠢欲动的资本和机构，当租房市场乘骑了“互联网＋”的东风，一切都变得不一样了。

简介：O2O（OnlinetoOffline）模式就是将线下商务的机会与互联网结合在一起，即线上订购、线下消费模式，让互联网成为线下交易的平台，把线上的消费者带到现实的商店里。

简介：“双11”后等待快递的日子里，社区O2O又成热点。房地产行业进入白银时代，房企逐渐意识到物业业务中隐藏的价值，并依托互联网，通过打造社区O2O平台，深层次挖掘物业服务中存在的价值。

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简介：今年初夏，经济领域能与巴西足球世界杯热度相匹敌的，恐怕只有O2O了。过了这个6月，如果你想去万科的商业广场，百度地图已经能为你导航到商场某层的具体商家；如果你是广州恒大的球迷，可能就要被淘宝了；如果你想使用58同城这个“神奇的网站”．可能通过微信就可以了。

简介：9月17日,“到家美食会”正式宣布完成D轮融资,本轮融资金额5000万美元,由京东和麦格理共同领投。此前到家美食会已先后获得晨兴、鼎辉、京东等国际知名风投和上市公司的三轮投资。

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简介：在B2B、C2C、B2C之后,O2O的到来将彻底抹平线上与线下的鸿沟。无论眼下电商发展的如何迅猛,日常生活中的大多数消费依旧离不开到店实现。一种能全面融合线上虚拟经济与线下实体店面经营的商业模式正在浮现,被称为OnlineToOffine,简称O2O模式。

简介：中国互联网O2O模式已成为互联网发展风头强劲的业务模式，有望造就一批知名的互联网企业。

简介：纵观国内电商格局，综合类电商平台形成了多寡头垄断局面，垂直电商一直被压制着，甚至一些曾经红极一时的垂直类电商也如昙花一现般地陨落了。而随着互联网的不断演进和发展，特别是移动互联网、O2O的兴起，让垂直电商看到了春天，母婴便是垂直电商中的异军，不但成为资本投资的宠儿，而且成为近年来电商最火的话题之一。

简介：越来越多的传统品牌企业开始瞄准电子商务，将销售战役转移到了网上，其中不乏李宁、七匹狼、海尔、曲美等知名企业。据艾瑞咨询数据显示，2010年中国电子商务交易规模达4．8万亿元，较2009年增长33．5％。而且未来这一增速将有比较大的提升。达到40％至50％的增速。