简介:摘要目的探讨重症手足口病(HFMD)患儿血清及脑脊液Bcl-2/腺病毒E1B19kDa相关蛋白3(BNIP3)的表达水平及其临床意义。方法90例HFMD患儿分为危重型组(临床分期3期)、重型组(临床分期2期)和经脑脊液等检查排除中枢神经系统感染的普通型组(临床分期1期),每组30例;另选取同期健康体检的30例儿童作为对照组。测定HFMD患儿治疗前后血清及脑脊液BNIP3水平,并同时测定患儿血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白水平,分析其与BNIP3相关性。采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价BNIP3对HFMD病情严重程度的预测效能。结果危重型组患儿血清BNIP3及S100B蛋白、NSE水平均显著高于其他3组(P<0.01),危重型组患儿脑脊液BNIP3水平显著高于其他2组HFMD患儿(P<0.01);重型组患儿血清BNIP3及S100B蛋白、NSE水平均较普通型和对照组明显升高(P<0.01),重型组脑脊液BNIP3水平亦较普通型组明显升高(P<0.01)。与治疗前相比较,危重型组和重型组治疗后血清和脑脊液BNIP3水平及血清S100B蛋白、NSE水平明显下降(P<0.01)。血清及脑脊液BNIP3水平与S100B蛋白、NSE水平呈正相关(P<0.01)。当血清BNIP3在3.015 μg/L时其Youden值最大,对重型HFMD预测的灵敏度为83.33%,特异度为90.00%,脑脊液BNIP3在1.735 μg/L时其Youden值最大,对重型HFMD预测的灵敏度为73.33%,特异度为93.33%。结论BNIP3与重症HFMD脑损伤的病理过程相关,检测BNIP3水平有助于判断HFMD病情严重程度及预后。
简介:Someantitumoractivitiesofcomponent(E),extractedfromtherootofFagopynumCymosum(Trev)Meisn(FCTM),haverecentlybeendiscoveredinvivoandinvitro.ThecomponentE(CE)’spatternofactionwithtumorcellularDNAatthemolecularpharmacologicallevelwasinvestigatedbymacromolecularsynthesisexperiment(MSE)andhumanDNAinteractionsystemestablishedinourlaboratory.Theexperimentsdemonstratedthat,invitro,theagentcouldmarkedlyinhibittheincorporationof3H-TdRintothecellularDNA,andtheIC50inP388leukemiacellandinSGC-7901cellwas17.86μg/mland110.4μg/ml,respectively.Theagent,atmg/mllevel,couldproduceanintercalationreversionpatternwithDNAwithinashorttime(2hours).Butwhentheintervalwasprolongedforover4hours,theactionchangedtointercalationirreversiblepattern.Accordingtotheseobservations,theauthorsinferthatCEinteractswithDNAintwoways-directlyandindirectly.Theindirectaction,especiallyinlowconcentr
简介:目的探讨维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用及机制。方法健康雄性纯种Wistar大鼠9只,鼠龄2~3个月,体质量180~200g,由长春市高新开发区实验动物中心提供(清洁级)。无噪声暴露及耳毒性药物使用史,耳廓反射正常,实验前清洁外耳道,显微镜下检查均无中耳炎。以听阈、耳蜗基底膜铺片及免疫荧光染色为指标,观察大白鼠在稳态噪声持续暴露之前30d至暴露后7d,灌维生素E及生理盐水,对大白鼠听觉脑干电位分析和耳蜗外毛细胞(OHC)丢失率分析及NF-κB在耳蜗毛细胞中表达定量分析。结果维生素E在噪声暴露后大白鼠听力阈值明显低于单纯噪声组,OHC丢失率也明显降低,免疫荧光染色结果显示VE干预组的耳蜗细胞表达NF-κB的强度低于单纯噪声组(P〈0.05)。结论维生素E在噪声暴露引起的大白鼠听力损伤有明显的保护作用,通过上调耳蜗毛细胞中NF-κB的表达。
简介:目的研究HPV16E6蛋白及抑癌基因p53在口腔癌中的表达.方法回顾性分析100例口腔癌患者的临床资料和病理切片,采用免疫组织化学方法检测口腔癌组织中p53和HPV16E6蛋白的阳性表达情况,分析其与患者临床分期和病理分级的关系.结果男性口腔癌患者的p53阳性表达率低于女性患者,HPV16E6阳性表达率高于女性患者;年龄﹥50岁口腔癌患者的p53阳性表达率高于年龄≤50岁的患者,HPV16E6阳性表达率低于年龄≤50岁的患者,但差异均无统计学意义(P﹥0.05).口腔癌患者的组织切片显示,p53阳性表达细胞较少,而HPV16E6阳性表达细胞较多.随着患者临床分期的升高(Ⅰ~Ⅳ期),p53阳性表达率呈下降趋势,HPV16E6阳性表达率呈上升趋势,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者与Ⅰ期患者的p53和HPV16E6阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);随着患者病理分级的升高(Ⅰ~Ⅲ级),p53阳性表达率呈下降趋势,HPV16E6阳性表达率呈上升趋势,Ⅱ、Ⅲ级患者与Ⅰ级患者的p53和HPV16E6阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论口腔癌患者的p53阳性表达率随患者病理分级与临床分期的升高而降低,HPV16E6阳性表达率随患者病理分级与临床分期的升高而升高,p53阳性表达率的降低和HPV16E6阳性表达率的升高可能与口腔癌的发生和发展有关.
简介:摘要目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16/18E6蛋白在肺腺癌患者组织和癌旁组织中的表达情况及临床意义。方法选取60例经病理确诊为肺腺癌的患者的病理组织标本及对应的癌旁组织,免疫组化检测HPV16/18E6在肺腺癌患者组织中的表达情况,χ²检验分析HPV16/18E6的表达差异与肺腺癌患者临床特征的关系。利用细胞转染技术建立A549肺腺癌HPV16/18 E6高表达细胞株,通过噻唑蓝法比较E6组、对照组和A549组对顺铂耐药性的差异,并计算半抑制浓度(IC50)。结果60例入选病例中,男性29例(48%),女性31例(52%),年龄(55.5±2.4)岁。肺腺癌患者病理组织中HPV16/18E6阳性率为48%(29/60),高于癌旁组织18%(11/60),差异有统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、年龄、性别、吸烟及肿瘤大小的患者中,HPV16/18E6阳性率差异均无统计学意义。E6组顺铂IC50(111 mg/L)高于对照组(75 mg/L)和A549组(79 mg/L),差异有统计学意义(P<0.05)。结论高危型HPV16/18E6在肺腺癌患者中高表达,且与TNM分期、年龄、性别、吸烟及肿瘤大小无关。高危型HPV16/18E6对化疗药物的耐药性有影响。
简介:摘要目的研究核转录因子E2F6在人恶性黑素瘤组织和细胞系中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞A375增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集重庆市中医院2012年1月至2017年12月皮肤科确诊的50例皮肤恶性黑素瘤和30例色素痣冻存组织及石蜡切片。通过qRT-PCR分析E2F6 mRNA在人恶性黑素瘤和色素痣组织及7株恶性黑素瘤细胞系(HM、A375、WM451、WM35、SK-MEL-1、Hs-695T、MDA-MB-435s)和色素痣细胞中的表达,免疫组化和Western印迹检测E2F6、β联蛋白在人恶性黑素瘤组织中的表达。采用脂质体转染法将E2F6抑制质粒和对照质粒转染至A375细胞,通过qRT-PCR和Western印迹验证E2F6基因的敲减效率。通过CCK8、软琼脂平板克隆实验、Transwell迁移和侵袭实验、3D细胞培养实验检测E2F6基因敲减对A375细胞增殖、迁移和侵袭的影响,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,通过Western印迹检测总β联蛋白、活化β联蛋白、c-Myc和细胞周期蛋白D1等水平。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验;采用Pearson相关系数分析皮肤恶性黑素瘤中E2F6和β联蛋白表达的相关性。结果7株恶性黑素瘤细胞系E2F6 mRNA相对表达水平均高于色素痣细胞(均P < 0.001)。qRT-PCR显示,皮肤恶性黑素瘤组织中E2F6 mRNA的相对表达(0.000 55 ± 0.000 17)高于色素痣组织(0.000 18 ± 0.000 09,t = 3.22,P < 0.001)。免疫组化、Western印迹显示,皮肤恶性黑素瘤组织中E2F6的相对表达水平高于色素痣组织(均P < 0.001),而β联蛋白的相对表达水平低于色素痣组(均P < 0.001)。相关性分析显示,恶性黑素瘤组织中E2F6蛋白与β联蛋白的表达呈负相关(免疫组化:r = -0.56,Western印迹:r = -0.63,均P < 0.01)。敲减A375细胞E2F6基因后,E2F6抑制组E2F6 mRNA、蛋白相对水平低于对照组(t = 3.38、2.76,P < 0.001)。CCK-8实验显示,继续培养后48 h,E2F6抑制组细胞增殖能力低于对照组(t = 4.58,P < 0.01);软琼脂平板实验显示,E2F6抑制组细胞相对克隆比低于对照组(t = 2.26,P<0.001);迁移实验显示,E2F6抑制组穿出小室细胞数(165 ± 23)低于对照组(376 ± 22,t = 3.14,P < 0.01);侵袭实验显示,E2F6抑制组穿出小室细胞数(96 ± 11)低于对照组(315 ± 31,t = 2.12,P < 0.01);3D细胞培养实验显示,E2F6抑制组细胞形态发生明显变化,侵袭性伪足消失。流式细胞仪检测显示,E2F6抑制组G0-G1期细胞比例、细胞凋亡率均高于对照组(均P < 0.001)。Western印迹显示,E2F6抑制组β联蛋白水平、活化β联蛋白水平及其下游靶基因蛋白c-Myc、细胞周期蛋白D1水平均低于对照组(P < 0.001),P21蛋白水平高于对照组(P<0.001);E2F6抑制组上皮-间质转化相关分子波形蛋白、神经钙黏着蛋白水平低于对照组(P < 0.001),而上皮钙黏着蛋白水平高于对照组(P < 0.001)。结论核转录因子E2F6在恶性黑素瘤中高表达,敲减A375细胞E2F6基因可能通过拮抗β联蛋白信号抑制细胞增殖、迁移和侵袭。
简介:本文对1例主诉“腹痛腹胀9d,肛门停止排气排粪3d”的病例进行讨论。该例患者入院诊断结肠癌.伴急性肠梗阻。剖腹探查术中发现横结肠近肝曲癌.结肠完全梗阻.肝左叶转移瘤,行右半结肠切除.肝转移灶同期切除.回肠造瘘术。术后病理分期:T4aN1aM1a.术后辅助化疗12个周期.方案为FOLFOX6(奥沙利铂、亚叶酸钙加氟尿嘧啶)。辅助化疗结束后4个月.患者发现盆腔肿物。经MDT讨论.再次剖腹探查,发现左侧卵巢肿物,行肿物切除,术中病理示腺癌,行双侧附件联合全子宫切除术。术后3个月,肺CT复查时,发现有肺单发转移瘤,新辅助治疗4个周期.方案为Xelox(卡培他滨联合奥沙利铂),再次经胸腔镜下右肺下叶肿物楔形切除术.术后病理示:转移性腺癌.术后Xelox方案辅助化疗6个周期.目前.该患者距第1次手术后30个月.化疗后12个月无肿瘤复发迹象。
简介:摘要目的研究4-羟基-3-甲基-2-烯基焦磷酸(HMBPP)和多肽E7对结核患者胸水及脐带血中γδ T细胞分泌白介素6(IL-6)的影响和机制。方法收集自广州市胸科医院临床诊断结核性胸膜炎患者胸水标本18例,自中山大学附属第三医院正常健康产妇脐带血标本17例。使用流式分选技术分选出结核性胸水和脐带血中的γδ T细胞与CD277+CD14+单核-巨噬细胞混合培养,分别用HMBPP或E7刺激后,运用流式细胞术检测分泌IL-6的γδ T细胞百分率及表达程序性死亡配体1(PD-L1)的CD277+CD14+单核-巨噬细胞百分率;利用RT-PCR技术检测细胞中IL-6、PD-L1的mRNA表达水平;用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6的含量;用PD-L1特异性小分子干扰RNA(siRNA)沉默PD-L1的表达以检测PD-L1是否参与分泌IL-6;在分选于结核性胸水和脐带血的共培养细胞中,HMBPP或E7刺激后上述指标在每一时间点对照组和实验组间分别采用独立样本t检验比较其差异,分析其统计学意义。结果在结核性胸水和脐带血中,给予HMBPP或E7刺激24 h之后,与对照组相比IL-6+γδ+ T细胞占比显著升高,给予HMBPP或E7刺激12 h之后γδ T细胞中IL-6在mRNA水平的相对表达量显著上调,以及在蛋白质水平的表达显著上调;在分选于脐带血的共培养细胞中,给予HMBPP或E7刺激,CD277+CD14+单核-巨噬细胞中PD-L1在mRNA水平的相对表达量显著上调[(3.70±0.33)vs(4.20±0.34)vs 1.00];在沉默PD-L1的表达后,γδ T细胞中IL-6的表达显著降低[(0.53±0.03)vs(0.55±0.01) vs 1.00],差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论HMBPP和多肽E7能够促进CD277+CD14+单核-巨噬细胞PD-L1表达上调,后者参与刺激与其共培养的γδ T细胞分泌更多的IL-6,这为γδ T细胞的抗结核免疫机制的研究以及结核患者的免疫治疗提供依据。
简介:摘要:目的:探讨HPVE6/E7mRNA联合薄层液基细胞学检查(TCT)筛查宫颈癌的临床价值。方法:选择2023年10月~2024年6月在我院就诊的100例妇科门诊患者为研究对象,分别进行HPVE6/E7mRNA检测、TCT检测和宫颈活检,比较三种方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度,并分析HPVE6/E7mRNA与TCT结果的相关性。结果:HPVE6/E7mRNA检测结果显示,100例患者中有25例为阳性,75例为阴性。TCT检测结果显示,100例患者中有30例为阳性,70例为阴性。HPVE6/E7mRNA检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为80.0%、96.0%、76.0%、96.4%和92.0%。TCT检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为70.0%、93.3%、66.7%、94.3%和88.0%。HPVE6/E7mRNA检测与TCT检测的一致性为82.0%,Kappa值为0.64,表明两者有中等程度的相关性。结论:HPVE6/E7mRNA联合TCT检测能够提高宫颈癌的筛查效率和准确性,是一种有效的宫颈癌筛查方法。