整合素αvβ3与脑胶质瘤恶性程度之间的关系研究

整合素αvβ3与脑胶质瘤恶性程度之间的关系研究

朱培培郭敏陈军夏春燕(通讯作者)

（第二军医大学附属第二医院长征医院病理科上海200003）

【摘要】目的：对整合素αvβ3与脑胶质瘤恶性程度之间的关系进行探究。方法：抽取我院于2014年5月—2016年5月间收治的18例脑胶质瘤患者作为研究对象，且经术后的病理检查得出有9例患者为低度恶性的肿瘤（Ⅰ级与Ⅱ级的脑胶质瘤），另9例为高度恶性的肿瘤（Ⅲ级与Ⅳ级的脑胶质瘤），分别设为甲、乙两组。取所有患者的脑胶质瘤作为标本，行免疫组化分析。结果：患者的性别、年龄、病灶部位及大小均不影响整合素αvβ3的表达；比较组间整合素αvβ3的表达情况，P＜0.05，差异在统计学上有意义。结论：对于脑胶质瘤的患者而言，其肿瘤的恶性程度可对整合素αvβ3的表达产生较大影响，这一发现可为脑胶质瘤的靶向治疗研究提供有效的参考依据。

【关键词】αvβ3；整合素、脑胶质瘤；恶性程度

【中图分类号】R73-3【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2017）09-0033-02

TheStudyontherelationshipbetweenintegrinalphavbeta3andmalignantdegreeofgliomas

【Abstract】ObjectiveTointegrinalphavbeta3andtherelationshipbetweenthemalignantdegreeofgliomaswereexplored.MethodsFromourhospitalinMay2014-2016yearinMay18casesofgliomapatientsastheresearchobject,andthepostoperativepathologicalexaminationof9patientswithlow-grademalignanttumors(gradeIwithgradeIIgliomas),another9casesofhighlymalignanttumor(gradeIIIanpglioma),werepidedintotwogroups.A,Bgliomafromallpatientsasspecimensforimmunohistochemicalanalysis.ResultsThepatient'sgender,age,lesionofpositionandsizedidnotaffectintegrinalphavbeta3Theexpression;expressionwerecomparedbetweenintegrinalphavbeta3,P<0.05,thedifferencewasstatisticallysignificant.ConclusionForgliomapatients,malignantdegreeofthetumormayhaveagreaterimpactontheexpressionofintegrinalphavbeta3,thiscanbefoundasgliomatargetstudyonthetreatmenttoprovideeffectivereference.

【Keywords】Vbeta3;Integrin;Glioma;Malignantdegree

脑胶质瘤在颅内肿瘤中约占46%的比例，手术加放化疗使其常见的治疗手段，而其治疗后平均的生存期不到1年[1]。脑胶质瘤的早期诊断及分类可有效对患者的生存期进行延长。为了探究整合素αvβ3与脑胶质瘤恶性程度之间的关系，我院进行了深入探究，详细报道如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

抽取我院于2014年5月—2016年5月间收治的18例脑胶质瘤患者作为研究对象，分成甲、乙两组。甲组：9例低度恶性的肿瘤，4例男性，5例女性，平均年龄是（44.07±10.50）岁；乙组：9例高度恶性的肿瘤，5例男性，4例女性，平均年龄是（43.35±11.06）岁。

1.2纳入排除标准

纳入标准：经伦理委员会同意且患儿家属知情并签署同意书[3]。排除标准：伴有其他脑部恶性肿瘤的患者[3]。

1.3免疫组化方法

（1）切片：将所获取的肿瘤组织修剪成厚度约为0.5cm的薄切片，然后即刻使用10%的中性甲醛-PBS缓冲液将其浸润，将温度设置为４℃，固定放置24h；运用包埋机对其进行自动包埋，再利用切片机对其进行连续切片，切片厚度设为3μｍ；于80℃的条件下进行1h的烤片处理，最后在60℃的中放置一夜。（2）免疫组织化学技术：对处理过的切片进行常规的脱蜡水化，利用双氧水将内源性的过氧化物的酶活性封闭。使用PBS对其进行3次的洗涤，每次洗涤10分钟。滴加正常的山羊血清工作液封闭，室温条件下行30分钟孵育，倾去；滴加抗αvβ3生物素的单克隆抗体，室温条件下行1小时孵育；使用PBS对其进行3次的洗涤，每次洗涤10分钟。利用DAB即过氧化氢的混合也做显色处理，注意控制显色时间及终止显色。随后将其浸入蒸馏水中约30min，再用苏木素行1min复染，利用盐酸酒精做分化处理，待氨水反蓝后，使用常规的梯度酒精进行脱水，二甲苯处理透明，用中性树胶进行封固。最后，放置显微镜下进行观察，拍照。

1.4表达结果判断

αvβ3受体染色的阳性表达形式为背景清晰的棕黄色颗粒。若未见细胞着色标记为“－”，低度表达、中度表达、高度表达分别标记为“＋”、“＋＋”、“＋＋＋”[4]。

1.5统计学方法

计量资料表示形式是（-x±s），用t-test，计数资料选取卡方检验。P＜0.05时差异在统计学上有意义。

2.结果

2.1整合素αvβ3的表达情况及影响因素

整合素αvβ3的阳性表达表现为棕黄色的颗粒，细胞膜、血管内皮、细胞质、肿瘤周围的浸润组织等均是其主要表达场所，而其在肿瘤周围的正常、坏死或水肿组织处极少表达；而患者的性别、年龄、病灶部位及大小均不影响整合素αvβ3的表达，详见表1。

3.讨论

脑胶质瘤的患者在肿瘤术后具有较高的复发风险[5]，可受到多类蛋白分子的调控，整合素αｖβ３便是其中一类[6]。

在脑胶质瘤的发展中，会出现新的血管系统，形成新血管。恶性程度较低的胶质瘤内形成的新血管的结构近似于正常组织，而在恶性程度较高的胶质瘤中会出现明显的微血管增生情况，且其密度明显较正常的脑组织及恶性程度较低的胶质瘤高。以下是微血管出现增生的两种可能的机制[7]：一、在肿瘤周围的正常脑组织中，毛细血管可发生出芽，进而生成微血管；二、平滑肌细胞（或血管周细胞）由于增生和聚集，重塑成血管。αvβ3作为一种重要的整合素，本质结构为某种二聚体的糖蛋白，它于某些肿瘤中（如：神经胶质瘤、黑素瘤、乳腺癌等）可呈现高度表达的状态，可对肿瘤细胞移行、黏附等进行介导，且其于肿瘤的生长、局部的浸润以及向远处的转移等过程中均起到较为重要的作用。整合素αvβ3一般不在成熟血管的内皮细胞、绝大部分的正常组织中表达，或仅仅是呈现低表达的状态，而其于新生血管的内皮细胞、许多恶性肿瘤的细胞表面发生较高程度的表达。因此，αvβ3可用来标记新生的血管或者恶性肿瘤的细胞内膜，即当新血管增加或肿瘤向恶性发展时，其表达程度也会出现相应的增加。此外，有关研究显示，当所使用的抗αvβ3抗体达到一定数量时，能对肿瘤的生长、浸润以及转移进行有效的阻止。本次研究显示，整合素αvβ3的阳性表达表现为棕黄色的颗粒，其较多于细胞膜、血管内皮、细胞质、肿瘤周围的浸润组织等处表达，鲜少于肿瘤周围的正常、坏死或水肿组织处表达；性别、年龄、病灶部位及大小等均不对整合素αvβ3的表达造成影响，而整合素αvβ3在高度恶性患者中的表达明显高于低度恶性的患者。

综上所述，整合素αvβ3的表达随着脑胶质瘤的恶性程度的增加而增加，是脑胶质瘤治疗研究的一项重要发现。

【参考文献】

[1]郭鹏德，马庆杰，王振常.整合素αｖβ３与脑胶质瘤恶性程度的相关性研究[J].中国实验诊断学，2013.17(9):1605-1608.

[2]艾文兵，王煜，雷霆.人脑胶质瘤中整合素与VEGR、PCNA表达的相关性研究[J].中国临床神经外科杂志，2007.12(2):79-82.

[3]李中军，温强，陈滨.整合素αｖβ３受体显像在脑胶质瘤中的诊断研究[J].中国实验诊断学，2014.18(9):1466-1468.

[4]罗玉琳，姜仪，张小蓉.临床护理路径在小儿腹泻中应用的效果评价[J].中国实用护理杂志，2012.28(18):59-60.

[5]修雪莲，张洪艳，芦德智.临床护理路径在小儿腹泻护理中的应用价值[J].中国医院用药评价与分析，2016.16(16):188.

[6]郭衍，章翔，费舟.整合素在脑胶质瘤的表达与肿瘤恶性程度的关系[J].肿瘤防治研究，2002.29(1):48-49.

[7]靳晓娜，史继云，刘妍.99Tcm标记新型RGD环肽在神经胶质瘤动物模型的实验研究[J].中华核医学杂志，2010.30(3):195.