骨伤洗剂的制备工艺研究

骨伤洗剂的制备工艺研究

巫繁菁韦玮唐林姚金娥（通讯作者）

（广西骨伤医院药剂科广西南宁530012）

【摘要】目的：研究骨伤洗剂的最佳制备工艺，为该制剂的工业化生产提供参考。方法：采用水蒸气蒸馏法提取骨伤洗剂中的挥发油，以挥发油提取量为评价指标，通过正交试验考察提取时间、加水倍量、浸泡时间、药材规格对骨伤洗剂挥发油提取工艺的影响，并通过单因素试验考察浓缩工艺。结果：最佳制备工艺为一个临床处方药材55g加水8倍量，浸泡2h，提取2h，回流提取一次，水提液过滤后浓缩至100ml，加入0.2%苯甲酸钠，放置12h除杂，加入0.06%聚山梨酯80增溶的挥发油蒸馏液，即得。结论：该工艺合理、可行，可为骨伤洗剂的工业化生产提供实验依据。

【关键词】骨伤洗剂；挥发油；制备工艺

【中图分类号】R683【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2019）08-0243-03

骨伤洗剂源于广西骨伤医院的外用经验方骨洗方，临床上已使用多年，具有活血化瘀、消肿止痛的功效，主要用于治疗风湿骨痛、跌打损伤等骨科疾病。骨伤洗剂由桂枝、荆芥、山香、归尾、苏木、紫草、五味藤提取所得，合约0.55g生药材?mL-1，制剂中桂枝、荆芥、山香、归尾均含有挥发油成分[1-5]，现代药理研究表明桂枝、荆芥、归尾和山香挥发性成分均有抗炎镇痛的作用[5-10]。

由于骨洗剂含挥发性成分中药较多，传统用法为药材粉末加开水冲泡，不宜煎煮。故保留方中挥发性成分成为工艺研究的重点，水蒸气蒸馏法可以将药材中的挥发性成分随水蒸气蒸馏而带出，该法操作简便，设备简单，成本低，适用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、在水中稳定且难溶或不溶于水的成分的提取，是提取中药挥发油的重要方法[11]。本实验采用此法提取骨伤洗剂中的挥发油，按2015年版《中国药典》四部通则2204项下挥发油测定法（甲法）进行提取[12]，并以挥发油提取量为评价指标，通过正交试验优选骨伤洗剂的水提工艺，通过单因素试验考察浓缩工艺和成型工艺，为该制剂的规模化生产提供参考。

1.仪器与试药

BB89-2000挥发油提取器（上海化科实验器材有限公司）；JM-B5003电子分析天平（诸暨市超泽衡器设备有限公司）；JB-2恒温搅拌器（上海雷磁创益仪器仪表有限公司）；DZTW型调温电热套（北京市永光明医疗仪器有限公司）。

桂枝、荆芥、山香、归尾、苏木、紫草、五味藤均购自南宁市万药堂中药饮片有限公司，经广西骨伤医院药剂科姚金娥副主任药师鉴定，桂枝、荆芥、苏木、紫草、归尾符合《中国药典》2015版一部有关项下的规定，山香和五味藤符合《广西中药材标准》1990年版第二册有关项下的规定。聚山梨酯80（江西益普生药业有限公司），苯甲酸钠（成都金山化学试剂有限公司），其他试剂均为分析纯。

2.实验方法与结果

2.1临床处方

桂枝，荆芥，山香，归尾，苏木，紫草，五味藤。一剂药材量为55g。

2.2提取工艺的优选

2.2.1正交试验优化工艺取10倍处方量药材550g，加水浸泡后，连接挥发油提取器回流提取，收集挥发油及水提液。以挥发油量为指标进行工艺优化。根据预实验结果及文献报道[13]，影响挥发油提取的主要因素有浸泡时间、加水量、药材规格及提取时间，因此，各取三水平见表1，采用L9（34）正交试验设计表，正交试验安排及实验结果见表2，方差分析见表3。

表1挥发油提取正交试验因素水平表

注：F0.05（2,2）=19.000

从表2可以看出，得油量最高的实验组合为A2B2C3D1,影响骨伤洗剂挥发油提取的因素：D＞A＞B＞C，C的影响作用最小，因此将C作为误差项进行方差分析。方差分析结果表明因素D对挥发油提取率具有显著影响（P＜0.05），提取时间、加水倍量、浸泡时间均无显著影响（P＞0.05）。挥发油提取预实验结果显示骨洗方中的挥发油在2h左右已提取完全，说明药材成分极易挥发，粉碎或短暂热处理以及放置过程均有可能造成挥发性耗损，故出现因素D影响最显著，饮片优于段和粗粉的结果。综上，从成本节约及提高产品质量考虑，选择较优工艺为A2B2C2D1，即药材饮片加水8倍量，浸泡2h，提取2h为较优提取工艺。

2.2.2挥发油提取验证实验取10倍处方量药材3份，每份550g，按优选出的提取工艺A2B2C2D1（饮片加8倍量水，浸泡2h，提取2h）进行3次验证试验，结果表明3次验证试验的挥发油量分别为0.99ml，0.92ml，0.96ml，RSD值为2.99%，说明工艺稳定，可行，重现性好。

2.3浓缩体积考察

称取5倍处方量药材275g，加水8倍量，浸泡2h，加热回流2h，药液200目筛网滤过，滤液浓缩至2000ml，平均分成5份，每份400ml，再取其中4份分别浓缩成不同体积（50、100、200、300ml），分别放入带刻度的具塞塑料瓶中，密塞，常温下放置3天，观察沉淀情况；上清液200目筛网过滤，滤液再放置3天，观察沉淀情况，一个临床处方药材的提取液浓缩至100mL时比较稳定，沉淀较少，实验结果见表4。考虑到制剂设计、降低损耗及提高产品质量，故本品的浓缩体积优选为一个临床处方药材的提取液浓缩至100ml。

表4沉淀情况观察（ml）

以不同的处方量进行的三次实验，结果基本一致。因此骨伤洗剂的提取工艺确定为中药饮片加水8倍量，浸泡2h，加热回流2h，收集挥发油蒸馏液，将余下药液用200目筛网滤过，滤液浓缩至相对密度1.004～1.007（25℃），放置12h，上清液200目筛网过滤，滤液加纯化水调整总量至指定体积，搅匀，即得。

2.6骨伤洗剂的成型

2.6.1乳化剂的种类及用量聚山梨酯80为《中国药典》2015年版四部收载的用做增溶剂和乳化剂的药用辅料[14]，属于水溶性的非离子表面活性剂，具有不受电解质和溶液pH值影响，毒性和溶血性小，无刺激性，以及能与大多数药物配伍等优点，在药剂上应用较广，可供内服，也可供外用[15]。选择聚山梨酯80作为本品的乳化剂。取含挥发油的蒸馏液15mL（相当于骨洗方5倍临床处方量药材275g的提取量），搅拌下逐步加入聚山梨酯80，直至上部挥发油滴均匀分散为止，结果折算成制剂每L中加入聚山梨酯0.6g（即含量为0.06%）。

2.6.2防腐剂的种类及用量骨洗方提取液为含有挥发油的水溶液，苯甲酸钠为《中国药典》2015年版四部收载的用做抑菌剂的药用辅料[16]，易溶于水，在空气中稳定，选择苯甲酸钠作为防腐剂，并参照《中国药典》2015年版四部附录Ⅰ洗剂项下有关苯甲酸钠用量的要求，确定1000ml溶液中苯甲酸钠的用量为2g(即含量为0.2%）。

2.7骨伤洗剂的工艺流程

2.7.1制剂处方处方药材5剂275g，聚山梨酯800.3g，苯甲酸钠1g。

2.7.2制备工艺称取5倍处方量药材275g，加水8倍量，浸泡2h，加热回流2h，收集挥发油蒸馏液，将余下药液用200目筛网滤过，滤液浓缩至约450ml，加入苯甲酸钠1g,加热至沸并保持微沸30min，放置12h，取上清液用200目筛网滤过，滤液加入挥发油蒸馏液15ml（加有聚山梨酯800.3g，搅拌使挥发油滴均匀分散），加纯水至500mL，搅匀，制成浓度为0.55g生药材?mL-1的溶液500mL。

3.讨论

工艺研究决定着中药制剂的物质基础，直接关系到药物的安全性、有效性和质量可控性。处方中药材主要含苷类、黄酮类、生物碱类，有机酸类等，这些成分用水提取即可。又因处方中的大部分中药含有挥发油，起到抗菌消炎镇痛的作用，经实验发现骨伤洗剂挥发油提取完全所需时间为2h左右，故将处方中所有组成中药用水蒸气蒸馏法共同提取，以保留挥发性成分，并在一定程度上节约了成本。该工艺合理可行，质量可控，可为骨伤洗剂的生产提供理论依据及相应的工艺参数。

【参考文献】

[1]徐锋,王德健,曾南.桂枝挥发油化学成分的研究进展[J].天然产物研究与开发,2017,29(3):532-541.

[2]解宇环,沈映君.荆芥挥发油抗炎作用的实验研究[J].中国民族民间医药,2009,18(11):1-2.

[3]方茹,陈贵钱,钱玉山.荆芥有效成分的提取[N].阜阳师范学院学报(自然科学版),2006,23(1):48-50.

[4张小飞,詹娟娟,吴司琪,等.当归挥发油提取工艺优化及其乳化芳香水成分分析[J].中国实验方剂学杂志,2007,23(5):27-31

[5]黄秀香,陈丽芬.超声波法提取毛老虎茎中的挥发油[N].河池学院学报,2006,26(5):60-62.

[6]许源,宿树兰,王团结,等.桂枝的化学成分与药理活性研究进展[J].中药材,2013,36(4):674-678.

[7]泽仁拉姆,普珍,卓玛东智,等.荆芥的化学成分和药理作用[J].现代医药卫生,2014,30(2):215-217.

[8]赵立子,魏建和.中药荆芥最新研究进展[N].中国农学通报,2013,29(04):39-43.

[9]冯学花,梁肖蕾.当归化学成分与药理作用的研究进展[J].广州化工,2002,40(22):16-18.

[10]李素琴,李雪芸.当归化学成分及药理作用研究进展[J].大家健康(学术版),2016,10(2):1023-1028.

[11]刘继鑫,王客霞,李朝品,等.水蒸气蒸馏法提取中药挥发油存在的问题及解决方法[J].时珍国医国药,2008,19(1):97-98.

[12]国家药典委员会.中华人民共和国（四部）[M].北京:中国医药科技出版社,2015:203-204.

[13]李民,孙阳恩,张路,等.肉桂中挥发油提取及β-环糊精包合工艺研究[J].中国现代应用药学,2016,33(9):1124-1126.

[14]国家药典委员会.中华人民共和国（四部）[M].北京:中国医药科技出版社,2015:623-624.

[15]张兆旺,陶建生,罗杰英等.中药药剂学[M].北京:中国中医药出版社,2008:165-166.

[16]国家药典委员会.中华人民共和国（四部）[M].北京:中国医药科技出版社,2015:518-519.

基金项目：广西壮族自治区卫生厅中医药科技专项,项目编号：GZZJ14-12。