复方三七胶囊质量控制的研究

复方三七胶囊质量控制的研究

赵德寿

（兰州大学第二医院检验中心甘肃兰州730030）

【摘要】目的：建立复方三七胶囊的质量标准。方法：采用HPLC法对复方三七胶囊中的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1进行含量测定，同时进行复方三七胶囊的崩解时限、装量差异及水分检查。结果：HPLC含量测定中，三七皂苷R1在10μg·mL-1～100μg·mL-1，人参皂苷Rg1在40μg·mL-1～400μg·mL-1，人参皂苷Rb1在40μg·mL-1～400μg·mL-1范围内都呈良好的线性关系，r分别为0.9995，0.9993，0.9992。崩解时限，装量差异和水分检查均符合《中国药典》2010版一部要求。结论：建立的方法简便可行，专属性好，可用于复方三七胶囊的质量控制。

【关键词】复方三七胶囊；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；HPLC；质量控制

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）26-0024-03

StudiesonQualitativeandQuantitativeMethodsofFufangsanqiCapsule

ZhaoDeshou.ThesecondhospitaloflanzhouuniversitytestcenterGansulanzhou730030

【Abstract】ObjectiveTostudythequalitativeandquantitativemethodsofFufangsanqicapsule.MethodTouseHPLCmethodforthesimultaneousdeterminationofnotoginsenosideR1andginsenosideRg1,Rb1inFufangsanqicapsule.Todeterminedisintegrationtime,contentuniformityandwatercontent.ResultThecalibrationcurveofnotoginsenosideR1waslinerwithintheconcentrationrangefrom10μg·mL-1to100μg·mL-1,andthecorrelationcoefficientwas0.9995.ThecalibrationcurveofginsenosideRg1waslinerwithintheconcentrationrangefrom40μg·mL-1to400μg·mL-1,andthecorrelationcoefficientwas0.9993.ThecalibrationcurveofginsenosideRb1waslinerwithintheconcentrationrangefrom40μg·mL-1to400μg·mL-1,andthecorrelationcoefficientwas0.9992.Disintegrationtime,contentuniformityandwatercontentwereeligibleaccordingtotheChinesePharmacopoeiaversion2010appendixⅠ.ConclusionTheestablishedmethodwassimple,accurateandreliableforthequalitycontrolofFufangsanqicapsule.

【Keywords】Fufangsanqicapsule;NotoginsenosideR1;GinsenosideRg1;GinsenosideRb1;Highperformanceliquidchromatography;Qualitativeandquantitativemethods

复方三七胶囊由三七、琥珀两味药组成，具有活血止血，利水通淋的功效[1]。主要用于急、慢性肾小球肾炎，肾病综合症，隐匿性肾炎，IgA肾病伴有血尿者，为我院院内制剂，临床疗效明确，为有效控制该制剂的质量，本文选择HPLC法对三七中的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1进行含量测定，并按《中国药典》2010版一部要求，检查崩解时限，装量差异和含水量[2]。

1.仪器与材料

1.1仪器

1100型高效液相色谱仪（美国Agilent公司，Agilent-1100系列二元泵，DAD二极管阵列检测器，AgilentChemstation色谱工作站）；HPD-25真空泵（天津市恒奥科技发展有限公司）；ME2325S型电子分析天平（德国赛多利斯仪器系统有限公司）；DGF702-2型电热鼓风干燥箱（大连实验设备厂）；CQ50超声波清洗器（上海超声波仪器厂）；ZB-IC智能崩解仪（上海安亭电子仪器厂）。

1.2试剂与材料

三七皂苷R1对照品（中国药品生物制品检定所，批号：MUST-10092301），人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所，批号：MUST-11041201），人参皂苷Rb1对照品（中国药品生物制品检定所，批号：MUST-11042801），复方三七胶囊（兰州大学第二医院制剂室自制，批号：20111109,20111110,20111111），乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为纯化水（兰州大学第二医院制剂室自制）。

2.含量测定

2.1色谱条件

色谱柱：LunaC18柱（250×4.60mm，5μm）；流动相：A为乙腈，B为水；流速：1.0mL·min-1；采用梯度洗脱法，0～5min(A:B=23:77)，5～10min（23～25:77～75），10～36min(25～40:75～60),36～40min(40～23:60～77)；检测波长：207nm；柱温：40℃；进样量：20μL；理论塔板数按三七皂苷[3]R1峰计算应不低于3000。

2.2溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备分别精密称取三七皂苷R12.5mg，人参皂苷Rg110mg，人参皂苷Rb110mg，置于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备取本品十粒，打开胶囊壳，精密称定内容物300mg，置25mL容量瓶，加入甲醇适量，摇匀，超声处理15min，放冷至室温，精密加入甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得供试品溶液。

2.2.3阴性对照溶液取除三七外的其他药材，按处方比例及工艺，制备不含水蛭的阴性样品，按“2.2.2”供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。

2.3系统适用性试验

在“2.1”项下的色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液20uL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果：对照品溶液与供试品溶液在相同的保留时间处有吸收峰，供试品溶液中三七皂苷R1[4]、人参皂苷Rg1[5]和人参皂苷Rb1[6]峰与杂质峰能很好的分离。阴性对照溶液在相同的保留时间处无吸收峰，对检测无干扰。见图1。

图1HPLC色谱图

（1三七皂苷R1；2人参皂苷Rg1；3人参皂苷Rb1）

2.4线性关系考察[7]

分别精密吸取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的对照品溶液1，2，4，6，8，10mL至10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密以上标准溶液20μL，注入液相色谱仪测定峰面积。分别以三种成分浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归，结果见表1。

表13种组分的线性方程（n=6）

2.5精密度试验

精密吸取对照品溶液20μL,连续进样6次，记录峰面积，结果三七皂苷R1峰面积的RSD为1.72%，人参皂苷Rg1峰面积的RSD为0.99%，人参皂苷Rb1峰面积的RSD为1.38%。结果表明仪器精密度良好。

2.6稳定性试验

取同一供试品溶液，室温放置，分别于0、2、4、8、10h，精密吸取20μL注入液相色谱仪，测定其峰面积。结果三七皂苷R1峰面积的RSD为2.22%，人参皂苷Rg1峰面积的RSD为0.91%，人参皂苷Rb1峰面积的RSD为2.32%。结果表明供试品溶液中三种成分在10h内稳定性良好。

2.7重复性试验[7]

取同一批样品6份,按“2.2.2”项下方法制成供试品溶液,各精密吸取20μL注入液相色谱仪，测定其峰面积，计算含量。结果三七皂苷R1平均含量的RSD为1.88%，人参皂苷Rg1平均含量的RSD为0.97%，人参皂苷Rb1平均含量的RSD为1.57%。结果表明该方法重复性好。

2.8回收率试验[8]

精密称取5份复方三七胶囊内容物，每份60mg，置于10mL容量瓶，再分别精密加入对照品三七皂苷R10.5mg，人参皂苷Rg12mg，人参皂苷Rb12mg，按“2.2.2”项下方法制备，在“2.1”色谱条件下，进样分析，计算回收率，结果见表2。

表2回收率测定结果（n=5）

3.崩解时限检查

按《中国药典》2010版一部附录ⅫA崩解时限检查法，取三批复方三七胶囊样品检查，崩解时间均应不超过30min，结果见表4。

4.装量差异检查

按《中国药典》2010版一部附录IL规定，分取三批供试品10粒，分别精密称定重量，倾出内容物（不得损失囊壳），胶囊囊壳用小刷拭净，分别精密称定囊壳重量，求出每粒内容物的装量。每粒装量与平均装量比较，装量差异限度应在平均装量的±10%以内，超出装量差异限度的不得多于2粒，并不得有1粒超出限度1倍。结果见表4。

5.水分检查

按《中国药典》2010版一部附录IXH水分测定法规定，分取三批供试品内容物，进行水分检查，按规定，含水量不得超过9.0%。结果见表4。

6.样品整体质量评价

草拟质量标准，并对血尿宁胶囊的三批样品进行整体质量评价，结果见表4。

表4复方三七胶囊胶囊质量评价结果

7.结果与讨论

三七总皂苷含量测定中，通常检测波长是203nm[3]。但在实际测定中，该波长下基线杂质吸收峰较多，对测定影响较大。207nm下，杂质吸收峰少，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1三种成分吸收峰明显，且不与其他成分吸收峰互相干扰，因此，选择207nm为三七总皂苷含量测定的检测波长。2010版《中国药典》一部中收载的三七中三种皂苷的含量测定方法，采用梯度洗脱，主峰的保留时间较长，分析一次样品需要60min。本实验改进分析方法，只需40min就可完成一次分析，且三种主要成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1与其他成分分离度好。本实验建立的方法简便、快捷，可以用于复方三七胶囊的质量控制。

【参考文献】

[1]杨志刚.中药三七对神经系统和免疫系统的影响[J].中国药房，2008,19（18）:1424-1426.

[2]国家药典委员会.《中华人民共和国药典》[S].北京：化学工业出版社.2010版一部.

[3]冯亮,蒋学华,周静,等.三七皂苷R1和人参皂苷Rg1的大鼠在体肠吸收动力学研究[J].中国药学杂志,2006,41(14):1097-1102.

[4]周迎春,赵怀清,梁宁,等.高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1,Re,Rb1与三七皂苷R1含量[J].JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity,2003,1:20.

[5]杨雪梅,刘旭,刘艳山,等.高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1,Rb1的含量[J].时珍国医国药，2005,16(8):710-711.

[6]苏静,朱卫泉.RP-HPLC梯度洗脱法测定血塞通片中三七皂苷R1,人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg1的含量[J].药物分析杂志,2005,25(2):212-214.

[7].姚育瑞，傅钰，蒋平等.高效液相色谱法测定三七伤片中3组分的含量[J].中国药房，2007,18（3）：206-208.

[8]仉燕崃,李楠,李晓菲,等.HPLC测定三七粉及三七片中人参皂苷Rg1,三七皂苷R1的含量[J].中成药,2007,28(12):1851-1852.