简介：摘要目的分离培养人羊膜间充质干细胞，观察其超微结构并进行研究。方法冲洗出废弃人羊膜，钝性法分离后，提取含羊膜间充质干细胞进行培养，流式检测鉴定同源性及表面纯度后用DMEM诱导分化使用电镜进行超微结构的全面观察。结果羊膜可成功分离培养出间充质干细胞，细胞贴壁生长，体外增殖和传代的周期短且稳定。具有与BMSCs相似的表面标志，体外可以诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论培养的人羊膜间充质干细胞能够作为组织工程学和细胞代替治疗的良好种细胞。

简介：摘要目的探讨人骨髓间充质干细胞体外培养的可靠方法。方法采用人手术切下的骨头标本，运用全骨髓贴壁法分离培养hBMSCs；观察并绘制生长曲线；取生长状态良好的第四代细胞，通过形态学、流式细胞仪检测表面标志物等鉴定hBMSCs；诱导hBMSCs分化为成脂肪细胞，鉴定本实验所分离的hBMSCs是否具有多向分化能力。结果第四代细胞CD29和CD44阳性表达率分别为100％和99.8％，CD31和CD45阳性表达率分别为0.8％和0.4％。流式细胞仪检测证明本研究分离培养hBMSCs的方法可以获得高纯度的间充质干细胞。hBMSCs体外诱导向脂肪细胞分化16d后，镜下可见胞浆内充满圆形脂滴，油红O染色阳性，诱导成脂肪细胞分化率为85.1±3.2％，证实本实验分离的hBMSCs具有多向分化能力。结论采用手术切下的骨性关节炎标本，运用全骨髓贴壁法可获得稳定、均质性良好的hBMSCs，并具有多向分化能力。本方法能为临床上分离、培养人骨髓间充质干细胞提供了另一种可靠的路线。

简介：摘要：人骨髓间充质干细胞主要是在人体内发挥分化和免疫调节作用。因为血脑血脑屏障的存在，阻碍了药物对颅内肿瘤的治疗，而人骨髓间充质干细胞作用于肿瘤细胞中产生相互作用，结合这一作用机理采用人骨髓间充质干细胞对肿瘤患者进行治疗，使其在肿瘤治疗中发挥有效作用，能够为肿瘤疾病的治疗探索新的路径。本文综述了人骨髓间充质干细胞在肿瘤治疗中的应用方法，希望通过本文总结能够为人骨髓间充质干细胞治疗肿瘤疾病提供更丰富的理论指导和经验借鉴。

简介：摘要：间充质干细胞 (mesenchymal stem cells, MSCs)是具有免疫调节、多向分化潜能、自我更新的干细胞，间充质干细胞由于其多能性、易于扩增，是理想的干细胞治疗来源。MSCs可以诱导分化为多种细胞和组织，同时MSCs可以用于治疗糖尿病、骨科疾病、神经系统疾病等方面有重要的研究和应用价值。在这篇文章中，我们调查了干细胞系的相关参数，描述不同干细胞系的建立生成。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosome, hucMSC-ex）对缺血缺氧神经细胞增殖、迁移、凋亡、自噬等的影响及其机制。方法培养原代神经胶质细胞，建立氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation, OGD）模型，hucMSC-ex孵育之后，MTT检测细胞增殖抑制率，流式细胞技术检测细胞凋亡，RT-PCR检测凋亡基因mRNA表达水平及Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白及PI3K/AKT信号表达变化。计量资料多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。结果MTT实验结果显示OGD可抑制细胞增殖，hucMSC-ex孵育2 h后，细胞增殖抑制率较对照组下降（P<0.05）；流式细胞技术检测结果显示hucMSC-ex孵育之后可以减少细胞凋亡（P<0.05）；细胞迁移实验显示OGD可降低细胞迁移能力（P<0.01），外泌体孵育之后细胞迁移能力增强（P<0.05）。RT-PCT技术及Western Blot检测结果显示，OGD可以诱导细胞发生凋亡与自噬，hucMSC-ex可激活PI3K/Akt信号通路，抑制Bax与Caspase-3蛋白（P<0.05）及mRNA（P<0.01）表达水平，促进Bcl-2蛋白（P<0.05）及mRNA（P<0.01）表达水平；同时，hucMSC-ex可抑制Beclin-1、Atg3和LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05）及Beclin-1、Atg3基因mRNA表达水平（均P<0.01）。结论hucMSC-ex可促进OGD神经胶质细胞的增殖、迁移，抑制其凋亡及自噬水平，对缺血缺氧损伤性神经胶质细胞具有修复能力，其保护机制与PI3K/ Akt信号通路相关。

简介：摘要：目的：探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体进行提取鉴定和蛋白组学。方法：培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体，通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定。结果①所抽取的外泌体分散度比较好，而且均匀。②，外泌体粒径分布的高峰为（129.5+8.7) nm，它的膜表面是带有负电荷的，其浓度为8.375>109颗粒/ml，平均 zeta电位为（-28.1+3.6) mV。③ 外泌体中存在着一类特殊的膜蛋白，即CD9,CD63等。④蛋白质组学研究发现外泌体中的大部分蛋白都具有较高的活性，它们涉及到 RNA剪接、 mRNA加工、蛋白质折叠等生物学过程，涉及到 RNA/DNA等基因材料的合成、加工、降解等过程。结论：经研究发现，人脐带间充质干细胞外泌体与其母系细胞存在某种“同质”、“差别”，且这些“差别”的蛋白质功能与其自身的免疫学特性都不相关，从而证实人脐带间充质干细胞外泌体具有较小的免疫学活性及较高的安全性。

简介：摘要目的探讨脐带间充质干细胞（ucMSC）外泌体对急性皮肤创面愈合的影响。方法用超高速离心法提取ucMSC外泌体，经透射电镜观察、Western印迹检测外泌体表面标志物CD63和TSG101和粒径分析鉴定外泌体。体外培养3~5代人皮肤成纤维细胞（HSF），分别用含0（阴性对照组）、1、2 μg/ml外泌体的高糖DMEM培养基孵育24 h（分别为1、2 μg/ml组），CCK8法检测ucMSC外泌体对HSF增殖活力的影响。取24只8周龄雄性BALB/c小鼠构建全层皮肤损伤小鼠模型，按随机数字表等分为ucMSC外泌体组和磷酸盐缓冲液（PBS）组，距创缘约1 mm处等距皮下多点注射ucMSC外泌体悬液或PBS。术后第0、4、7、10、14天观察两组小鼠创面并计算创面残余面积百分比，术后第7、14天取创面组织后行HE和Masson染色，观察皮肤组织结构变化。术后第14天收集两组小鼠创面皮肤组织，实时定量PCR和Western印迹检测Ⅰ型胶原蛋白、纤连蛋白、血管内皮生长因子mRNA和蛋白的表达水平。统计分析采用单因素方差分析、LSD-t检验、双因素重复测量方差分析及非配对t检验。结果透射电镜下，ucMSC外泌体呈椭圆形，直径约100 nm；Western印迹检测显示，ucMSC外泌体表面蛋白CD63、TSG101表达阳性；粒径分析显示，96.2% ucMSC外泌体直径30 ~ 150 nm。CCK8法检测显示，外泌体1 μg/ml组和2 μg/ml组HSF相对活力（0.97 ± 0.05、1.08 ± 0.07）均显著高于阴性对照组（0.71 ± 0.04），t值分别为2.00、7.05，均P<0.05，且2 μg/ml组HSF相对活力显著高于1 μg/ml组，t = 5.09，P<0.05。术后第4、7、10、14天，ucMSC外泌体组创面残余面积百分比均显著低于PBS组（均P<0.05）。HE和Masson染色显示，与PBS组相比，ucMSC外泌体组小鼠创面新生皮肤组织中毛囊、腺体以及肉芽组织更丰富且有新生血管形成，胶原排列也更整齐。实时定量PCR和Western印迹实验显示，ucMSC外泌体组Ⅰ型胶原蛋白、纤连蛋白、血管内皮生长因子mRNA和蛋白的表达均显著高于PBS组（均P<0.01）。结论皮下注射ucMSC外泌体可以促进小鼠急性皮肤创面愈合，可能与ucMSC外泌体促进小鼠创面组织中细胞外基质和血管内皮生长因子的合成及促进HSF增殖有关。

简介：【摘要】临床上视神经（ optic nerve）损伤称之为外伤性视神经病变（ traumatic optic neuropathy），是 颅脑损伤中常见和严重的并发症之一，约占颅脑外伤的2%～ 5%。其中最常见的病因是车祸伤。由于解剖结构和生理学特点， 90%以上的视神经损伤是视神经管段的间接性损伤。间接性视神经损伤是指眼眶外侧，一般指眉弓颞上部受到撞击，外力通过颅骨传递至视神经管，引起视神经管变形或骨折，造成视神经损伤而引起的视力、视野障碍。

简介：本研究探讨健康供体骨髓源性间充质干细胞（BM—MSC）中Toll样受体（TLR）的表达特征，，用Ficoll法分离培养健康供体的BM—MSC；流式细胞术（FCM）检测BM—MSC中CD34、CD45、HLA—DR、CD44和CD71的表达；免疫细胞化学法检测爬片BM—MSC细胞中CD71的表达；应用茜素红染色和油红染色检测BM—MSC细胞成骨及成脂诱导情况；半定量RT—PCR法检测TLR1—10mRNA的表达。结果表明，体外分离培养的BM—MSC中CD34、CD45和HLA—DR表达呈阴性．CD44和CD71表达呈阳性；爬片BM-MSC细胞中CD71的表达呈阳性。BM—MSC经成骨和成脂诱导后出现钙沉积和脂滴，茜素红染色和油红染色均呈阳性。BM—MSC中TLR1—10mRNA均有表达，其中TLR2、TLR3、TLR4、TI，R7、TLR8、TLR9均高表达，TLR1、TLR5、TLR6、TLR10均低表达。结论：从健康供体骨髓中分离培养的BM—MSC表达不同水平的TLR1-10111RNA。

简介：摘要目的研究槲皮素对人牙龈间充质干细胞（GMSCs）的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、表面标志物表达和成骨分化能力的影响。方法以不使用槲皮素处理GMSCs为对照组，CCK-8法检测2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素对GMSCs细胞增殖的影响。10 μmol/L、20 μmol/L槲皮素处理GMSCs细胞96 h后，流式细胞术检测细胞凋亡及表面标志物的表达，免疫印迹法检测GMSCs细胞Cleaved PARP、p-BCL-2、Bax和Cleaved Caspase 3蛋白表达。10 μmol/L槲皮素处理4周后，茜素红染色检测槲皮素对GMSCs成骨分化能力的影响。结果与对照组相比，不同浓度的槲皮素干预GMSCs后细胞存活率明显下降；2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素处理96 h后GMSCs的存活率分别为78.93%、66.81%、56.35%、39.22%（P<0.05）。不同浓度槲皮素处理96 h后流式细胞术检测显示GMSCs的早期凋亡和晚期凋亡细胞数量均明显增加，对照组、10 μmol/L槲皮素组、20 μmol/L槲皮素组的细胞凋亡率分别为8.30%、17.88%、20.77%（P<0.05）；免疫印迹法检测显示，与对照组比较，10 μmol/L槲皮素组和20 μmol/L槲皮素组GMSCs的促凋亡蛋白Cleaved PARP、Bax和Cleaved Caspase 3表达增加，抑制凋亡蛋白p-BCL-2表达减少（均P<0.05）；流式细胞术检测显示，与对照组相比，10 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD90阳性率从88.4%降低至15.3%；20 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD45阳性率从3.18%上升至9.77%，CD34阳性率从1.08%上升至5.70%（均P<0.05）。茜素红染色显示，10 μmol/L槲皮素组处理4周后GMSCs未见矿化结节形成。结论槲皮素能显著抑制GMSCs细胞功能，提示在进行GMSCs培养或者治疗时应避免槲皮素等黄酮类物质的干扰作用。

简介：本研究旨在探讨正常人骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMMSC）分泌的外泌体（exosome）免疫调节功能及支持血管形成能力。收集第4—6代BMMSC上清液提取外泌体，应用透射电镜观察其形态，蛋白印迹法检测其表面特异标志CD9，bicinchoninicacid（BCA）方法定量检测外泌体分泌量；与正常人外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMNC）作用72h后用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测PBMNC分泌的γ-干扰素（IFN-γ）；实时定量PCR检测外泌体内免疫相关microRNA表达；共聚焦显微镜观察外泌体与人脐带静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells，HUVEC）的作用方式，与HUVEC共培养后观察其网状结构形成；应用裸鼠体内试验检测外泌体对血管形成能力的作用。结果表明，正常人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体近似圆形，直径在40—160nm之间，表达表面标志CD9，其分泌量与接种细胞数呈线性关系，可抑制PBMNC分泌IFN-γ（P〈0．01），内含有免疫相关microRNA如miR301、miR22和miR-let-7a等，能促进HUVEC网状结构形成和血管形成（P〈0．01）。结论：BMMSC分泌外泌体具有免疫调节功能与支持血管形成作用。

简介：摘要骨髓间充质干细胞(MSC)是存在于骨髓中的具有高度自我更新和多相分化潜能的成体干细胞。目前已成为干细胞中研究的热点，应用到多个临床科室中，在医学各个领域都具有研究和应用价值1。本文就骨髓间充质干细胞的生物学功能及临床应用的最新进展做一综述。

简介：间充质干细胞（MSC）是具有多向分化能力的成体干细胞，在体外培养中可以被诱导分化为骨、软骨、脂肪、肌肉细胞；另外，MSC也可跨系分化为神经细胞、心肌细胞、肝脏细胞等多种其他组织细胞。Notch信号通路广泛存在于各种动物细胞中，在调节细胞分化、增殖和凋亡中发挥重要作用，它的配体和受体都是细胞膜表面蛋白，因此是介导细胞间通讯的一种重要方式。现有研究表明：在MSC多条分化途径中都有Notch通路存在。本文针对Notch信号通路在MSC分化中的影响做一综述。

简介：牙龈固有层中存在一群间充质干细胞,具有干细胞相应的生物学特性,较强的自我更新能力,表达一组间充质干细胞相关的表面标志物,具有多项分化能力和免疫调节特性。其易于获取、扩增容易的特点使其在免疫相关疾病、皮肤移植、神经相关疾病以及再生治疗中具有很好的应用前景。本文对这一特殊细胞群做一综述。

简介：摘要间充质干细胞作为一种多能干细胞，具有自我更新能力和多向分化潜能。而毛囊作为富含干细胞的微型器官，其来源的毛囊间充质干细胞(HF-MSCs)因容易获取、不受年龄限制及伦理限制等优点，越来越多受到关注。真皮乳头(DP)和真皮鞘(DS)是毛囊的间充质室，含有多种成体干细胞。在本文中，我们回顾了DP和DS中干细胞相关的既往文献，并总结归纳了毛囊间充质干细胞的概念、特性和功能。

简介：摘要随着细胞组织工程的研究不断深入，对干细胞在体内机制的不断了解研究，21世纪在全球多个国家药品管理局批准了干细胞制剂进入临床运用，为传统医药无法治疗和控制的疾病，提供了新的治疗途径，本文主要介绍现已广泛应用于临床的间充质干细胞制剂的作用机制。

简介：摘要间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSCs)是一种来源于中胚层的成体干细胞,具有多向分化能力，如具有向骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、血管内皮细胞及神经星形胶质细胞分化的潜能。并且MSC体外较易分离培养、扩增，细胞免疫原性低，易于转染并能长期表达外源基因等特点，故已成为组织工程、基因治疗和再生医学中的研究热点。目前，对MSCs的分离、纯化、培养还没有统一的方法。MSCs的分离技术和方法主要有4种贴壁法、流式细胞仪分离法、密度梯度离心法和免疫磁珠法。本研究对传统的分离方法进行一些改进，联合利用密度梯度离心法和差异贴壁法，旨在体外分离培养血管MSCs，并将其经定向分化诱导为成骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞，并与骨髓MSC定向分化为血管内皮细胞进行比较，以观察血管来源MSC在血管内皮细胞分化及血管损伤修复中的优势，为临床血管病变性疾病的干细胞治疗提供更为合适的细胞来源。

简介：摘要：随着细胞组织工程的研究不断深入，对干细胞在体内机制的不断了解研究， 21 世纪在全球多个国家药品管理局批准了干细胞制剂进入临床运用，为传统医药无法治疗和控制的疾病，提供了新的治疗途径，本文主要介绍现已广泛应用于临床的间充质干细胞制剂的作用机制。

简介：为了研究骨髓腔内注射（IBM）异基因间充质干细胞（MSC）对造血干细胞移植后大鼠骨髓MSC重建的作用，研究供体MSC植入状态以探讨MSCs的作用机制，将雌性F344胎鼠及新生鼠外周血（FNPB）及雄性F344大鼠BrdU标记骨髓MSC共移植入经致死量^60Coγ射线预处理的雌性Wistar大鼠，其中FNPB均由IBM输注，MSC则通过IBM或尾静脉注射。观察受鼠存活状况、供体HSC植入水平及骨髓MSC恢复情况，并以PCR检测Y染色体和免疫荧光法检测受鼠骨髓MSC的来源。结果显示：两个FNPB＋MSCs共移植组大鼠移植后60天均100％存活，两组比较生存率和供体HSC植入水平无统计学差异，但明显优于单纯FNPB移植组；移植后30天时各移植组受鼠骨髓MSC的增殖能力均未达正常水平，但MSC骨髓腔共移植组集落数（66．0±10．6）明显优于MSC骨髓腔和静脉共移植组及单纯FNPB移植组（P〈0．01）；移植后60天时，免疫荧光法检测供体BrdU标记的MSC显示仅在少部分受体发现供、受体源性MSCs嵌合，但两个共移植组存活受鼠均检测到供体MSC来源Y染色体。结论：异基因MSC输注可促进造血干细胞移植受者骨髓MSC恢复，尤以IBM输注为佳。

简介：间充质干细胞作为理想的种子细胞,在创伤愈合、组织修复和再生中被广泛的研究。内源性或外源性的间充质干细胞募集到损伤部位,在局部微环境下诱导细胞迁移、并有利于移植细胞在局部存活、分化成特定的细胞,实现愈合、修复、再生的功能。这些内、外源性细胞是如何识别、移到受损部位的？大量的研究显示,一些细胞因子如CXC族趋化因子及其受体、生长因子及其受体、溶血磷脂酸及其受体等细胞因子在干细胞的迁移中起重要的作用。本文综述部分在间充质干细胞迁移中起重要作用的细胞因子,以更好的理解间充质干细胞迁移的分子机制。