临床基础检验学技术重点

临床基础检验学技术重点

冉旭东

四川省达州市宣汉县人民医院检验科 四川达州 ， 636150

一、基础技术重点

首先我们要明白血清与血浆的差别，血清缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ，纤维蛋白原、Ⅱ，凝血酶原、Ⅴ、Ⅷ等。而且除第三因子，血浆除钙离子外（如枸橼酸钠抗凝），含有其他全部凝血因子，适用于血栓和止血检验。

正常人血量约为（70±10）ml／kg体重，成人约四到五升，约占体重的6%～8%，其中血浆占55%，血细胞占45%。女性妊娠期间血量可增加23%～25%。

血液的主要生理功能包括：运输、协调、防御、维持机体内环境稳定等功能

酸碱度的话，正常人血液pH值7.35～7.45，动脉血pH值7.40，静脉血pH值7.35。

血浆渗透量，正常人约为290～310mOsm／（kg·H20）。红细胞均匀混悬状态，与红细胞膜表面的唾液酸根、正常血浆成分、血浆黏度及血流动力学等因素有关。全血黏度约为生理盐水黏度的4～5倍，血浆黏度约为生理盐水黏度的1.6倍。

血沉：小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉减缓，大分子蛋白如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、胆固醇、甘油三酯等使血沉加快。红细胞直径越大血沉越快，球形红细胞、镰形红细胞使血沉减慢。

室温过高使血沉加快，室温过低使血沉减慢。高胆固醇血症、贫血使血沉轻度增快。遗传性红细胞增多症、镰形细胞性贫血、红细胞异形症等血沉可减慢。血沉管倾斜3°，沉降率增加30%。慢性炎症，结核病、结缔组织炎症、风湿热活动期血沉增快，病情好转血沉减慢，非活动期血沉正常。

每个Hb分子由2条α类肽链和2条β类肽链组成。在正常情况下，99%Hb铁原子还原血红蛋白，1%呈高铁血红蛋白，只有Fe2＋状态的Hb才能与氧结合，称为氧合血红蛋白。血红蛋白的合成受激素调节，红细胞生成素：可促进δ-氨基-γ酮戊酸生成和铁的利用，从而促进血红素、Hb的合成；雄激素：能促进δ-氨基-γ酮戊酸合成酶、红细胞生成素的生成。

胚胎早期第一个形成的血红蛋白是HbGowerⅠ。出生后3个月，HbA占Hb总量95%以上，HbF占1%以下。出生后HbA2占Hb总量的2%～3%。静脉血比毛细血管血低。

红细胞稀释液：Hayem液由NaCl调节渗透压、Na2S04提高比密防止细胞粘连、HgCl2防腐和蒸馏水组成。枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠抗凝和维持渗透压、甲醛防腐和固定红细胞、氯化钠调节渗透压）和蒸馏水组成。

发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时，红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高，小细胞低色素贫血的血红蛋白减低，但红细胞计数可正常。

大量失血时，在补充液体前，虽循环血容量缩小，但血液浓度很少变化，从血红蛋白浓度来看，很难反映出存在贫血。如水潴留时，血浆容量增大，即使红细胞容量正常，但血液浓度减低，从血红蛋白浓度来看，已存在贫血，反之，失水时，血浆容量缩小，即使血液浓度增高，但红细胞容量减少，从血红蛋白浓度来看，贫血不明显。球形红细胞：见于遗传性和获得性球形细胞增多症，如自身免疫溶血性贫血、直接理化损伤如烧伤等和小儿。

卡波氏环是胞质中脂蛋白变性所致，常与染色体小体同在，见于巨幼红和铅中毒。

豪焦小体：位于成熟或幼稚红胞质内染成紫红色，数量不一的圆形颗粒，是核的残留物，又称染色质小体。

血细胞比容测定：将离心管置于水平离心机以2264g（即有效半径22.5cm，3000r／min），离心30min。离心后血液分为5层，自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层（紫黑红色）、带氧红细胞层（鲜红色）。

二、红细胞分化：

血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关。受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响，它们的浓度越高，血浆黏度越高。血液生理盐：能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。肝素：加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。血涂片制备：制备涂片时，血滴愈大、角度愈大、推片速度愈快，血膜愈厚，反之则愈薄。血细胞比容增高、血液黏度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推。血液细胞染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH值密切相关。复染时应先加缓冲液，后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。瑞氏：细胞质成分、中性颗粒；吉姆萨：细胞核、寄生虫如疟原虫等。瑞氏染料的质量规格评价：吸光度比值，1.3±0.1时染料即可使用。新鲜配制的染料偏碱，贮存（室温或是37℃，必须加塞，防甲醇挥发如加甘油和氧化成甲酸）时间愈久，染色效果愈好。所用甲醇须为AR级，若其中含过多丙酮，会使染色偏酸，白细胞着色不良。血红蛋白分子是有核红细胞、网织红细胞内形成的一种含色素蛋白质。色素部分为亚铁血红素，指的是原卟啉、铁，蛋白质部分为珠蛋白肽链分为α，141个氨基酸、β146个氨基酸。

椭圆形红细胞：见于遗传性椭圆形细胞增多症可达25%～75%、大细胞性贫血，可达25%、缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血、正常人。靶形红细胞：见于各种低色素性贫血如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病、阻塞性黄疸、脾切除后。

口形红细胞：见于口形红细胞增多症、小儿消化系统疾患引起的贫血、酒精中毒、某些溶血性贫血、肝病和正常人。镰形红细胞：见于镰状细胞贫血、镰状细胞特性样本。

棘红细胞：见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症，高达70%～80%、脾切除后、酒精中毒性肝病、尿毒症。需与皱缩红细胞，呈现锯齿状红细胞鉴别，皱缩红细胞边缘呈锯齿形，排列紧密，大小相等，外端较尖。

裂红细胞：见于DIC、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤和正常人。

缗钱状红细胞：纤维蛋白原、球蛋白增高，见于多发性骨髓瘤。

有核红细胞幼稚红细胞：1周内婴儿可见少量，如溶血性贫血如新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤如各种急、慢性白血病、红白血病、慢性骨髓增生性疾病，如骨髓纤维化、脾切除后。新月形红细胞：见于某些溶血性贫血。泪滴形红细胞：见于贫血、骨髓纤维化和正常人。

红细胞形态不整：见于某些感染、严重贫血、巨幼细胞性贫血。点彩红细胞增高：见于中毒如铅、汞、银、铋、硝基苯、苯胺等、各类贫血，如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等。