简介:摘要目的探讨微小RNA191-5p(miR-191-5p)对胃癌细胞迁移、克隆形成和增殖的影响。方法采用实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)检测分析了来自山西省肿瘤医院的60例胃癌患者的胃癌组织(C组)及其癌旁正常组织(N组)中miR-191-5p的表达水平;应用pcDNA3.1载体构建过表达miR-191-5p的重组质粒(pcDNA-mRNA-191-5p),实现miR-191-5p在胃癌细胞中的过表达,用miRNA-191-5p inhibitor实现miR-191-5p在胃癌细胞中的低表达;分别用划痕愈合实验、克隆形成实验和CCK-8法检测细胞迁移、克隆形成和增殖能力;Targetscan预测miR-191-5p与周期素依赖性激酶6(CDK6)的结合位点,并通过双荧光报告基因验证;Western印迹检测miR-191-5p对p21和CDK6蛋白表达的影响。结果与N组相比,C组中有53例(88%)胃癌组织中出现miR-191-5p的表达下调;C组miR-191-5p的表达水平为0.43±0.13,显著低于N组的0.88±0.12,P<0.001,过表达miR-191-5p能显著抑制胃癌细胞的迁移、克隆形成和增殖能力,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光报告基因证实miR-191-5p与CDK6的3′UTR结合;Western印迹显示胃癌细胞中pcDNA-miR-191-5p下调了CDK6表达而上调了p21表达。结论miR-191-5p表达下调可能参与胃癌的发生发展,过表达miR-191-5p能下调CDK6并抑制胃癌细胞生长。
简介:摘要目的探讨miRNA-522-3p(miR-522-3p)在胃癌组织和细胞中的表达及其对RSU1表达的调控,以及体外对胃癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测山西白求恩医院2019年5月至2020年6月确诊的50例胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织中miR-522-3p的相对表达水平。将胃癌MGC-803细胞和BGC-823细胞分为miR-522-3p抑制剂组(转染miR-522-3p抑制剂)和空载体组(转染空载体),采用CCK-8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞的划痕愈合能力,流式细胞术检测细胞凋亡能力;通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-522-3p和RSU1的靶向相关性,蛋白质印迹法检测RSU1蛋白的变化。结果qRT-PCR结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-522-3p的相对表达水平上调,差异具有统计学意义(0.84±0.31比0.48±0.22,t=2.93,P<0.05)。不同肿瘤长径和病理分级的胃癌组织中miR-522-3p的相对表达水平差异有统计学意义(均P<0.05)。体外实验表明,48、72 h时miR-522-3p抑制剂组MGC-803细胞、BGC-823细胞的细胞增殖率均下降(均P<0.05),MGC-803、BGC-823细胞转染miR-522-3p抑制剂后,能抑制MGC-803、BGC-823细胞的划痕愈合能力。双荧光素酶报告基因实验验证miR-522-3p能靶向结合RSU1的3'UTR,并影响其荧光活性;蛋白质印迹法结果显示,miR-522-3p抑制剂可促进RSU1蛋白的表达。结论miR-522-3p可能通过调控RSU1表达参与胃癌的进展,其可能是潜在的治疗靶标。
简介:摘要:公路建设是我国城市现代化的推进标志,现如今社会的不断发展以及科学技术水平的提高,已经促进了城市化的建设,加快了城市发展的脚步,同时也导致城市中的交通压力逐渐增长。在当前时代背景下,人们的出行已经变得更加频繁,为了满足现代化社会发展的需求,必须要在公路工程项目建设方面投入更多的关注,认真思考公路工程项目建设的有效途径和合理方法,这直接影响到人们出行的舒适度以及安全性,因此必须要在公路工程路基路面施工质量控制方面提高重视,寻找合适的方法,提高施工技术水平,保障工程项目顺利实施。文章针对公路工程路基路面施工质量影响因素及防范措施进行的分析具有重要参考意义和价值,有利于项目的顺利完成。
简介:摘要目的基于学生参与理论,了解临床医学专业学生学业成绩的影响因素。方法2019年6月,选择北京大学2014级临床医学专业174名学生为研究对象,通过问卷星在线调查回顾性了解医学生在医预、基础、临床教育阶段的学生投入与院校投入状况。拟合多水平模型分析学生投入与院校投入对学业成绩的影响。结果学生投入变量中,元认知策略(β=0.058,P<0.01)、情感投入(β=0.040,P=0.013)、课余学习投入(β=0.006,P<0.01)会对平均学分绩点(grade point average,GPA)产生影响,且这些影响不随学业阶段的变化而变化。科研活动投入对GPA的影响与学业阶段有关,从医预、基础到临床教育阶段,科研活动投入的效应由负转正。院校投入变量中,只有设备设施对GPA产生影响,其效应在医预和基础阶段为负,而仅在临床阶段为正。结论学生的元认知策略和情感投入促进提升学业成绩;院校硬环境本身并不一定能够促进学生学习。