蒙药制剂风湿二十五味丸薄层鉴别研究

蒙药制剂风湿 二十五味丸薄层鉴别研究

苏都那布其1 ， 2 ，李沛光 3 ， 王秀兰 1 ， 2 ，郝俊生 4*

（ 1. 内蒙古民族大学蒙医药学院，通辽 028000 ； 2. 内蒙古蒙医药工程技术研究院，通辽 028000 ； 3. 乌兰浩特中蒙制药有限公司，兴安盟 137400 ； 4. 通辽市市场检验检测中心，通辽 028000 ）

摘要 目的：为有效的控制蒙药复方制剂风湿25味丸质量，修订薄层色谱鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对风湿25味丸中紫檀香、丁香、苦参等药材进行薄层色谱鉴别。结果：风湿25味丸供试品与对照药材、对照品斑点清晰，阴性对照无干扰，均能较好鉴别紫檀香、丁香、苦参等药材。结论：该方法重现性好、简便、可靠，可为复方制剂风湿二十五味丸质量控制提供参考。

关键词：蒙药制剂；风湿25味丸；TLC；

蒙药风湿25味丸又叫琪素-25，出自蒙医经典著作“观者之喜”，由驴血粉、白檀香、紫檀香、苦参、栀子、闹羊花、牛黄、西红花、草果、白豆蔻、紫花地丁、诃子、川楝子、麝香、漏芦花、石膏、玉簪花、肉豆蔻、茴麻子、枫香脂、草决明、木棉花蕊 、木棉花瓣、丁香、杜仲等二十五味单味药组成^[1]。以具燥“协日乌素”功能的驴血粉为主药；风湿病3味药茴麻子、枫香脂、草决明；清热、发汗、燥“协日乌素”功能的苦参等，共同促成了燥“协日乌素”、散瘀、消肿、止痛功能的风湿疾病的具有完整的蒙医理论基础的良方^[2]。查阅文献发现对蒙药风湿25味丸研究的少^[3,4],现有标准较低。故基于原标准对其紫檀香、苦参、栀子、闹羊花、人工牛黄、枫香脂和丁香等单味药进行薄层鉴别研究，为复方制剂风湿25味丸进一步质量控制提供参考。

1 仪器与试药

SQP电子天平；KQ-600DB型数控超声波清洗器 ；硅胶G、GF₂₅₄板；香草醛、磷钼酸；7批次风湿25味丸（乌兰浩特中蒙制药有限公司）；紫檀香、枫香脂、闹羊花、苦参、丁香、人工牛黄、闹羊花毒素Ⅲ、闹羊花毒素Ⅱ、苦参碱、丁香酚均由中国食品药品检定研究院购买；试剂均为分析纯。

2. 方法与结果

2.1紫檀香

取本品5g，加乙酸乙酯10ml，超声20分钟，滤过，即得。另取阴性对照4.8g与紫檀香对照药材0.2g同法制备，得阴性对照与对照药材溶液。吸取三种溶液各10l，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-丙酮（7:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

2.2丁香^[5]

取“2.1供试品溶液”。取阴性对照与丁香对照药材同法制备，得阴性对照与对照药材溶液。取丁香酚加乙酸乙酯制16l/ml的溶液。吸取四种溶液各10l，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯（9:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%磷钼酸乙醇试液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

2.3 苦参^[6]

取本品10g，加二氯甲烷50 ml，超声20分钟，滤过，弃去滤液，药渣加浓氨水6 ml、二氯甲烷50ml，超声20分钟，滤过，滤液蒸干，加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。取阴性9.6g与苦参对照药材0.4g同法制备，得阴性与对照药材溶液。取苦参碱加二氯甲烷制成0.2 mg/ml的溶液。吸取四种溶液各10l，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-甲醇（8:3:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水-浓氨试液（4:8:4:1:1）10℃以下放置的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷稀碘化铋钾试液至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同橙色斑点，阴性对照无干扰。

2.4 闹羊花^[7]

取本品10g，加70%乙醇150ml，超声1h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用二氯甲烷振摇提取3次，每次10ml，弃去二氯甲烷液，再用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，即得。取阴性对照与闹羊花同法制备，得阴性与对照药材溶液。取闹羊花毒素Ⅲ加甲醇制成0.5mg/ml的溶液，作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各10 l，点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸（2:2:1:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，与对照药材、闹羊花毒素Ⅲ色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

2.5 枫香脂^[8]

取本品3.3g，加甲醇10ml，超声20分钟，滤过，即得。取阴性与枫香脂对照药材，同法制备，得阴性与对照药材溶液。吸取上述三种溶液各10l，点于同一硅胶GF

₂₅₄薄层板上，以石油醚-丙酮（9:0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯254 nm下检视。供试品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

2.6 人工牛黄^[9]

取“2.5供试品溶液”。取阴性对照与人工牛黄对照药材溶液同法制备，得阴性与对照药材溶液。取胆酸、猪去氧胆酸对照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各10l，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20:25:2:3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%磷钼酸乙醇试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。

讨论

风湿25味丸显微鉴别。不规则片状物浅棕红色，表面显颗粒状（驴血）。纤维棕红色，周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维（紫檀香，）。花粉粒四面体形，直径58～97μm，具三个萌发孔^[7]（闹羊花）。石细胞类方形、类多角形或呈纤维状，直径14～40μm，长至130μm，壁厚，孔沟细密^[10]（诃子）。果皮纤维束旁的细胞中含草酸钙方晶或少数簇晶，形成晶纤维^[11]（川楝子）。不规则片状结晶无色，表面平直纹理（石膏）。花粉粒类圆形或类椭圆形，直径约100μm，表面有网状纹理（玉簪花）。种皮栅状细胞无色或淡黄色，侧面观细胞1列，呈长方形，排列稍不平整，壁较厚，光辉带2条^[12]（决明子）。花粉粒类三角形，直径50～60μm，表面有网状纹理（木棉花蕊）。星状非腺毛多破碎，由多个呈长披针形的细胞组成，由4～14分叉，每分叉为一个单细胞（木棉花瓣）。花粉粒极面观三角形，赤道表面观双凸镜形，具3副合沟^[5]（丁香）。橡胶丝成条或扭曲成团，表面显颗粒性^[13]（杜仲）。

参考文献：

[1] 琪格其图. 现代蒙医学. 沈阳: 辽宁民族出版社，2002:95.

[2] 巴根那. 蒙药方剂学. 呼和浩特: 内蒙古人民出版社，2011:129.

3. 那仁满都拉,董秋梅.蒙药琪素-25丸治疗类风湿关节炎的临床观察[J].中国中医药科技,2014,21(04):

430-431.

3. 朝格毕力格.82例蒙药琪素-25丸治疗类风湿关节炎的可行性[J].临床医药文献电子杂志,2016,3(58):

11636.

1 基金项目：内蒙古自治区科技重大专项“蒙医药现代化关键技术研究及蒙药产业化”；内蒙古自治区食品药品监督管理局内蒙古蒙药材标准研究课题，项目编号：JYCZB18-026；蒙药风湿二十五味丸标准新增及修订鉴别研究项目

作者简介：苏都那布其（1991-），女，在读博士、主管蒙药师，研究方向：蒙药有效物质基础及药理研究。

*通讯作者：郝俊生（1992-），男，检验员，研究方向：蒙药有效物质基础及药理研究。