腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原检测在临床诊断中的价值

(整期优先)网络出版时间:2011-05-15
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腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原检测在临床诊断中的价值

邱志琦李小平

邱志琦李小平(广东佛山市第一人民医院检验科528000)

【中图分类号】R725.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)5-0057-02

【摘要】目的探讨粪便中轮状病毒抗原对腹泻患儿临床诊断中的价值。方法采用免疫层析金标记技术快速检测本院1040份婴幼儿粪便样品中轮状病毒抗原。结果检出轮状病毒抗原阳性患儿630例,阳性率为60.6%。将6个月-2岁婴幼儿组与<6个月婴儿组、2-6岁幼儿三组作X2检验,P<0.05及P<0.01,差异有统计学意义,表明6个月-2岁婴幼儿为轮状病毒感染的高发期。同一年龄组男女患儿间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论粪便中轮状病毒抗原检测是诊断轮状病毒肠炎较敏感的方法,对临床诊断该病提供了有价值的依据。

【关键词】轮状病毒婴幼儿腹泻粪便病毒抗原检测

【Abstract】objective:Toexplorethevalueofclinicaldiagnosisoffecalrotavirusantigenforinfantdiarrhea.Method:1040infantfecalspecimensfromourhospitalweretestedwithgold-immunochromatographicforrapiddetectionofrotavirusantigen.Results:630caseswerepositive,Thepositiverateis60.6%.TherewereComparedindifferentgroups6monthsto2year,lessthan6monthsand2-6yearsgroup(X2),X2testisP<0.05andP<0.01.Thereissignificantdifferences,theresultsshowedthattherewashighermobilityforrotavirusinfectionin6months-2yearsgroup.Therewasnodifferenceinsexinthesamegroup(P>0.05).Conclusion:Thetestoffecalrotavirusantigenisthemoresensitivemeasureinthediagnosisoftherotavirusenteritis,providingavaluablebasisfortheclinicaldiagnosisofthedisease.

【Keywords】RotavirusInfantDiarrheaFecalVirusantigendetection

轮状病毒(RV)是小儿急性胃肠炎,尤其是秋、冬季腹泻的主要病因[1],常导致水电解质酸碱平衡紊乱,严重危害患儿身心健康甚至危及生命。因此,临床越来越重视腹泻患者粪便中病原的检测。为了解腹泻患儿中轮状病毒感染的情况,并探讨轮状病毒抗原检测的临床应用价值,于2009年10月至2010年4月轮状病毒肠炎流行期间,采用轮状病毒免疫层析金标记技术方法,对我院1040例临床诊断为秋冬季腹泻患儿的粪便标本进行轮状病毒抗原检测,结合临床资料分析如下。

1资料与方法

1.1一般资料我院门诊就诊及住院的急性腹泻患儿1040例,其中男636例,女404例;门诊622例,住院418例。年龄在1-6个月以下192例,6个月-2岁720例,2-6岁128例。所有患儿血液分析各细胞总数基本正常,淋巴细胞比例增高;部分患儿有呕吐、脱水、发热等临床症状。病程<3d210例,3-7d614例,7d以上216例。

1.2试剂和方法

1.2.1试剂试剂盒由深圳市惠安生物科技有限公司生产,轮状病毒检测试条卡以双抗体夹心法为基础,采用免疫层析金标记技术,快速检测婴幼儿粪便中RotaVirus抗原。检测时一个抗体吸附在硝酸纤维素膜(NC)上,另一个抗体结合于胶体金颗粒表面,当粪便标本中含有RotaVirus抗原时,先与NC膜上面抗体结合,然后与金标记抗体反应,于是形成抗体-抗原-金标记抗体的夹心式复合物,并呈现出紫红色沉淀线。

1.2.2方法取适量粪便样品放入装有稀释液的采便器内。转动采便棒,直到样本溶入样品稀释液中。取出测试卡,平放干燥平面上。当振荡、混匀后,旋转折断试管上的盖帽,垂直滴加3至4滴(约120-150ul)到测试卡中的样品位。10-20分钟内报告结果,结果报告不可超过20分钟。

1.2.3结果判断测试卡出现两条红色线为阳性结果,测试卡只出现质控线为阴性结果,测试卡不出现红色线为无效,应重新检测。

1.3统计学处理:采用SPSS13.0统计软件,多个计数资料的X2检验。

2结果

2.1不同年龄组腹泻儿粪便轮状病毒检测结果对1040例秋冬季腹泻患儿的粪便标本进行RV抗原检测,阳性630例,阳性率60.6%,其中男348例占阳性例数的55.2%,女282例占44.8%;年龄6个月以下的78例占阳性例数的12.4%,6个月-2岁512例占81.3%,2-6岁40例占6.3%。各年龄组轮状病毒抗原检出率见表1。

表1不同年龄组患儿轮状病毒抗原的检测结果

年龄

送检例数

检出例数

检出率(%)

<6个月

192

78

406

6个月-2岁

720

512

71.1

2-6岁

128

40

31.2

将6个月-2岁婴幼儿组、<6个月婴儿组、2-6岁幼儿组作比较,经X2检验,P<0.05及P<0.01,差异有统计学意义,可认为6个月-2岁婴儿为轮状病毒感染的高发期。同时对3个年龄组中男、女患儿检出率进行统计分析,P>0.05,说明轮状病毒的感染在性别间差异无统计学意义。

2.2不同性状粪便轮状病毒的阳性率6月至2岁腹泻儿HRV组阳性率以粪便蛋花汤样49.9%最高。见表2。

表2630例阳性患儿不同粪便性状阳性率

粪便性状

例数

阳性率(%)

蛋花汤样便

314

49.9

黄色稀水样便

220

34.9

绿色稀便

46

7.3

黄色糊状便

36

5.7

褐色软便

14

2.2

3讨论

人类RV归类于呼肠孤病毒科[2],是婴幼儿腹泻的主要病原菌,不论发达国家还是发展中国家,RV的感染率和发病率都很高[3]。在我国由轮状病毒引起的婴幼儿急性腹泻常常在秋冬季造成大范围的流行,每年10-12月份是发病高峰,主要侵犯2岁以下的婴幼儿,严重影响了儿童的健康发育。腹泻婴幼儿因病原体感染而引起腹泻者占60.6%,与国内报道相近,表明轮状病毒仍然是导致婴幼儿秋冬季腹泻的主要病原体。

从表1可看出,各年龄组腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原检出率以6个月-2岁组最高,占71.1%,说明轮状病毒引起的婴幼儿腹泻多发生在6个月-2岁的婴幼儿,6个月以下的婴儿和2岁以上的幼儿发病较少。<6个月的婴儿因从母体获得抗体而得到部分保护,故<6个月的婴儿阳性率较低,而6个月-2岁正是很多婴儿喂养方式转变的时期,开始减少母乳喂养或完全停止,一旦来自母体的抗体水平下降后,自身免疫力下降,当与病毒接触时易被感染,于是形成轮状病毒感染的高发期。2岁以上感染率低可能是因为接触过抗原使体内产生了一定量的相应抗体,对一部分再次接触者起了保护作用。

在630例阳性的大便常规检查中,除54例有少许的脂肪滴外,还有28例有少量的WBC和RBC,10例隐血阳性,其余患者常规检查均无异常,RV感染未引起大便中WBC、RBC及脂肪滴增多,其机理是轮状病毒侵犯小肠绒毛顶端的柱状上皮细胞时,小肠的柱状上皮细胞发生一系列病理生理变化,使肠道吸收功能障碍,水分大量积聚于肠腔,引起水样腹泻[4],而不引起肠壁局部炎症的发生。另外在630例阳性患儿中,黄色稀水样便220例(34.9%),蛋花汤样便314例(49.9%),绿色稀便46例(7.3%),黄色糊状便36例(5.7%),褐色软便14例(2.2%),可以看出轮状病毒性肠炎的大便多为蛋花水样或黄色稀水样便,上述大便性状特征为临床诊断提供了参考价值。综上所述,粪便标本的性状与腹泻患儿RV的阳性率有明显的关系,小儿出现腹泻时除查大便常规外,特别是对蛋花样或稀水样便,镜检无或偶有少量白细胞或少量脂肪球者[5],还需检测轮状病毒,以确定病原菌,指导临床选用药物进行治疗具有十分重要的意义。因此,轮状病毒抗原的快速检测对婴儿腹泻病原的早期诊断和鉴别诊断有重要的临床应用价值。

参考文献

[1]徐涛,金小军.1760例小儿肠炎A群轮状病毒检测结果分析[J].检验医学与临床,2008,5(9):551-552.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006,636.

[3]陈军华.轮状病毒感染发病机制研究进展[J].国外医学儿科分册,2004,5(31):237-239.

[4]马晓燕,仲海娟.轮状病毒抗原检验结果189分析[J].中华现代临床医学杂志,2005,14(16):57.

[5]李宏魁,邹掌玉,吴雄.轮状病毒感染致婴幼儿腹泻的检测分析[J].临床和实验医学杂志,2006,5(10):1582.