LC-MS/MS测定人参蜂王浆口服液中15种药物残留

LC-MS/MS测定人参蜂王浆口服液中15种药物残留

李倩

哈药集团三精制药有限公司150000

【摘要】目的：通过对LC-MS/MS测定人参蜂王浆口服液中15种药物残留的研究，对药品质量与安全的控制与管理提供有利条件，为人们的健康提供保障。方法：选取一定量的样品，通过LC-MS/MS对人参蜂王浆口服液中的药物残留进行检测。检测过程中相关工作人员还需要对涉及到的数据进行准确的记录，从而为药物残留的研究提供便利条件。结果：通过LC-MS/MS对人参蜂王浆口服液进行测定，得到了线性范围数据、加标回收率数据以及相对标准偏差数据，对口服液质量及含量研究有着重要的意义和影响。结论：LC-MS/MS是一种高效率的测定技术，不仅能够准确的检测出人参蜂王浆口服液中的15种药物残留，还能在很大程度上提高检测的准确性，为相关检测工作的开展提供了便利条件。需要相关科研团队能够提高对此测定方法的重视与研究。

【关键词】LC-MS；测定；口服液；药物

保健食品中药物残留的测定对食品安全领域的发展有着重要的意义和影响，与人们的身体健康有着紧密的联系。在近几年的发展中，很多科研团队都提高了对LC-MS/MS测定人参蜂王浆口服液中15种药物残留的重视与研究。一方面是由于很多人参蜂王浆产品出现在市场中，但是产品质量却不能得到保障，需要相关质检部门提高对此类产品检查的力度。另一方面是由于LC-MS/MS在应用过程中会涉及到很多难点问题，需要相关工作团队能够熟练掌握LC-MS/MS的应用原理和要点。

一、材料

1、仪器

Agilent6460型串联三重四极杆质谱，配Agilent1290型液相色谱仪：Agilent公司，美国:；Milli-Q去离子水发生器：Milli-Q公司，美国；高速冷冻离心机：ttettich公司，德国；样品自动浓缩仪：Genevac公司，英国。

2、试剂

林可霉素、土霉素、四环素、金霉素、多西环素、红霉素、氧氟沙星、阿奇霉素、克林霉素、环丙沙星、诺氟沙星、罗红霉素，购于中国食品药品检定研究院。达氟沙星、恩诺沙星、二氟沙星购于中国兽医药品监察所。甲醇、乙腈为色谱纯试剂，水为超纯水，其它试剂为分析纯。OasisHLB柱。溶液的制备：对照品分别用甲醇配制成1.0mg/mL储备液，置于4℃保存，临用时根据需要稀释成适当浓度的混合标液。

3、样品

4批人参蜂王浆口服液样品购自本地某药店。

二、分析条件

1、色谱条件

色谱柱：AgilentEclipseXDB-C18（5μm，150×4.6mm）；流动相：A：甲醇-乙腈（3∶2），B：0.1%甲酸，梯度洗脱程序：0~8min（A：10%）；8min~15min（A：10%~30%）；15min~16min（A：30%~10%），流速为0.5mL/min。进样量10μL；柱温25℃。

2、质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI）；检测方式：多反应监测（MRM）；扫描方式：正离子扫描；干燥气：氮气；干燥气温度：325℃；干燥气流速：10L/min；雾化气压力：0.006Pa；鞘流气温度：400℃；鞘流气流速：10L/min。母离子、子离子、驻留时间、碎裂电压、碰撞能量见表1。

表115种药物质谱参数

3、样品溶液的制备

称取供试样品约5mL，置于50mL离心管中，加入0.1mol/LEDTA溶液0.1mL，再加入pH8.0磷酸盐缓冲液20mL，混匀，涡旋2min，以4000r/min的速率离心5min，上清液置于另一离心管中，残渣再加入pH8.0磷酸盐缓冲液10mL，涡旋2min，以4000r/min的速率离心5min，合并上清液，上清液以1mL/min的速度通过活化后的固相萃取柱，先用5mL水淋洗两次，再用5mL甲醇洗脱（控制流速1mL/min～2mL/min。将洗脱液用自动浓缩仪于45℃浓缩至干，用1.00mL流动相溶解残渣，0.22μm微孔滤膜滤过，进LC-MS/MS分析。

三、结果

蜂蜜中含有大量的糖份和其它有机物质，因此需要通过采用适当的提取和净化方式来对样品进行处理，以便尽可能的减少干扰，提高分析灵敏度。选择两个丰度最高的特征离子作为定性离子，最终分别确定各化合物定量离子和定性离子质量数及质谱参数。本文考察了分别用pH8.0磷酸盐缓冲液、pH8.0磷酸盐缓冲液-甲醇、5%甲醇溶液、5%乙腈溶液对加标样品进行提取，结果采用pH8.0磷酸盐缓冲液提取加标样品时，各待测组份的回收率均较高。由于四环素类物质易与金属离子螯合，降低提取回收率，因此加入0.1mol/LEDTA溶液0.1mL，结果表明加入0.1mol/LEDTA溶液可显著提高四环素类被测物的回收率，且对其它组份没有影响。

取对照品混合工作液配成一系列浓度的对照品溶液，分别进样进行测定，以化合物峰面积（Y）和对应的浓度（X）进行线性回归，得到15种药物线性范围为0.08ng/mL～20ng/mL，线性方程、相关系数及检测限见表2。

表215种抗生素药物线性方程、相关系数、检测限

四、讨论

随着人们生活水平的提高，保健食品成为了很多人关注的重点，不仅大量保健食品出现在了人们的生活中，人们对自身健康与安全的重视也大大提高。虽然保健食品的出现给人们的健康提供了有利条件，但是很多伪劣保健食品的出现也在很大程度上给人们的健康造成威胁，同时还给食品质检部门带来了不小的压力与挑战。人参蜂王浆口服液是近年来比较火热的保健食品，人们之所以选择它，是因它具有抗衰老以及增强免疫力等功能。另外，优质的人身蜂王浆产品还具有很多营养成分，能够起到明显的杀菌和消炎功能。

但是一些人参蜂王浆产品中却存在很多药物残留物质，而这些残留物的来源与蜜蜂的养殖有着不可分割的关系。由于蜜蜂在养殖过程中会受到某些因素的影响而出现疾病，需要养殖团队通过药物对病情进行控制。但是这些药物会残留在蜂产品中，如果不能对这些残留物进行及时的处理，那么人们在长期使用人参蜂王浆保健食品之后，就会对身体健康造成一定的损害。

因此在近几年的发展中，相关科研团队研制出了很多检测蜂产品烟雾残留的方法与技术手段，而LC-MS/MS就是其中之一。另外，还有很多其它高效的测定方法会被应用到实际的工作中，如微生物测定法以及液相色谱法等。

如今，很多保健食品残留物检测部门都能对LC-MS/MS的应用原理和注意事项进行全面的了解与掌握，在人参蜂王浆口服液的药物残留检测中，更能发挥出真正的价值。对于检测过程中存在的难点问题，相关工作团队也能根据实际情况，对问题产生的原因进行进一步的分析，从而制定科学有效的解决方案，降低不利因素对检测结果的影响。相信在未来的发展中，LC-MS/MS能发挥出更大的价值，为保险食品的安全提供有利的保障。

参考文献

[1]周书来,吴丽.人参蜂王浆口服液中功效成分含量测定方法的研究[J].中文信息,2014(12).

[2]刘雪涛.一种人参蜂王浆口服液用提取罐:,CN206325254U[P].2017.

[3]吕斌.蜂王浆中9种磺胺类药物残留测定方法研究[J].食品研究与开发,2015,36(22):131-133.