简介:摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因,探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象,设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA,sgRNA),将其克隆入CRISPR/Cas9质粒,并应用其将E6、E7基因敲除,随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果,并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒,经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后,可以引发靶点DNA的突变,致使E6和E7基因密码子改变,无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验,pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比,P=0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比,P=0.0007),促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复,细胞的恶性度降低。
简介:摘要目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16早期基因E2和E6与核不均一核糖核蛋白(hnRNP)E2在宫颈癌变中的作用及其交互效应。方法研究对象来源于课题组在山西省介休市建立的"自然人群宫颈病变队列",以2014年6—9月经病理学确诊的正常宫颈(NC)女性、低度宫颈上皮内瘤变(CIN Ⅰ)、高度宫颈上皮内瘤变(CIN Ⅱ/Ⅲ)以及同期在山西医科大学第二医院确诊的宫颈鳞状细胞癌(SCC)病例为研究对象。共纳入257名研究对象,NC、CINⅠ、CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC组分别为67名(26.07%)、69例(26.85%)、68例(26.46%)、53例(20.62%)。采用问卷调查收集人口学特征、生活卫生习惯及宫颈病变相关信息,并采集宫颈脱落细胞和宫颈活检组织,检测HPV16的感染、hnRNP E2、HPV16 E2和E6的蛋白表达水平。根据NC组的hnRNP E2、HPV16 E2、E6蛋白表达量及E2/E6比值的M值,将研究对象分为高、低表达组/比值组,采用多因素logistic回归模型分析HPV16早期基因E2和E6、hnRNP E2与宫颈癌变的关联,并应用广义多因子降维模型(GMDR)评价其交互作用。结果NC、CIN Ⅰ、CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC组的年龄分别为(47.00±9.07)、(47.64±7.35)、(46.37±8.67)和(51.26±8.03)岁。多因素logistic回归模型分析结果显示,HPV16 E2低表达、E6高表达及E2/E6低比值可导致CIN Ⅱ/Ⅲ[OR(95%CI)值分别为11.11(1.63~75.56)、8.00(1.28~50.04)、9.75(1.22~77.72)]和SCC[OR(95%CI)值分别为14.22(2.11~95.88)、10.33(1.67~64.00)、12.38(1.56~97.91)]的患病风险增加;hnRNP E2低表达可导致CIN Ⅱ/Ⅲ、SCC风险增加[OR(95%CI)值为3.35(1.39~8.10)、5.53(1.54~19.88)]。GMDR模型交互作用分析结果显示,hnRNP E2低表达、HPV16 E2低表达、HPV16 E6高表达在CIN Ⅱ/Ⅲ和SCC组均存在交互作用(P值均<0.05)。结论HPV16早期基因的异常表达和hnRNP E2低表达均可能增加宫颈癌变的发病风险,且在宫颈癌变的发生发展中存在交互作用。
简介:摘要目的研究4-羟基-3-甲基-2-烯基焦磷酸(HMBPP)和多肽E7对结核患者胸水及脐带血中γδ T细胞分泌白介素6(IL-6)的影响和机制。方法收集自广州市胸科医院临床诊断结核性胸膜炎患者胸水标本18例,自中山大学附属第三医院正常健康产妇脐带血标本17例。使用流式分选技术分选出结核性胸水和脐带血中的γδ T细胞与CD277+CD14+单核-巨噬细胞混合培养,分别用HMBPP或E7刺激后,运用流式细胞术检测分泌IL-6的γδ T细胞百分率及表达程序性死亡配体1(PD-L1)的CD277+CD14+单核-巨噬细胞百分率;利用RT-PCR技术检测细胞中IL-6、PD-L1的mRNA表达水平;用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6的含量;用PD-L1特异性小分子干扰RNA(siRNA)沉默PD-L1的表达以检测PD-L1是否参与分泌IL-6;在分选于结核性胸水和脐带血的共培养细胞中,HMBPP或E7刺激后上述指标在每一时间点对照组和实验组间分别采用独立样本t检验比较其差异,分析其统计学意义。结果在结核性胸水和脐带血中,给予HMBPP或E7刺激24 h之后,与对照组相比IL-6+γδ+ T细胞占比显著升高,给予HMBPP或E7刺激12 h之后γδ T细胞中IL-6在mRNA水平的相对表达量显著上调,以及在蛋白质水平的表达显著上调;在分选于脐带血的共培养细胞中,给予HMBPP或E7刺激,CD277+CD14+单核-巨噬细胞中PD-L1在mRNA水平的相对表达量显著上调[(3.70±0.33)vs(4.20±0.34)vs 1.00];在沉默PD-L1的表达后,γδ T细胞中IL-6的表达显著降低[(0.53±0.03)vs(0.55±0.01) vs 1.00],差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论HMBPP和多肽E7能够促进CD277+CD14+单核-巨噬细胞PD-L1表达上调,后者参与刺激与其共培养的γδ T细胞分泌更多的IL-6,这为γδ T细胞的抗结核免疫机制的研究以及结核患者的免疫治疗提供依据。
简介:摘要目的通过研究中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-HorseP[12]E403蛋白与寡糖、唾液受体的结合特征,进而为轮状病毒的跨种传播及受体间的作用机制提供重要科学依据。方法通过大肠杆菌表达系统表达、纯化中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白,并利用唾液及寡糖结合实验分析该基因型的受体结合特征。结果马源GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白与黏蛋白核心mucin core 2糖结合良好,与A、B、Lewis型等寡糖及唾液中的HBGAs均不结合。结论VP8*-Horse P[12]E403蛋白的潜在受体可能是黏蛋白核心2,未与人唾液发生结合。
简介:
简介:摘要目的探讨5E康复护理模式对COPD患者自我管理行为和疲乏症状的影响。方法采用便利抽样法,选取2018年10月—2019年9月在山东省烟台毓璜顶医院住院的110例COPD患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(53例)和试验组(57例)。排除失访和资料收集不完整的患者后,最后对照组纳入患者48例,试验组纳入患者51例。对照组采用医院常规护理及健康指导,试验组采用5E康复护理模式。采用COPD患者自我管理量表、慢性病治疗功能评估-疲劳量表(FACIT-F)评估两组干预的效果。结果干预前两组患者的自我管理量表各维度评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);出院后12周试验组患者的自我管理量表各维度评分均高于对照组,差异有统计学有意义(P<0.05)。干预前、出院后12周两组患者的疲乏情况得分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论基于5E康复护理模式能够提高COPD患者的自我管理行为,但不能改善患者的疲乏症状,将来需要进一步开展大样本、多中心、长时间研究以探讨5E康复护理模式对患者疲乏症状的影响。
简介:摘要目的探讨半胱氨酰白三烯(CysLTs)在儿童急性呼吸道感染发病中的作用。方法选择2014年6月至2017年5月在广东省妇幼保健院接受治疗的急性呼吸道感染患儿63例和同期接受体检的健康儿童30名为研究对象,检测急性呼吸道感染和健康儿童的尿白三烯E4(LTE4)水平,并分别比较不同年龄、病情、病原体和有无过敏史的急性呼吸道感染患儿的尿LTE4水平的差异。结果急性呼吸道感染患儿尿LTE4水平显著高于健康儿童(t=20.400,P<0.001)。0~3岁组的尿LTE4水平显著高于4~6岁组及7~14岁组患儿(P均<0.05),且尿LTE4水平与年龄呈显著负相关(r=-0.487,P<0.001)。支气管肺炎患儿的尿LTE4水平显著高于急性支气管炎和上呼吸道感染患儿(P均<0.05)。肺炎支原体感染和病毒性感染患儿的尿LTE4水平显著高于细菌感染患儿(P均<0.05)。合并过敏史的患儿LTE4水平明显高于无过敏史的患儿(P<0.05)。结论CysLTs参与了儿童急性呼吸道感染的发病过程,尿LTE4水平与发病年龄、病情严重度、病原体和过敏史有关。
简介:【摘 要】通过听课、评课活动,是实现高效课堂和促进教师专业发展的重要途径。利用“大数据”技术,借助“ E录播”教学评价系统,通过专家在线点评、他评、自评,反思课堂教学,提高课堂教学质量和效率,提升教师专业水平,是“ E录播”的优势所在。基于“ E录播”教学系统进行课堂评价研究,在国内外还没有成熟的研究成果,我校课题组采取课例研究法、行动研究法、调查法、对比试验法等方法开展课题研究。经过三年的实践探索,取得了丰硕的教研成果。受篇幅所限,本文重点介绍研究过程,主要介绍课例研究法及调查问卷法。
简介:摘要目的本研究探讨急性脑外伤患者心电图相关指标的变化及其与预后的关系。方法前瞻性收集2014年1月至2018年1月就诊的急诊脑外伤患者289例,最终入选219例及与相匹配的对照组220例,入院1 h及住院72 h行心电图,测算P波离散度(Pd)、校正后QT (QTc)、校正后QT离散度(QTcd )、校正后Tp-e间期(Tp-ec )、校正后Tp-e间期离散度(Tp-ecd )及Tp-e/QT比值,分别应用独立样本t检验和配对样本t检验比较脑外伤组第1天和对照组、第1天和第3天上述指标的变化,分析外伤组心电图指标与病情轻重及住院期间不良事件(MACE)的关系。结果脑外伤组患者第3天QTc、Tp-ec和Tp-e/QT较对照组及第1天均增加,差异有统计学意义(P均<0.05);格拉斯哥(GCS)评分中重度脑损伤患者Tp-ec、Tp-e/QT较评分为轻度者增大,差异有统计学意义[(150.48±16.58 )vs(130.14±11.86 ),P=0.006 ;(0.29±0.04)vs (0.23±0.03 ),P=0.030]。住院期间出现MACE组患者Tp-ec、Tp-e/QT较无MACE组增大[(149.76±12.52 )vs(128.84±12.47 ),P <0.001 ;(0.30±0.04 )vs (0.21±0.03),P <0.001]。结论急性脑外伤患者Tp-e和Tp-e/QT与病情严重程度相关,一定条件下可作为短期预后的评价和预测指标。
简介:摘要:在中职院校的教学工作中,“2P5E”教学模式的应用具有非常好的成效。“2P5E”教学模式主要是依据教育生态学理念和PBL教学理念相结合,从而在课堂教学中实现问题设计、问题引发以及创设情趣、探索明理、践行内化、反思评价、拓展延伸的教学模式,从而被称为“
简介:摘要:在现阶段的中职思想政治课教学活动当中,“2P5E”的教学形式有着非常重要的应用意义,对于学生来讲,“2P5E”教学模式改变了以往中职思想政治课的学习形式,促使学生的学习过程变得更加清晰、简洁起来,而教师也能够利用“2P5E”教学模式进一步增强中职思想政治课教学效率。因此,本文针对中职思想政治课“2P5E”教学模式的成效进行分析,结合实际教学情况谈谈关于“2P5E”教学模式在中职思想政治课中的应用效果。
简介:摘要目的研究可视音乐联合5E康复护理模式治疗对精神发育迟滞(mental retardtion,MR)患儿社会适应能力及发育商数(DQ)评分的影响。方法选取本院2018年1—11月MR患儿90例,依据建档时间分为常规组(45例)、实验组(45例),常规组采用常规康复训练治疗,实验组基于常规康复训练予以可视音乐联合5E康复护理模式治疗,统计对比两组患儿社会适应能力、治疗前后DQ评分。结果干预6个月后,实验组患儿适应性(57.15±12.91)分、大运动(39.15±14.92)分、精细动作(48.29±13.63)分、个人-社会评分(49.27±14.57)分,分别高于常规组患儿的(50.89±12.41)分、(31.84±11.10)分、(40.97±11.92)分、(42.95±12.90)分,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组患儿行为记录表(79.46±6.13)分、运动量表(81.75±6.81)分、智力量表(80.69±5.79)分,分别高于常规组患儿的(69.51±5.23)分、(71.42±5.43)分、(70.32±5.51)分,两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论可视音乐联合5E康复护理模式治疗MR患儿,能改善社会适应能力,提高DQ评分。
简介:摘要目的探讨"5E"康复护理模式在冠心病PCI术后患者中的应用效果。方法采用便利抽样法,选取在济宁医学院附属医院心内科接受PCI治疗的患者为研究对象。将2018年11—12月收治的82例患者为对照组,2019年4—5月收治的86例患者为观察组。对照组采用常规护理模式,观察组患者采用"5E"康复护理模式。干预前后采用冠心病自我管理行为量表(CSMS)和中国心血管患者生活质量评定问卷(CQQC)评估两组患者的自我管理行为和生活质量。结果出院后3个月,观察组患者CSMS量表中疾病医学管理维度(45.77±6.39)分、日常生活管理维度(34.28±5.83)分,CQQC问卷(71.23±18.53)分,均高于对照组,差异有统计学意义(t值分别为2.813、3.909、2.301;P<0.05)。结论在PCI术后患者中应用"5E"康复护理模式能够提高患者的自我管理行为和生活质量。