注射用兰索拉唑无菌检查方法学研究

注射用兰索拉唑无菌检查方法学研究

王艳杨世梅

上海华源药业（宁夏）沙赛制药有限公司宁夏银川750000

摘要：目的：通过方法适用性的验证，确定注射用兰索拉唑的无菌检查方法。方法：在《中国药典》2010版适用性检查的基础上进行验证。即注射用兰索拉唑在相同检验量，用0.1%蛋白胨水溶液溶解，采用薄膜过滤法过滤，用200ml0.1%蛋白胨水溶液冲洗原液，依照《中国药典》2015年版四部[1]的要求进行无菌方法试验。结果：经确认此检验方法适用于注射用兰索拉唑的无菌检查。

关键词：注射用兰索拉唑；无菌检查；薄膜过滤；方法验证

注射用兰索拉唑临床用于口服疗法不适用的伴有出血的十二指肠溃疡，主要成分为兰索拉唑[2]。为确保此产品的临床安全用药，依据药典要求进行无菌方法检查试验，以确认现行检验方法的适用性。

1试验样品、菌种、仪器、材料

①样品：注射用兰索拉唑（30mg）批号：180807，来源：上海华源药业（宁夏）沙赛制药有限公司；

②菌种：黑曲霉菌[CMCC（F）98003]，白色念珠[CMCC（F）98001]，枯草芽孢杆菌[CMCC（B）3501]，大肠埃希菌[CMCC（B）44102]，金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]，生孢梭菌[CMCC（B）64941]。菌种来源：中国食品药品检定研究院

③仪器：LDZX-30KBS立式压力蒸汽灭菌器；DHP-9272电热恒温培养箱；KRC-250CL低温培养；TW-901A智能集菌仪；SW-CJ-1F（D）和SW-CJ-1F（D）超净工作台。

④培养基：TSB（批号：170809），FTM（批号：1612282），TSA（批号：1805112），SDB（批号：150914），来源：北京三药科技开发公司。（注：FTM和TSB经过适用性检查和灵敏度确认）

2培养器

一次性使用全封闭无菌集菌培养器

3稀释液的制备

0.1%蛋白胨水溶液（批号：150920，北京三药科技开发公司）

4试验依据和方法

《中国药典》薄膜过滤法

5无菌检查方法适用性检查试验

5.1菌液制备[3]：

接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌的新鲜培养物至TSB中，接种生孢梭菌的新鲜培养物至FTM中32℃培养22小时；接种白色念珠菌的培养物至SDB中23℃培养49小时，上面所阐述之培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。接种黑曲霉菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上，23℃培养5天，加入4ml的0.9%氯化钠溶液，洗脱下孢子，然后通过管口有无菌纱布的无菌吸管取孢子悬液1ml至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。

5.2试验用菌液浓度：

黑曲霉菌菌液（10-4）、白色念珠菌菌液（10-6）、大肠埃希菌菌液（10-7）、金黄色葡萄球菌菌液（10-7）、生孢梭菌菌液（10-7）、枯草芽孢杆菌菌液（10-5），因生孢梭菌的菌落性状是杆状无法计数，故不进行菌落计数，其余菌种计数结果见表1。

表1各试验菌含菌量cfu/ml

注：“+”为有菌生长良好，“++”有菌生长旺盛，“-”为未见有菌生长，“±”为有菌生长微弱，缓慢或可疑。

表2结果表明采用薄膜过滤法，同阳性对照管相比，供试品各管中的菌液都生长良好，证明该供试品无菌检查法通过薄膜过滤、冲洗200ml的0.1%蛋白胨水溶液的试验方法成立。

结论

通过验证，供试品管跟阳性对照管相对比，供试品各管中的各试验菌都生长良好，即将注射用兰索拉唑在相同检验量，用0.1%蛋白胨水溶液溶解，通过薄膜过滤法过滤，用200ml0.1%蛋白胨水溶液冲洗原液，经无菌方法学验证，试验方法成立，则可以按照该检验量、检验条件、验证的方法展开注射用兰索拉唑的无菌检查。

参考文献：

[1]《中国药典》（2015版）四部1101无菌检查法

[2]朱梅红，吉同琴，刘留成，陈祥峰注射用兰索拉唑无菌检查方法学研究，西北药学杂志2008年12月第23卷第6期

[3]刘荔，田妮娜，张晓萍，李天荣对不同厂家生产的氯霉素滴眼液无菌检查法的确定《甘肃科技》2018年10期