蒲公英抑菌的研究进展

蒲公英抑菌的研究进展

张忠(通讯作者)张洪峰聂尚芬王乐平陈晨魏亚超

张忠(通讯作者)张洪峰聂尚芬王乐平陈晨魏亚超（河北省邯郸市中心医院药剂科河北邯郸056001）

【中图分类号】R969【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）17-0050-03

【关键词】蒲公英抑菌研究进展

蒲公英是一味重要的清热解毒类常用中草药，为菊科植物蒲公英的干燥全草。性寒，味苦、甘，入肝胃二经。具有清热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。常用于治疗乳痈、瘰疬、疔疮肿毒、咽痛、肺痈、肠痈、目赤、湿热黄疸、热淋涩痛等症。药理试验证明，蒲公英具有广谱抗菌、保肝利胆、抗内毒素、健胃和免疫促进作用[1,2]。近年来，人们在蒲公英植物种类、化学成分、药理作用、临床应用和开发利用等方面作了大量研究，取得了很大成就。

1蒲公英的抗菌作用

蒲公英具有广谱抑菌作用，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、螺旋体和病毒均有不同程度的抑制作用，其中对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和卡他及溶血性链球菌有较强的杀灭作用[3]。蒲公英的热水煎剂对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、变形杆菌、痢疾杆菌及绿脓杆菌亦有较强抑制作用[4]。本品煎剂或醇提物对结核杆菌、炭疽杆菌、单纯疙疱疹病毒、ECHOll病毒、钩端螺旋体、各种皮肤真菌和幽门螺杆菌有抑制作用[5-9]。

蒲公英煎剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.5g/mL，溶液用于金黄色葡萄球菌后形态学、甘露醇发酵、血浆凝固酶试验均无明显改变，说明这些药物在低浓度时主要是抑制细菌的生长及蛋白质合成。而当药物去掉后细菌仍可生长繁殖，表现出原有形态和生物学特征。蒲公英的最小杀菌浓度(MBC)为1g/ml，可使金黄色葡萄球菌的细胞膨大，细胞壁增厚，核糖体聚集成块，有的细胞壁破裂，胞质渗出。说明蒲公英的抗菌作用机制一方面是通过抑制细胞壁合成，另一方面是通过抑制蛋白质和DNA的合成来实现的[10]。吕俊华等用纸片法抑菌试验证明，100%蒲公英浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、变形杆菌甲型链球菌和乙型链球菌均有明显抑菌作用，体外抑菌作用明显[11]。童延清等研究了蒲公英对表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和变形杆菌的抑制作用[12]。宋学宏等研究表明蒲公英对强毒株嗜水气单胞菌和温和气单胞菌有一定抑制作用[13]。蒲公英提取物对番茄花叶病也有抑制作用[14]。

2蒲公英体外抑菌研究常用方法

2.1药敏纸片法

在普通营养琼脂培养基基础上高压消毒后，冷却至56℃时加上5%～10%无菌脱纤维绵羊血混匀，倒入培养皿中备用。将细菌用取菌环分别致密接种到血平板培养基上后，以无菌操作将含蒲公英浸出液的直径0.4cm的滤纸片贴到培养基上后，37℃培养24h观察测量抑菌环直径。此方法是蒲公英抑菌实验中最常用的方法[15]。

2.2固体稀释法[16]

该方法取不同浓度的蒲公英浸膏稀释液1mL，分别与15mL的热营养琼脂于平皿中混合均匀。凝固后，从各待测菌液中分别取出50μL的菌悬液，均匀涂抹在平皿培养基表面，制成含菌的平板，在相应的温度下培养，观察菌落生长情况并记数。

2.3管碟法[17]

将200-1000μL的Tip头从尾部约1cm处剪下，剪成中空的小管，灭菌后用无菌的镊子将小管插在含菌的培养基上，每个平皿分散地插相应个数的小管，加入已灭菌的蒲公英浸膏稀释液，放入培养箱培养，观察抑菌圈直径即可。

2.4琼脂打孔法[18]

用200-1000μL的Tip头(尾部直径约1cm)的尾部在培养基上对称地打两个孔，在每个孔中加入150μL的蒲公英汁，然后在平板中央加入20μL的已活化的菌悬液。培养观察菌种的生长情况，若蒲公英浸膏稀释液完全渗入培养基或有所蒸发，要及时向每个孔中补充相同体积的蒲公英浸膏稀释液。

2.5二倍稀释法。

在第一支无菌试管中放入2倍浓度的液体LB培养基1ml，在其余10支试管中放入液体LB培养基1ml，并取显齿蛇葡萄提取物1ml加入第一支试管中，混合后从中取1ml加入第二支试管的LB培养基中，再取1ml加入第三支试管中，依次进行二倍稀释，最后一支试管中取1ml弃去，使每支试管都含有1ml的不同稀释度药液。

在上述含不同稀释度的蒲公英提取物试管中各接种0.1ml适当浓度的试验菌，置35℃恒温箱中培养24h，观察生长情况，

3两种培养基对蒲公英体外抑菌效果影响

对蒲公英全草水提液与醇提液分别在普通营养培养基和M2H琼脂培养基上进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌作用的观察，比较两种培养基对中药体外抑菌效，结果表明，M2H琼脂培养基对其抑菌作用的检测效果比普通营养培养基灵敏[19]。

4蒲公英抑菌物质的提取工艺

在以大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的抑菌实验跟踪下，通过单因素实验和正交实验得出，以大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的情况下[20]，蒲公英最佳提取工艺条件为。以湖北产蒲公英为原料以70%乙醇为溶剂，按照料液比为1/25(m/均进行投料，100℃水浴条件下回流提取2.5h。最佳提取条件下的提取率为19.97最佳蒲公英提取物对大肠杆菌的抑菌效果可达13.15mm，对沙门氏菌为18.74mm。通过实验的结果可以看出，蒲公英提取物对细菌的抑制效果显著。

5蒲公英不同部位提取物体外抑菌作用的比较

研究结果表明，蒲公英不同部位提取物对大肠杆菌和金葡菌均有一定的抑制作用，全草的效果优于根，这与刘华等[21]研究的相符，可能是全草和根含有的主要成分不同，全草中绿原酸、黄酮类、有机碱等抑菌成分比根部多，根部主要含有醇类、树脂、橡胶等成分[22]。

不同提取方法制备出的蒲公英全草、根提取物，其中水提醇沉物抑菌效果优于水提物，可能有机溶剂有利于抑菌成分的析出，75%醇沉物效果优于80%醇沉物，不同浓度的乙醇醇沉出的成分有一定的差别，乙醇的浓度过大，提取物抑菌效果减弱，表明部分抑菌有效成分损失，但80%醇沉物制备出的注射液具有明显抗炎作用[23]，分析其抗炎有效成分与抑菌有效成分不相同。该研究得出蒲公英全草提取物比蒲公英根提取物抑菌效果好，水提75%醇沉物抑菌效果最佳，为蒲公英的临床应用和深入研究提供依据。

6抑菌作用的临床应用

蒲公英是一味重要的常用中草药，在人医和兽医临床都有广泛应用，并积累了丰富的实践经验。中医认为蒲公英具有清热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。用于疔疮肿毒、乳痈、瘰疬、目赤、咽痛、肺痈、肠痈、湿热黄疽和热淋涩痛等。

6.1治疗上呼吸道感染

单味药、蒲公英片或蒲公英糖浆可治疗气管炎、咽喉炎等上呼吸道感染[24,25]。宋玉敏等[26]报道复方蒲公英注射液（蒲公英、鱼腥草、野菊花等）不仅具有抗病毒和广谱抗菌作用，而且还有镇咳利尿和提高机体免疫力的功效，对病毒和细菌感染所致的发热有较强抑制作用。通过150例临床治疗证明复方蒲公英注射液疗效确切。

6.2治疗扁桃体炎和腮腺炎

鲜叶捣烂，或加少许白酒同煎可治疗扁桃体炎和腮腺炎[26]。

6.3治疗胃炎、消化道溃疡和阑尾炎

蒲公英微苦而甘寒，清热不伤胃，有利于胃气之和降，有健胃作用[27]。朱士伏[28]，纪贤凯等[29]也有研究报道。蒲公英配合败酱草和马齿览可治疗急性阑尾炎、胃炎和十二指肠溃疡[30]。

6.4治疗乳腺炎

本品鲜叶汁或用酒泡服，对急性乳腺炎疗效显著。蒲公英有通乳作用[31]，也有利于乳腺炎的恢复。复方蒲公英药膏治疗乳痈有较好疗效[32]。蒲公英治疗产后缺乳，临床总有效率达81.3%[33]。蒲公英抑菌成分的分离与鉴定12在兽医临床中，蒲公英也是治疗乳房炎的首选中药，并且有较好疗效[34]。

6.5治疗胆囊炎和急性黄疽性肝炎

蒲公英提取物治疗慢性胆囊痉挛及结石症，可提高胆汁流量，使结石易于排出，并使疼痛缓解[35]。用蒲么英煎剂或注射液治疗黄疽型肝炎和非黄疽型肝炎，疗效显著，对肝功能及黄疽指数恢复有显著促进作用。

6.6治疗盆腔炎

张旭东等制成蒲公英注射液，采用HPLC法测定其所含咖啡酸的含量，并对400例盆腔炎患者临床观察。结果证明临床应用总有效率为94%。该制剂配方及制法合理，性质稳定，疗效确切，未发现不良反应[36]。

6.7治疗疮疖痈肿等外科的急慢性感染

蒲公英可制成眼药水供临床应用。鲜品外敷或制成口服液对外科的各种炎症，如中耳炎、结膜炎以及烧伤等均有不同程度的治疗作用[37,38]。复方蒲公英治疗座疮[39]、面部色素沉着[40]和痈肿[41,42]等效果理想。在饲料中添加蒲公英防治熊的术后感染，可收到满意效果[43]。

6.8治疗肿瘤

蒲公英可散热毒，消肿核。临床治疗鼻咽癌、肺癌等有一定疗效[44]。

6.9在兽医临床中的应用

蒲公英常和紫花地丁、金银花和鱼腥草等配伍治疗痈疽疮毒、肺痈、肠痈、湿热黄疸、尿路感染、肝炎以及创伤感染等许多炎症[45]。

7蒲公英开发利用

近几年，人们充分认识到蒲公英的营养价值、医疗价值和经济价值，开始进行蒲公英大规模栽培。现在，全球已经掀起“蒲公英热”。口本已经形成一系列保健产品[46]，并且开发了蒲公英食品[47]。我国也已经有天然饮料[48]和化妆品[49]等的研制和开发。

此外，人们也在生物技术培育、利用组织和细胞培养筛选耐盐性较高的蒲公英、分子水平研究、基因工程转化药用蒲公英研究，以及通过随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对蒲公英进行遗传多样性分析等方面作了大量研究，取得很大进展[50]。

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