简介:摘要目的验证末端尿苷基转移酶(TUT4)通过影响miR132/212簇的尿苷化作用影响食管上皮细胞(HEEC)的放射敏感性。方法本研究通过PCR的方法检测0、2、4、6和8 Gy X射线照射后0、6、18、24和48 h HEEC中TUT4的表达。将细胞分为阴性对照组、下调TUT4表达组(shTUT4组)、单纯6 Gy照射组(6 Gy组)、6 Gy照射+下调TUT4表达组(6 Gy+shTUT4组)分别检测TUT4对细胞放射敏感性、细胞增殖、细胞周期、线粒体损伤、氧自由基产生的影响;通过PCR检测下调TUT4表达对miR132/212尿苷化的影响;克隆形成和增殖实验检测过表达miR132/212及miR132/212+UUU(末端添加3个尿嘧啶的miR132/212)时HEEC的放射敏感性;增殖实验检测在下调TUT4表达且过表达miR132/212及尿苷化miR132/212时HEEC的增殖情况。结果PCR结果显示,2、4、6和8 Gy X射线照射后TUT4表达增加,差异有统计学意义(t=12.84、62.06、27.86、32.43,P<0.05)。下调TUT4表达可增加HEEC的放射敏感性,D0、Dq、SF2值分别为0.79、1.61、0.47,与对照组比较差异有统计学意义(t=13.2、5.85、7.31,P<0.05),放射增敏比(SERD0)为1.41;且经6 Gy照射后,低表达TUT4组细胞增殖减少(t=7.12、13.63,P<0.05)、S期细胞增加(t=11.98,P<0.05)、线粒体损伤增加(t=11.98,P<0.05)、氧自由基产生增加(t=15.65,P<0.05)。进一步研究结果表明,下调TUT4表达可使miR132/212表达增加,miR132/212+UUU表达减少(t=27.90、60.99,P<0.05);而过表达miR132/212和miR132/212+UUU也可影响HEEC的放射敏感性,SERD0分别为1.20、0.71。双重转染实验证明,TUT4低表达且miR132/212过表达细胞的增殖能力较单纯TUT4低表达时更弱(t=4.76、7.65,P<0.05);同时TUT4低表达且过表达miR132/212+UUU时细胞增殖能力较单纯TUT4低表达更强,差异有统计学意义(t=7.22,P<0.05)。结论X射线可增加HEEC中TUT4的表达,TUT4可降低HEEC放射敏感性、减轻放射损伤,其机制与miR132/212的尿苷化相关。
简介:[摘要]目的:研究中药白芍不同炮制品的芍药苷含量的差异。方法:选取白芍的生品、盐制品、醋制品、酒制品、炒制品作为研究对象,采用高效液相色谱仪测定芍药苷的含量。结果:生白芍中芍药苷含量最高(72.35±0.23),其次为白芍的炒制品(61.32±0.18)、盐制品(60.23±0.21)、酒制品(58.27±0.19)、醋制品(56.37±0.24)。实验结果表明,白芍不同的炮制品中芍药苷的含量存在明显差异,由高到低分别为生白芍>炒制品>盐制品>酒制品>醋制品,P<0.05。结论:中药白芍的不同炮制品中芍药苷的含量由高到低为生白芍>炒制品>盐制品>酒制品>醋制品,传统的白芍炮制工艺中生白芍的芍药苷含量最高。
简介:【摘要】本文通过初中数学总复习的作用和重要性,根据复习课的一般规律,结合实例,阐述了如何有计划、有步骤地进行初中数学总复习。复习课应该包含的四个环节。要上好一节复习课,首先要了解学生情况、明确复习目标;其次要追本溯源,系统掌握基础知识、贯通知识点;再次要精选课堂练习,集中训练,争取最佳效果;第四要内容再现、布置课后作业。
简介:摘要:EPC设计管理立足点是从共赢的大局出发,以限额设计及优化设计为手段,在时间轴上,融合了商务、施工、采购和运营的设计理念,实现了进度和质量两手抓,最终达到业主和总承包方共赢目的。“着眼全局,分工明确,留有富余”。 本文就对