天津 天津市医药集团有限公司 300171
摘要：目的 通过 90 天喂养试验，评价决明子提取物长期食用的安全性。方法 将大鼠均分为4组，即对照组及决明子提取物1.25 g/kg·BW、2.50 g/kg·BW、3.75 g/kg·BW剂量组，灌胃给予相应受试物90天，于实验中期及末期观察大鼠状态，检测血常规、血生化各项指标，解剖并进行病理组织检查。结果 决明子提取物对大鼠生长发育无不良影响，血常规、血生化指标结果均在标准值范围内，病理组织检查未见与决明子提取物相关的毒副作用。结论 长期服用决明子提取物是安全的。
关键词：决明子提取物；90天喂养
决明子是豆科植物钝叶决明Cassia obtusifolia L.或决明（小决明）Cassia tora L.的干燥成熟种子。决明子具有清热明目、润肠通便的功能[1]。决明子富含蒽醌等有效成分，具有降三高、润肠通便、护肝等作用。决明子为我国临床中常用中药，同时也是我国卫生部公布的药食同源物质之一[2]。近年来以决明子为原料的保健食品种类越来越多，为亚健康人群提供健康保障。在本试验中，进一步深入研究决明子提取物的长期毒性，为其开发应用提供一定依据。
1 材料及方法
1.1样品 决明子提取物制备工艺：经粉碎、提取（8倍量70％的乙醇，回流提取2次，每次1h）、过滤、浓缩、干燥、包装制得。成人每日推荐量为0.75g即折合决明子生药6g。
1.2实验方法选择清洁级雌雄各半大鼠80只，将大鼠随机分成对照组和决明子提取物1.25 g/kg·BW、2.50 g/kg·BW、3.75 g/kg·BW 三个剂量组（即成人推荐剂量的100、200、300倍）。采用掺入饲料法，将受试物决明子提取物按1.56%、3.13%、4.69%的配比掺入基础鼠粮中，对照组给予基础鼠粮，90天喂养试验期间，大鼠单笼饲喂，保证自由饮水及摄食，每日更换水及垫料，记录生长指标，在试验中期及后期进行相关安全性指标的检测，且对脏器组织进行解剖及观察。
2结果
2.1一般状况90天喂养期间，各组大鼠均无拒食现象，毛色、形态、精神状态无异常，无死亡情况。
2.2样品对大鼠体重增重、进食量、食物利用率的影响
观察期间，决明子提取物高、中、低剂量组大鼠的体重增重、进食量、食物利用率与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。
表1 大鼠总增重、总进食量、总食物利用率结果（X±S，n=10）
性别 | 组别 | 总增重（g） | 总进食量（g） | 总食物利用率（%） |
雄 | 对照组 | 398.7±41.4 | 2356.8±118.4 | 16.9±1.3 |
1.25 g/kg·BW | 400.3±39.8 | 2316.5±142.0 | 17.3±1.1 | |
2.50 g/kg·BW | 399.9±40.3 | 2384.1±113.2 | 16.8±1.6 | |
3.75 g/kg·BW | 403.4±41.7 | 2369.7±125.9 | 17.0±1.2 | |
雌 | 对照组 | 287.3±38.9 | 2008.9±145.7 | 14.3±1.5 |
1.25 g/kg·BW | 291.5±41.5 | 2023.4±137.8 | 14.4±1.4 | |
2.50 g/kg·BW | 288.7±39.4 | 2037.6±126.4 | 14.2±1.1 | |
3.75 g/kg·BW | 276.3±40.0 | 1976.0±131.6 | 14.0±1.7 |
2.3样品对大鼠血液学指标的影响
观察期间，决明子提取物高、中、低剂量组大鼠中、末期血液学指标均在正常范围值内，与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。说明大鼠血液学指标未受到决明子提取物的影响。
表2 大鼠试验中期血液学指标检查结果（X±S，n=10）
性别 | 组别 | 血红蛋白HGB (g/L) | 红细胞计数RBC (1012/L) | 红细胞压积HCT (L/L) | 血小板数PLT (109/L) |
雄 | 对照组 | 140±9 | 7.44±0.65 | 0.653±0.054 | 733±161 |
1.25 g/kg·BW | 139±10 | 7.38±0.72 | 0.649±0.046 | 729±180 | |
2.50 g/kg·BW | 137±8 | 7.50±0.67 | 0.660±0.070 | 746±123 | |
3.75 g/kg·BW | 141±9 | 7.59±0.59 | 0.677±0.051 | 750±140 | |
雌 | 对照组 | 142±6 | 7.36±0.81 | 0.661±0.069 | 709±138 |
1.25 g/kg·BW | 138±8 | 7.45±0.64 | 0.654±0.063 | 687±156 | |
2.50 g/kg·BW | 136±9 | 7.39±0.72 | 0.673±0.057 | 724±149 | |
3.75 g/kg·BW | 139±11 | 7.57±0.78 | 0.682±0.044 | 695±172 |
表3 大鼠试验末期血液学指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 组别 | 血红蛋白HGB (g/L) | 红细胞计数RBC (1012/L) | 红细胞压积HCT (L/L) | 血小板数PLT (109/L) |
雄 | 对照组 | 137±8 | 7.76±0.96 | 0.634±0.049 | 694±135 |
1.25 g/kg·BW | 140±11 | 7.83±0.83 | 0.628±0.053 | 703±192 | |
2.50 g/kg·BW | 139±9 | 7.64±0.79 | 0.639±0.057 | 711±138 | |
3.75 g/kg·BW | 141±10 | 7.56±0.88 | 0.651±0.049 | 689±144 | |
雌 | 对照组 | 138±8 | 7.60±1.01 | 0.640±0.064 | 699±126 |
1.25 g/kg·BW | 136±7 | 7.85±0.94 | 0.658±0.055 | 715±149 | |
2.50 g/kg·BW | 135±9 | 7.51±0.75 | 0.627±0.042 | 722±137 | |
3.75 g/kg·BW | 137±10 | 7.74±0.81 | 0.634±0.050 | 683±154 |
表4 大鼠试验中期血液学指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 组别 | 白细胞计数WBC (109/L) | 淋巴细胞LYM(%) | 中性粒细胞NEU(%) | 单核细胞MONO(%) | 嗜酸性粒细胞EOS(%) | 嗜碱性粒细胞BASO(%) |
雄 | 对照组 | 11.36±3.33 | 70.09±8.83 | 24.84±6.87 | 4.21±1.58 | 0.83±0.33 | 0.98±0.47 |
1.25 g/kg·BW | 10.76±3.76 | 69.58±7.94 | 25.12±8.76 | 3.86±1.43 | 0.90±0.28 | 0.99±0.42 | |
2.50 g/kg·BW | 11.08±3.67 | 70.24±9.01 | 23.47±7.75 | 3.94±1.26 | 0.78±0.40 | 1.02±0.22 | |
3.75 g/kg·BW | 10.94±2.76 | 70.37±8.64 | 24.62±8.28 | 4.15±1.34 | 0.86±0.37 | 0.96±0.60 | |
雌 | 对照组 | 11.23±4.03 | 71.06±7.76 | 24.26±5.15 | 4.08±1.13 | 0.78±0.51 | 0.92±0.41 |
1.25 g/kg·BW | 11.17±3.57 | 71.31±6.59 | 23.58±9.58 | 4.11±1.07 | 0.80±0.26 | 1.00±0.37 | |
2.50 g/kg·BW | 10.83±3.81 | 70.87±8.44 | 24.96±8.54 | 3.99±1.50 | 0.91±0.34 | 0.86±0.46 | |
3.75 g/kg·BW | 11.29±4.10 | 70.96±7.21 | 23.97±7.91 | 4.16±1.41 | 0.84±0.45 | 0.99±0.35 |
表5 大鼠试验末期血液学指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 组别 | 白细胞计数WBC (109/L) | 淋巴细胞LYM(%) | 中性粒细胞NEU(%) | 单核细胞MONO(%) | 嗜酸性粒细胞EOS(%) | 嗜碱性粒细胞BASO(%) |
雄 | 对照组 | 10.89±3.13 | 70.36±8.45 | 23.89±7.50 | 4.16±1.35 | 0.79±0.33 | 1.05±0.30 |
1.25 g/kg·BW | 11.06±3.95 | 71.20±9.17 | 24.35±8.46 | 4.08±0.92 | 0.85±0.42 | 1.14±0.57 | |
2.50 g/kg·BW | 11.23±2.86 | 70.89±6.23 | 23.13±7.36 | 4.19±1.83 | 0.76±0.50 | 1.08±0.42 | |
3.75 g/kg·BW | 10.76±3.47 | 71.13±8.14 | 24.46±6.91 | 3.98±1.02 | 0.80±0.48 | 0.97±0.67 | |
雌 | 对照组 | 10.29±4.13 | 71.37±7.39 | 24.43±8.84 | 4.09±1.22 | 0.81±0.37 | 1.16±0.44 |
1.25 g/kg·BW | 10.65±3.62 | 72.00±7.87 | 23.36±9.23 | 3.84±0.94 | 0.78±0.41 | 1.23±0.39 | |
2.50 g/kg·BW | 10.17±3.75 | 70.76±9.04 | 25.01±7.68 | 3.97±1.41 | 0.86±0.39 | 1.28±0.55 | |
3.75 g/kg·BW | 9.94±2.98 | 71.65±6.68 | 24.78±8.36 | 3.74±1.86 | 0.84±0.36 | 1.17±0.63 |
2.4样品对大鼠生化指标的影响
观察期间，决明子提取物高、中、低剂量组大鼠中、末期血生化指标均在正常范围值内，与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。说明大鼠血生化指标未受到决明子提取物的影响。
表6 大鼠试验中期生化指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 分组 | 丙氨酸转氨酶ALT(U/L) | 天冬氨酸氨基转移 酶AST(U/L) | 总蛋白TP(g/L) | 白蛋白ALB (g/L) |
雄 | 对照组 | 45.98±5.10 | 161.98±23.49 | 70.43±3.33 | 35.36±2.83 |
1.25 g/kg·BW | 47.72±4.91 | 160.89±26.97 | 71.28±5.29 | 33.98±2.12 | |
2.50 g/kg·BW | 47.09±6.24 | 158.73±27.09 | 68.58±4.65 | 34.80±3.48 | |
3.75 g/kg·BW | 46.88±5.06 | 160.37±25.74 | 69.64±3.27 | 34.91±2.25 | |
雌 | 对照组 | 46.64±6.65 | 165.44±20.43 | 69.72±5.77 | 35.51±3.07 |
1.25 g/kg·BW | 48.13±5.37 | 166.91±21.28 | 70.11±4.02 | 34.98±1.95 | |
2.50 g/kg·BW | 47.23±5.19 | 165.09±28.30 | 69.97±5.78 | 35.28±2.49 | |
3.75 g/kg·BW | 46.38±6.42 | 164.98±27.33 | 71.34±6.13 | 35.00±2.80 |
表7 大鼠试验末期生化指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 分组 | 丙氨酸转氨酶ALT(U/L) | 天冬氨酸氨基转移酶AST (U/L) | 总蛋白TP (g/L) | 白蛋白ALB (g/L) |
雄 | 对照组 | 45.06±7.02 | 155.19±21.69 | 70.02±3.99 | 33.77±1.90 |
1.25 g/kg·BW | 46.12±6.19 | 162.47±22.98 | 69.57±5.57 | 34.90±2.48 | |
2.50 g/kg·BW | 44.99±5.42 | 158.79±19.77 | 71.34±3.82 | 34.38±2.08 | |
3.75 g/kg·BW | 46.83±7.11 | 156.23±24.86 | 70.77±4.91 | 34.21±2.34 | |
雌 | 对照组 | 45.49±5.16 | 160.37±29.43 | 71.87±6.67 | 34.56±2.49 |
1.25 g/kg·BW | 46.30±6.00 | 158.59±21.88 | 69.16±5.25 | 33.83±1.85 | |
2.50 g/kg·BW | 45.91±4.93 | 161.45±26.37 | 70.51±4.38 | 34.84±2.94 | |
3.75 g/kg·BW | 46.84±5.88 | 160.07±23.70 | 70.42±7.00 | 34.67±3.00 |
表8 大鼠试验中期生化指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 分组 | 尿素氮BUN (mmol/L) | 肌酐CREA (μmol/L) | 胆固醇CHOL (mmol/L) | 甘油三酯TG (mmol/L) | 血糖GLU (mmol/L) |
雄 | 对照组 | 6.69±1.06 | 41.19±5.88 | 1.77±0.28 | 0.77±0.13 | 4.58±0.72 |
1.25 g/kg·BW | 6.71±0.95 | 42.07±4.90 | 1.95±0.30 | 0.82±0.25 | 4.67±0.44 | |
2.50 g/kg·BW | 6.94±1.37 | 40.94±7.71 | 1.89±0.37 | 0.76±0.18 | 5.01±0.31 | |
3.75 g/kg·BW | 6.87±1.11 | 43.38±6.18 | 1.81±0.45 | 0.83±0.11 | 4.87±0.49 | |
雌 | 对照组 | 6.81±1.28 | 44.79±5.78 | 1.97±0.33 | 0.88±0.19 | 4.73±0.37 |
1.25 g/kg·BW | 6.74±0.83 | 43.81±6.34 | 1.86±0.29 | 0.90±0.20 | 4.83±0.32 | |
2.50 g/kg·BW | 6.90±1.04 | 44.55±5.75 | 1.91±0.34 | 0.84±0.17 | 4.79±0.84 | |
3.75 g/kg·BW | 6.85±0.97 | 42.72±4.83 | 1.84±0.27 | 0.96±0.23 | 5.03±0.50 |
表9 大鼠试验末期生化指标检查结果(X±S，n=10)
性别 | 分组 | 尿素氮BUN (mmol/L) | 肌酐CREA (μmol/L) | 胆固醇CHOL (mmol/L) | 甘油三酯TG (mmol/L) | 血糖GLU (mmol/L) |
雄 | 对照组 | 6.67±0.73 | 42.15±6.01 | 1.82±0.40 | 0.90±0.19 | 4.72±0.57 |
1.25 g/kg·BW | 6.82±0.94 | 43.07±3.94 | 1.91±0.33 | 0.86±0.25 | 4.50±0.38 | |
2.50 g/kg·BW | 6.99±1.27 | 41.91±5.22 | 1.85±0.38 | 0.85±0.28 | 4.81±0.61 | |
3.75 g/kg·BW | 6.84±0.90 | 42.53±6.40 | 1.79±0.42 | 0.79±0.27 | 4.66±0.82 | |
雌 | 对照组 | 6.79±1.16 | 44.39±5.65 | 1.80±0.35 | 0.83±0.31 | 4.85±0.76 |
1.25 g/kg·BW | 6.93±1.32 | 42.22±6.71 | 2.00±0.29 | 0.89±0.24 | 4.67±0.90 | |
2.50 g/kg·BW | 6.88±0.75 | 43.01±4.38 | 1.94±0.36 | 0.86±0.22 | 4.92±0.73 | |
3.75 g/kg·BW | 6.80±0.87 | 43.94±5.12 | 1.98±0.27 | 0.84±0.25 | 4.68±0.84 |
2.5样品对大鼠脏器重量、脏器/体重比值的影响
观察期间，决明子提取物高、中、低剂量组大鼠脏器重量及脏体比均在正常范围值内，未出现异常肿大或萎缩脏器，与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。说明大鼠脏器未受到决明子提取物的影响。
表10 大鼠脏器重量结果（X±S，n=10）
性别 | 组别 | 实验末禁食后体重（g） | 肝（g） | 脾（g） | 肾（g） | 睾丸（g） |
雄 | 对照组 | 453.3±38.65 | 13.56±1.37 | 1.26±0.22 | 2.83±0.37 | 4.01±0.43 |
1.25 g/kg·BW | 448.6±39.81 | 13.74±1.25 | 1.30±0.28 | 2.86±0.41 | 3.86±0.37 | |
2.50 g/kg·BW | 460.1±40.54 | 13.95±1.48 | 1.27±0.24 | 2.79±0.28 | 4.12±0.40 | |
3.75 g/kg·BW | 456.7±43.41 | 13.88±1.09 | 1.33±0.20 | 2.81±0.38 | 4.07±0.51 | |
雌 | 对照组 | 335.7±40.22 | 10.24±1.33 | 1.19±0.31 | 2.09±0.34 | |
1.25 g/kg·BW | 341.2±37.94 | 10.33±1.57 | 1.25±0.26 | 2.12±0.39 | ||
2.50 g/kg·BW | 333.4±39.38 | 10.41±1.65 | 1.27±0.25 | 2.10±0.53 | ||
3.75 g/kg·BW | 328.9±41.15 | 10.18±1.20 | 1.16±0.30 | 2.11±0.36 |
表11 大鼠脏体比结果（X±S，n=10）
性别 | 组别 | 肝脏/体重（%） | 脾脏/体重（%） | 肾脏/体重（%） | 睾丸/体重（%） |
雄 | 对照组 | 2.99±0.27 | 0.28±0.07 | 0.62±0.11 | 0.88±0.11 |
1.25 g/kg·BW | 3.06±0.31 | 0.29±0.04 | 0.64±0.07 | 0.86±0.09 | |
2.50 g/kg·BW | 3.03±0.28 | 0.28±0.06 | 0.61±0.08 | 0.90±0.10 | |
3.75 g/kg·BW | 3.04±0.30 | 0.29±0.05 | 0.62±0.05 | 0.89±0.10 | |
雌 | 对照组 | 3.05±0.34 | 0.35±0.04 | 0.62±0.09 | |
1.25 g/kg·BW | 3.03±0.29 | 0.37±0.08 | 0.62±0.10 | ||
2.50 g/kg·BW | 3.12±0.26 | 0.38±0.09 | 0.63±0.06 | ||
3.75 g/kg·BW | 3.10±0.35 | 0.35±0.06 | 0.64±0.07 |
2.6病理组织检查结果 肉眼可见决明子提取物1.25 g/kg·BW、2.50 g/kg·BW、3.75 g/kg·BW 三个剂量组及对照组大鼠胸腹腔内主要器官的大小、颜色、形态正常，无出血、萎缩、坏死、溃烂等现象。说明决明子提取物对脏器无损害作用。
3讨论 近年来,由于决明子的药理作用广泛，其已成为保健品的重要原料之一，但现有对决明子安全性的研究并不全面，本实验以决明子提取物为受试物，给予大鼠90天，通过实验结果发现，在本实验剂量条件下，与对照组比较，各剂量组（成人推荐剂量的100、200、300倍）大鼠未见异常，决明子提取物安全无毒。
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