K2EDTA抗凝血中白细胞在不同时间段形态的变化

K2EDTA抗凝血中白细胞在不同时间段形态的变化

邓秀容1刘春兰2

1.四川省广元市青川县人民医院检验科628100；2.四川省遂宁市安居区人民医院检验科629006

摘要：血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目，血细胞形态学检查对血液有形成分的检查和数量的评估，传统计的血涂片采用毛细胞血管血直接制备而成，形态接近生理状态，随着血细胞分析仪的应用及普及，血液一般检查多用仪器，而标本多用K2EDTA抗凝血，故血涂片也用抗凝标本制备，而随着时间廷长，抗凝剂将对细胞形态造成不同程度的影响，这给临床诊断带来不便。本文我们将探讨K2EDTA抗凝血中白细胞中的中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞在不同时间段的形态变化，包括对细胞外形，细胞质及其内含物，细胞核形态及结构的影响。

关键词：白细胞形态K2EDTA抗凝血无抗凝剂的外周血不同时间段中性分叶核粒细胞单核细胞淋巴细胞形态变化

【abstract】：Bloodcellmorphologyisoneoftheimportantprojectbaseddiagnosisandhematologybloodtest，bloodcellmorphologicalexaminationonbloodvisiblepartoftheexaminationandthenumberofevaluation，thebloodsmearoftraditionalmeterusinghair-cellvascularbloodpreparation，directlyformclosertothephysiologicalstate，withtheapplicationandpopularityofthebloodcellanalyzer，generalexaminationofbloodmulti-purposeinstrument，andthespecimenismulti-purposeK2EDTAanticoagulant，soalsouseofanticoagulantbloodsmearspecimenpreparation，andasatthetime，anticoagulantstodifferentdegreesofeffectsonthecellmorphology，theinconveniencetoclinicaldiagnosis.WhitebloodcellsthatarepresentinthisarticlewewillexploreK2EDTAanticoagulationofneutrophils，monocytesandlymphocytesindifferentperiodsofchange，includingthecellshape，cytoplasmanditscontents，formandstructureofthenucleus.

【keywords】：whitebloodcellsformK2EDTAanticoagulantwithoutanticoagulantdifferenttimesneutralpointsnucleusgranulocyteofperipheralbloodmononuclearcellslymphocytesmorphologicalchanges

【仪器与材料】：

仪器：重庆江南光学仪器设备厂的光学显微镜

材料：河北鑫乐医疗器械科技股份有限公司生产的K2EDTA抗凝真空采血管及配套静脉采血针，保定市满城玉山玻璃制品厂生产的一次性使用定量取血管，盐城市锦辉玻璃仪器厂生产的风帆牌载玻片，珠海贝索生物技术有限公司生产的高级油镜油，珠海贝索生物技术有限公司生产的瑞氏-姬姆萨染色液。

【方法】：分别选择近半年来我们两个医院检验科做血液一般检查的患者（住院和门诊）100名（年龄6-60岁），男女各半，在采集血液时，分别用传统的毛细胞血管血（无任何抗凝剂）10ul直接推片制作一张血涂片，编号为①号片，再用K2EDTA抗凝管采集2ml静脉血颠倒混匀8次后，分别于采血当时，半小时，1小时，2小时，4小时，6小时，24小时，用一次性使用定量取血管取血10ul推片制作血涂片，编号分别为②（采血当时），③（半小时），④（1小时），⑤（2小时），⑥（4小时），⑦（6小时），⑧（24小时）。在每个时间段制作好的血片于当时用瑞氏-姬姆萨染色液染色观察细胞形态，包括对细胞外形，细胞质及其内含物，细胞核形态及结构。

【结果】：1、粒细胞：与毛细胞血管血（无任何抗凝剂）相比较，抗凝血在1小时内，中性粒细胞形态基本正常，无明显改变；抗凝2小时后部分细胞胞质中出现颗粒聚集和少许空泡；抗凝4小时后，中性粒细胞核增多，颗粒聚集更加明显，空泡增多；抗凝6小时后，空泡逐渐变大，增多，细胞出现明显的退化现象；抗凝24小时后，空泡更多，核变性、浓缩、核丝断裂等改变。（嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞太少，无法总结结果）

2、单核细胞：与毛细胞血管血（无任何抗凝剂）相比较，抗凝血在半小时内，单核细胞形态基本正常，无明显改变；抗凝血在1小时，2小时，4小时后，单核细胞胞质内出现空泡，颗粒增多，核形无明显变化；抗凝血在6小时后，单核细胞边缘出现突起，空泡更大；抗凝血在24小时后，单核细胞外形及核变得更不规则，空泡更多更大。

3、淋巴细胞：与毛细胞血管血（无任何抗凝剂）相比较，抗凝血在1小时内，淋巴细胞形态基本正常，无明显改变；抗凝血在2小时、4小时后，大淋巴细胞形边缘变得不规则核染色质细，胞浆丰富，形成Ⅱ型异型淋巴细胞样；抗凝血在6时后，大淋巴细胞核逐渐形成花瓣样结构，胞质中出现空泡，胞浆更丰富；抗凝血在24小时后，核可见退行性质变。小淋巴细胞未见明显变化。

【讨论】：血细胞形态学检查是对血液有形成分质量的检查和数量的评估，主要包括对红细胞、白细胞及血小板的大小，形态，染色及结构等方面的检查。随着全自动血液分析仪的广泛应用，我们血形态学涂片标本多用K2EDTA抗凝血，而K2EDTA抗凝剂可与钙离子形成螯合物，从而阻止血液凝固。在抗凝的同时，随着时间廷长，对细胞形态也造成了影响，这给临床诊断带来了不便。K2EDTA抗凝血导致白细胞形态变化的原因可能有：（1）血液与玻璃管接触活化；（2）抗凝剂本身对细胞刺激；（3）标本时间过长，细胞本身的变性，退化；（4）人体内外温差导致细胞形态的变化等。

【综述】：综上所述，观察细胞形态推片标本最好用无任何抗凝剂的外周血立即制片染色观察结果。如实需在K2EDTA抗凝血制片，最好在标本采集1小时内制片染色以观察结果，最迟不能超过4小时。若遇临床送检标本在不知采血时间的情况下，发现细胞形态异常结构，一定要重新采集标本制片复查，以减少K2EDTA抗凝剂对细胞形态的影响，保证结果的准确性，为临床提供准确可靠的结果。

参考文献：

（1）尚红，王毓三，申子瑜，全国临床检验操作规程第4版，人民卫生出版社2015年3月

（2）王建中主编，临床检验诊断学图谱上册，人民卫生出版社2012年9月

（3）李艳，丛玉隆，袁桂清，加强形态学临床检验专家座谈会，中华医学杂志，2005.28