游泳池水菌落总数不确定度评定

游泳池水菌落总数不确定度评定

汪艳玲

汪艳玲

（淮安市疾病预防控制中心江苏淮安223001）

【摘要】目的：通过评定菌落总数的不确定度，提高公共卫生监测中检测结果准确度。方法：按照GB18204.9-2000《游泳池水微生物学检验菌落总数测定》检测20份游泳池水样品中菌落总数，依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》，分析菌落总数的不确定度来源，采用合并样本标准差计算，评定菌落总数的不确定度。结果：在包含概率为95%时，游泳池水中菌落总数的扩展不确定度为0.073（以对数计），此结果适用于同类样本的检测。结论：用合并样本标准差评定多个同类样本菌落总数的不确定度较为方便，随着检验结果的不断增加，数据可随时加入到合并样本中，更新不确定度的取值范围。

【关键词】游泳池水；菌落总数；不确定度

【中图分类号】R12【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）20-0391-02

测量结果的不确定度评定目前是国际上公认的评定检测结果质量的参数，对结果合理、准确的评定是检验检测机构提供正确检测结果的前提[1]。测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值的分散性，是与测量结果相联系的参数，一切测量结果都有不确定度[2]。本文以20份游泳池水样为例，依据GB18204.9-2000《游泳池水微生物学检验菌落总数测定》[3]和JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》[4]，对菌落总数检测结果进行不确定度评定。

1.材料与方法

1.1材料

本试验所采水样为淮安地区各大游泳池采集的20份游泳池水标本，平板计数琼脂为杭州天和微生物试剂有限公司生产（批号：20150702）。

1.2仪器设备

隔水式电热恒温培养箱，恒温水浴锅，生物安全柜。

1.3方法

按GB18204.9-2000要求，充分混匀水样，以无菌操作吸取样品1ml，加入10ml无菌生理盐水中制成1:10稀释液，混匀，根据水样污染情况，制备成2个连续稀释度的样液，每个稀释度接种2块平皿各1ml，同时取生理盐水做2份空白对照，将冷却至46℃的平板计数琼脂倾注到平皿内，轻轻转动混匀，琼脂凝固后，翻转平皿，置36±1℃培养48h，计数各水样中菌落总数。

1.4建立数学模型

*

N—样品菌落总数，cfu/ml

n1—第一稀释倍数平皿上菌落个数

n2—第二稀释倍数平皿上菌落个数

d—稀释因子，取10

ΣC—平皿上菌落数之和

1.5不确定度来源及分析

测量不确定度有许多来源，按评定方法可分为两类：不确定度的A类评定，用统计方法评定的分量，主要指试验中的随机误差；确定度的B类评定，用非统计方法评定的分量，主要指试验中的系统误差[5]。

本试验不确定度来源主要有以下几个方面：样品重复测定、取样体积、样品稀释、玻璃器具容量允差、培养时间、培养温度等[6]，因随机效应带来的测量重复性带来的A类不确定度对检验结果准确性影响较大，系统误差导致的B类不确定度分量对合成不确定度贡献较小，所以采用不确定度的A类评定菌落总数的不确定度[7]。

2.结果

2.1不确定度评定

本试验共检测20份游泳池水样品，结果选取不同稀释度平皿上30～300之间，空白对照平皿中无菌落生长。因数据的发散性较大，如直接用贝塞尔公式计算出的合并样本标准差很大，因此对检测结果取对数后计算均值和标准差，再根据贝塞尔公式计算出检测结果对数值的合并样本标准差，计算每个样本的取值范围。

计算对数值的合并样本标准差：

*

每份样品重复检测两次，所以两次检测平均值的标准不确定度为：

*

再根据每份样品lgx的取值区间，计算反对数得到每一份样品在95%置信概率下菌落总数含量的取值范围（见表1，结果保留两位有效数字）。

3.讨论

通过以上试验结果的计算可以看出，一组标本检测结果的标准偏差较大时，采用合并样本标准差来计算结果的不确定度较为方便，并且只要再相同的检测条件下，过程受控，就适用于同类标本，在检测工作中，可以随时将新的检测结果加入到合并样本中，重新计算合并样本的标准差，对不确定度进行重新评定。

用合并样本标准差方法对菌落总数进行不确定度评定，可以减少试验误差，提高检测结果的准确度，在日常工作中具有很高的操作性，对于微生物菌落总数不确定度评定较为适用。

【参考文献】

[1]国家质量技术监督局计量司.测量不确定度评定与表示指南[M].北京：中国计量出版社，2001.

[2]周婕，姚羚泠，廖惠青.农村饮用水菌落总数测量不确定度的评定[J].医学动物防制，2014,30（7）：814-816.

[3]GB18204.9-2000《游泳池水微生物学检验菌落总数测定》[S].北京：中华人民共和国卫生部，2000.

[4]JJF1059.1-2012测量不确定度的评定与表示[S].北京：中国计量出版社，2012.

[5]王晓红，姜娴.食品中菌落总数检测结果的不确定度评定[J].中国卫生检验杂志，2011,21（11）：2799-2800.

[6]汤水平，王力清，李静芳，等.婴幼儿配方奶粉菌落总数检验中不确定度的评定[J].微生物学杂志，2009,29（5）：100-103.

[7]谭丹阳.水中菌落总数测定的不确定度评定[J].医学动物防制，2013,29（10）：1171-1173.