简介:近年来,海豚链球病已给我国及世界罗非鱼养殖带来了巨大的经济损失。为建立特异、敏感、快速的罗非鱼海豚链球菌PCR诊断方法,根据NCBI数据库已公布的海豚链球菌基因序列,设计合成种特异性引物CM1/CM2,进行海豚链球菌特异基因片段的PCR扩增试验、反应条件的优化及不同检测材料的比较。同时测试了方法的特异性和敏感性,对不同养殖鱼场的10份临床样品进行了检测。试验结果表明,引物CM1/CM2可以扩增到与预计大小相符的870bp海豚链球菌特异性基因片段;PCR反应与鮰爱德华氏细菌、Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌和河弧菌水产常见病原菌均无交叉反应;能够检测的最低细菌数为20~30个海豚链球菌;同时,该PCR可以直接从病鱼的脑、肝脏、肾脏及脾脏组织扩增出特异性目的片段;临床菌株检测结果与基于菌株16srRNA基因序列系统进化分析结果一致。由于病鱼内脏组织总DNA、菌落及菌液可直接用于该PCR扩增,最大限度缩短了整个检测时间及降低了检测成本。方法的建立为致病性海豚链球菌检测提供了一种简便、快速的途径,具有较好的应用前景。
简介:1.病历摘要:患者,男,37岁,主因“胸痛、咳嗽2周,加重伴发热3天”入院,患者于当地医院就诊,行胸部CT见图(1) ,当地医院考虑肺结核,给予HRZE方案治疗1周,但患者症状未见明显改善,复查胸部CT提见图(2),建议转入上级医院治疗,故转入我院感染科。既往8年前有肺结核病史,行“HRZE”方案治疗8个月后医师指导下停药,糖尿病史6+年,未规律治疗。无吸烟、饮酒史,个人史、家族史无特殊,否认结核接触病史。入院查体:体温38℃,脉搏128次/分,呼吸23次/分,血压:132/82mmHg,轮椅推入病房,神志清楚、精神差。全身淋巴结未触及肿大,咽部充血,扁桃体无脓性分泌物,颈软,口唇轻度紫绀,气管居中,胸廓对称无畸形,右肺呼吸音减弱,叩诊浊音,呼吸音降低,双肺可闻及少量干湿啰音。心腹查体未见特殊,双下肢无水肿。入院后查血常规:白细胞1.11*109.L,中心粒细胞百分比:86%,血红蛋白:130g*l-,血小板:317*109L,血沉82mm/h.肝肾功及电解质未见明显异常。肿瘤指标未见异常,PPD试验及结核抗体阴性,由于患者无痰,胸水抽液送检查抗酸杆菌涂片及胸水培养三次均为阴性。行彩超定位后行胸腔穿刺引流术(穿刺前胸水量范围约7.0cm*4.4cm(上下径*左右径)),胸水呈咖啡牛奶样浑浊(见图4),并散发恶臭味,并抽取共计500ml气体,胸水送检可见胸水有核细胞数884417*106,多核细胞为主92%,胸水LDH196u/l,葡萄糖1.23mmol/l(正常范围:3.6-5.5mmol/l).两次胸水涂片送检均发现大量革兰氏阳性球菌。胸水培养分离出星座链球菌,药敏结果鉴定对青霉素、第一代头孢、利奈唑胺、万古霉素、呼吸喹诺酮类、氯霉素、四环素敏感。故考虑右侧星座链球菌脓气胸,给予哌拉西林舒巴坦钠5g q8h+莫西沙星 0.4 qd ivgtt治疗一周后患者症状明显好转,改用头孢唑林2g q8h+莫西沙星0.4qd ivgtt抗感染治疗15天后继续口服莫西沙星 0.4qd 口服。同时每天以生理盐水进行胸腔冲洗以及间断使用尿激酶清除胸膜粘连。复查CT见图(3)以及胸部彩超提示:查见约1.3cm的液性暗区反射,发现病灶明显减少,胸水量也明显减少,本方案治疗有效。