农民肺诊断中间接血凝试验的应用

农民肺诊断中间接血凝试验的应用

褚利霞任培丽

褚利霞任培丽商丘医学高等专科学校基础医学部微免教研室河南商丘476100

【摘要】目的：探讨农民肺诊断中间接血凝试验的应用。方法：将我院近年来收治的56例农民肺患者作为观察组，选取同期在我院接受体检的56例健康者作为参考组，所有受检者均接受间接血凝试验，观察两组患者间接血凝试验结果。结果：观察组患者阳性率为92.9%，参考组均为阴性。结论：间接血凝试验诊断农民肺具有显著效果，可及时诊断，为患者早期治疗提供有效参考，具有广泛的推广使用价值。

【关键词】农民肺；间接血凝试验；应用价值

【中图分类号】R722.13+5【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2014）05-132-01农民肺是农村较为常见病症，患者吸入含有嗜热放线菌的谷草粉尘，进而出现过敏性肺泡炎。流行病学研究，青壮年是本病的主要人群[1]，急性期患者主要表现为咳嗽、发热、畏寒及气短等症状，慢性期患者病程迁延，反复发作，进而出现呼吸衰竭、弥漫性肺间质纤维化及肺源性心脏病等，严重威胁患者生命健康。由于患者临床症状与肺结核、慢性支气管炎相似，因此极易出现误诊漏诊现象[2]。间接血凝试验是临床常用的诊断方法，为对其在农民肺诊断中的临床价值进行观察，笔者对我院近年来收治的56例农民肺患者进行研究，现将具体报告如下。

1.资料与方法1.1临床资料我院自2011年1月至2013年1月收治的56例农民肺患者作为观察组，男32例，女24例，年龄22-56岁，平均年龄（35.26±4.11）岁；患者均伴随痰中带血、痰多、咳嗽、气急、胸痛等临床症状，均经胸片、X线片等诊断确诊；选取同期在我院接受体检的健康者56名作为参考组，男33例，女23例，年龄21-60岁，平均年龄（36.02±4.02）岁，两组患者年龄、性别比较无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2方法菌种：干草小多抱菌150g株,二株国际标准株，普通高温放线菌101株。热吸水链霉菌H9-4株，均为我省分离的地方株。根据国外学者Edwards方法制备抗原，在双相培养基的外相内接种Hg-4、101、150B，50℃温度下振荡培养14天，离心沉淀，采用蒸馏水对上清液进行透析2-7天，期间换水5-6次；培养制备好的抗原接种伊姆松琼脂斜面，保证处于无菌环境下生长，之后分装冻干，在-20℃冰箱内保存。

红细胞致敏试验方法：按照韩家俊等制备冻干血吸虫病诊断血球方法制备戊二醛固定人“0”型红细胞；根据实际需求量取醛化血球PBS(pH7.2）清洗3次，按照1%红细胞压积量配置1/50000蹂酸缓冲液,使其在红细胞悬液内，放于37℃水中，维持20分钟，期间不断摇动，离心5分钟，2000转/分，将上清丢弃，采用PBS(pH7.2）反复冲洗2次，准备致敏。采用PBS(pH6.4）对经处理过的红细胞进行清洗，之后按照1:200浓度将抗原液加入，混匀后放置于37℃水内浸泡30分钟，不断摇动，按照2000转/分进行3-5分钟离心，将上清丢弃，采用1%兔血清缓冲盐水进行1-2次洗涤，加入0.1编硫柳汞、l%兔血清及10%蔗糖配置的保护剂配成1%血球悬液，效价测定合格之后，按照每安瓶0.5mL分装，常规冷冻干燥封口，放置在4℃温度下保存。

患者均在平静状态下取其静脉血液2mL进行试验，具体方法如下：取毛细滴管吸取无菌生理盐水，将之滴入血清稀释孔内（放置在锥形微量血凝反应板），每孔1滴（每滴25μl）。在第一孔内放置进1滴待检血清，摇匀后取出1滴放入第二孔内，混匀后取出1滴放置在第3孔内，依次类推，最后一孔混匀后将丢弃1滴；血清稀释度浓度依次为1:2、1:4、1:8····1%64。血清全部稀释完毕后，在各个孔内各滴入毛细滴管吸取致敏血球悬液1滴（25μL），立即旋转振摇反应板，维持1分钟，在常温下放置30分钟后对结果进行观察。患者试验结果均与阳性血清及盐水进行比较。

1.3判断标准红细胞均在孔底集中形成一个小圆点，边缘整齐为阴性反应；孔底被血球整个铺满，表现为边缘卷起或者黄红色为阳性反应中强阳性；孔底出现明显红色团块，边缘不规整，周围表现为无色或者淡红色为弱阳性[3]。

2.结果观察组56例患者共56份血清，其中间接血凝试验为阳性反应者52份，效价1:4-1:32，阳性检出率为92.9%，56例健康体检者均为阴性，观察组患者血清间接血凝检查结果见表一：

3.讨论农民肺患者生活环境内大量嗜热放线菌的存在是导致本病存在的重要原因，患者主要可分为急性、亚急性及慢性三型，患者临床表现也不相同，其中慢性型患者多表现为呼吸困难、咳痰、极度乏力等症状，继发感染患者可出现多汗、发烧等症状，极易被误诊为慢性支气管炎，耽搁患者最佳治疗时间[4-5]。目前临床诊断农民肺方法较多，主要有实验室检查、肺功能检查、X线胸片、纤维支气管镜检查等。

刘君等对CNKI、Pubmed及维普等数据库进行观察，结果发现，农民肺感染常见病原学主要为嗜热放线菌，其中普通高温放线菌及热吸水链霉菌为主要病菌[6]。间接血凝试验能够有效检出上述病毒，是农民肺诊断中具有较高敏感性的免疫方法，本次研究结果发现观察组患者阳性率较高，而参考组患者均为阴性，由此可知，在农民肺的诊断中，间接血凝试验具有显著的使用价值，具有推广价值。

参考文献：[1]杨亚晓，陈玉昆，魏世锦，等.3种方法检测弓形虫IgG抗体的效能[J].中国血吸虫病防治杂志，2014，（01）：109-110.[2]王绍业.慢性农民肺(附5例报告)[J].中国感染控制杂志，2005,4（01）：39-40,43.[3]吴子松，唐猛，李汉刚，等.山丘型血吸虫病流行区人群血吸虫抗体消长监测[J].中国血吸虫病防治杂志，2013,25（02）：133-136.[4]王涛.扁平湿疣误诊误治致表皮葡萄球菌性溃疡[J].临床误诊误治，2013,26（01）：34-35.[5]李存香，祁芝珍，王丽，等.3种检测方法在携带鼠疫噬菌体现场样本中的联合应用[J].中国媒介生物学与控制杂志，2014,25（01）：82-83.[6]何光志,田维毅,简昌友,等.应用间接血凝试验(IHA)诊断猪蛔虫病[J].贵州农业科学，2010,38（8）：153-154.