简介:以痢疾志贺氏菌为抗原免疫产蛋母鸡.从鸡卵黄中提取免疫球蛋白.建立抗痢疾志贺氏菌的特异性IgY的效价检测方法.并研究母鸡的免疫应答性以及抗体的提取方法和体外抑菌效果。研究结果表明:用10^8cfu/mL和1^9cfu/mL剂量的抗原分别免疫的鸡的卵黄中.于初洗免疫后的第12天出现抗痢疾志贺氏菌IgY,两组效价均为1:3600。经加强免疫后效价迅速上升,至第48天低剂量免疫组达到最高效价1:28800;第60天高剂量免疫组达到最高效价1:57600。低剂量免疫组的效价维持了210d,高剂量免疫组的效价在免疫后360d时仍维持在1:7200水平。用水稀释法、硫酸铵溶液分级盐析、SephadexG-25凝胶过滤CA提取IgY,提纯后IgY的效价翻倍。SDS—PAGE鉴定抗体的纯度,电泳图谱中出现抗体的轻链和重链两条带。体外抑茼实验表明,IgY能抑制痢疾志贺氏菌的生长.
简介:目的:探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备方法以及体外抗前列腺癌PC-3、DU-145细胞的活性。方法:以胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶4种蛋白酶为供选酶种,以酶解液中游离ANN含量和腥味值为测量指标,对酶种进行筛选,以获得最佳酶解工艺。选择分子质量3ku以下的酶解液分离纯化,所得多肽通过MTT法、AO/EB染色,做体外抗前列腺癌细胞试验。结果:胰蛋白酶酶解效果最佳,最佳酶解条件组合是pH8.0,温度50℃,酶解时间8h,加酶量1200u/g。分子质量3ku以下的酶解液能抑制PC-3、DU-145细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变。结论:由胰蛋白酶酶解所得多肽,在体外能抑制前列腺癌PC-3和DU-145细胞生长,诱导细胞凋亡。
简介:目的:制备降解(低分子质量)壳聚糖并考察对肉品的保鲜效果。方法:采用H2O2均相氧化降解壳聚糖,以乌氏黏度法测其黏均分子质量;用牛津杯法测定降解壳聚糖对大肠杆菌、金葡菌、霉菌的抑菌圈直径;喷洒降解壳聚糖溶液于肉品表面,用表面涂抹法测定肉品在25℃放置过程中菌落总数的变化。结果:影响降解壳聚糖分子质量大小的因素顺序为:时间〉温度〉H2O2浓度〉HAc浓度;在反应时间6h、温度75℃、H2O2体积分数6%和HAc体积分数4%时,可得黏均相对分子质量为2300的可溶性壳聚糖;降解壳聚糖对大肠杆菌、金葡菌的抑菌率高于未降解壳聚糖,而对霉菌的抑菌性变化不大;经质量分数6%、黏均分子质量2300壳聚糖溶液喷洒肉品表面后,鲜猪肉4d、熟猪肉6d可保持良好色泽、弹性、气味,且菌落总数符合GB2726-2005要求。结论:低分子质量壳聚糖可作为肉品防腐保鲜剂。