简介：摘要角膜是兼具屈光功能和屏障功能的透明组织。角膜上皮是抵御病原微生物侵袭角膜的第一道屏障。生理状态下，角膜上皮细胞之间相互作用，形成一道具有选择性通透功能的屏障。角膜上皮屏障损伤会破坏上皮完整性，引发一系列眼表疾病，严重可致失明。紧密连接位于角膜上皮细胞间接触面的最顶端，在建立和维持角膜上皮屏障功能中发挥关键作用。既往研究发现角膜上皮紧密连接损伤是许多眼表疾病发生发展的重要一环。了解角膜上皮细胞紧密连接的基本特征及功能，关注破坏紧密连接的危险因素，明确紧密连接在各类眼表疾病发病机制中的关键作用将有助于更好地认识和治疗眼表疾病。

简介：摘要视网膜色素上皮(RPE)是由一层六角形、高度专业化的色素上皮细胞构成的上皮组织。其顶侧与感光器相互作用，基底侧与Bruch膜和脉络膜毛细血管相连接，以维持视网膜光感受器功能。分布在RPE细胞间的多种连接蛋白是RPE执行正常功能的基础，确保RPE的完整性和生理功能。病理状态下，RPE功能发生异常前首先出现连接蛋白异常，导致细胞间、细胞与基底膜间失去附着，随后出现一系列异常生物行为，如RPE细胞游离、迁移、转分化以及蛋白表达变化等，成为触发诸多眼底疾病的重要原因。本文将近年关于RPE连接复合体在正常和疾病状态中的作用进行概述，通过RPE细胞间连接蛋白的组成和相互关联，阐述其在增生性玻璃体视网膜病变、年龄相关性黄斑变性和糖尿病视网膜病变中的作用。

简介：摘要目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在激素性股骨头坏死(ONFH)骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对细胞增殖的作用。方法收集20例激素性股骨头坏死和20例股骨颈骨折患者的股骨骨髓，分离培养BMSCs，培养至第3代用于实验。构建携Cx43的重组慢病毒载体，转染、筛选获得阳性细胞。实验分为A组：激素性股骨头坏死患者BMSCs组；B组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经Cx43重组慢病毒感染组；C组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经空载体感染组；D组：股骨颈骨折患者BMSCs组。检测上述分组中细胞增殖，细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)水平，增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)、Cx43 mRNA的表达水平。两组间比较采用t检验。结果D组细胞增殖能力高于A、B、C组，B组细胞增殖能力高于A、C组；D组线粒体膜电位明显高于A、B、C组(11.07±0.63比4.84±0.42、9.18±0.35、6.09±0.46，t＝70.618、10.761、57.631，P<0.05)。B组线粒体膜电位明显高于A、C组(9.18±0.35比4.84±0.42、6.09±0.46，t＝57.719、46.456，P<0.01)，但仍低于D组；D组ROS水平明显低于A、B、C组(82.71±6.98比258.91±10.87、108.22±5.33、263.54±12.79，t＝－93.457、－8.453、－11.304，P<0.05)。B组的ROS水平明显低于A、C组(108.22±5.33比258.91±10.87、263.54±12.79，t＝－65.134、－9.562，P<0.01)，但仍高于D组；经Cx43重组慢病毒感染后，B组Cx43 mRNA量显著增多，感染效果满意；过表达Cx43能明显促进PCNA、Cyclin D1、Cyclin E1基因转录。结论激素性股骨头坏死BMSCs中Cx43表达明显降低，过表达Cx43能显著地促进BMSCs增殖。

简介：摘要：当前我国的铁道事业发展迅速，在这样的发展形势下，人们更加重视行车安全性，基于这样的要求对于铁道车辆的车体，还有转向架之间的连接装置，应当引起相关人员的重视，所以要对这个部位进行充分研究，充分地了解其特点，以及在车辆运行中的重要性，这样才能有效地确保车辆运行，同时也为相关技术的发展，起到积极的促进作用。

简介：摘要目的探讨血红素加氧酶1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对缺氧/复氧(H/R)诱导的脂肪变肝细胞损伤的作用及其机制。方法将脂肪变大鼠肝细胞(IAR20)按照实验要求分为对照组(Ctrl)、H/R组、H/R+铁死亡抑制剂组(Fer-1)、铁死亡诱导剂组(Erastin)、H/R+BMMSCs(B)组、H/R+HO-1/BMMSCs(HB)组、H/R+HB+小干扰RNA阴性对照组(si-NC)、H/R+HB+敲降GPX4组(si-GPX4)。通过检测不同组别细胞的脂质活性氧(Lipid ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的表达评价铁死亡的严重程度。两组和多组间的数据比较分别采用独立样本t检验和单因素方差分析。结果Fer-1及H/R+B处理组Lipid ROS与MDA的表达量均低于H/R组[(1.65±0.02)、(1.85±0.04)比 (3.50±0.03)，t＝87.600、60.030，P<0.05；(154.50±0.84)%、(228.90±21.49)%比 (676.50±22.36)%，t＝36.380、25.000，P<0.05]；Fer-1及H/R+B处理组GSH水平均高于H/R组[(0.75±0.03)、(0.72±0.04)比 (0.45±0.01)，t＝19.400、17.060，P<0.05]；H/R+HB组的Lipid ROS及MDA水平低于H/R+B组[(1.31±0.03)比 (1.85±0.04)，t＝19.400，P<0.05；(150.10±32.82)%比 (228.90±21.49)%，t＝3.478，P<0.05]，其GSH水平高于H/R+B组[(0.81±0.03)比 (0.72±0.04)，t＝4.981，P<0.05]。si-GPX4组的Lipid ROS与MDA表达量均高于si-NC组[(2.87±0.13)比 (1.36±0.06)，t＝18.100，P<0.05；(323.30±12.58)%比 (184.30±7.09)%，t＝16.670，P<0.05]；si-GPX4组的GPX4与GSH表达量均低于si-NC组[(0.45±0.03)比 (0.92±0.04)，t＝7.692，P<0.05；(0.54±0.07)比 (0.75±0.15)，t＝5.076，P<0.05]。结论HO-1/BMMSCs通过促进GPX4的表达抑制铁死亡以修复受损的脂肪变肝细胞。

简介：摘要：35kV充气柜的绝缘采用SF6气体绝缘，传统的充气柜柜与柜之间的连接采用法兰、密封圈、导体的连接方式，现场安装完成后，需要抽真空，再充SF6气体。本文所分析的是一种特殊的母线连接器，主要组成部分有导电杆、环氧树脂、屏蔽层、半导电层、硅橡胶、密封圈等，通过此母线连接器实现了2个独立35kV充气柜母线可靠连接，解决了35kV绝缘问题，现场无需抽真空、充气，大大缩短现场安装时间，也满足现场环保要求，此母线连接器安装时对现场的安装质量要求较高，本文分析了一个项目35kV充气柜柜间母线连接器电气击穿情况。

简介：摘要目的探讨间变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）中自噬介导的克唑替尼耐药对肿瘤干细胞样细胞亚群的影响。方法本课题组前期通过植入Sox2报告基因已将ALK+ ALCL Karpas299细胞株分为报告基因非反应型（RU）细胞和报告基因反应型（RR）细胞，其中RR细胞具备干细胞特性。通过慢病毒感染技术构建荧光标记的LC3过表达RR和RU细胞（分别为RR-LC3、RU-LC3），蛋白质印迹法及流式细胞术验证感染效率。RU-LC3和RR-LC3细胞使用不同浓度（0、250、500、1 000 nmol/L）克唑替尼处理后，采用双信号流式细胞术检测RED、GEN信号（RED代表下一代远红色荧光蛋白TagFP635 mKate的红色信号B695，GEN代表来自pH敏感的GFP变体pHluorin的绿色信号B530），以RED/GEN表示自噬通量。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测细胞自噬相关基因ULK1、WIPI1、LC3B mRNA表达水平。MTS法检测不同浓度（250、500、1 000 nmol/L）克唑替尼联合氯喹（5、10 μmol/L）对细胞存活的影响。结果成功构建过表达LC3的RR-LC3和RU-LC3细胞。250、500、1 000 nmol/L克唑替尼诱导下，RU-LC3细胞中RED/GEN分别为1.135±0.017、1.453±0.017和1.755±0.021，RR-LC3细胞中分别为1.193±0.018、2.116±0.013和3.307±0.189，RU-LC3细胞和RR-LC3细胞中RED/GEN均呈剂量依赖性增加；相同浓度克唑替尼作用的RR-LC3细胞中RED/GEN均高于RU-LC3细胞，差异均有统计学意义（均P<0.01）；表明RR-LC3细胞较RU-LC3细胞自噬通量变化大。未经克唑替尼处理时，RR细胞中ULK1、WIPI1、LC3B mRNA相对表达量均高于RU细胞（1.69±0.05比1.01±0.02，t=-1.62，P<0.01；1.24±0.04比1.03±0.05，t=-2.11，P<0.01；1.70±0.22比1.02±0.05，t=-1.74，P=0.033）。无氯喹作用时，RR细胞克唑替尼半数抑制浓度（IC50）高于RU细胞（950 nmol/L比709 nmol/L）。氯喹作用后，RU细胞IC50无变化；RR细胞IC50随氯喹浓度增加而降低。结论与RU细胞相比，具有肿瘤干细胞特征的RR细胞自噬反应更快速、强烈，这可能是其对克唑替尼耐药的重要原因之一。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）移植对肾损伤大鼠体内细胞焦亡的影响及其机制。方法体外分离培养4~5周龄清洁级雌性SD大鼠的BMSC，取第3代细胞用于后续实验。采用成组设计，随机将15只6周龄清洁级雌性SD大鼠分为对照组、肾损伤模型组和BMSC组，每组5只。采用经尾静脉注射脂多糖（LPS）1 mg/kg构建肾损伤模型；对照组以相同途径给予等量生理盐水。BMSC组于制模后2 h经尾静脉注射BMSC 0.5 mL（含BMSC 2×106个）；肾损伤模型组和对照组给予等量生理盐水。于术后3 d取各组大鼠腹主动脉血，采用苦味酸法检测血肌酐（SCr）水平，采用二乙酰一肟法检测血尿素氮（BUN）水平，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血胱抑素C（Cys C）和白细胞介素（IL-1β、IL-18）水平。处死大鼠取肾组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测大鼠肾组织NOD样受体蛋白3（NLRP3）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测大鼠肾组织NLRP3、caspase-1的蛋白表达。结果体外培养显示，骨髓细胞悬液培养24 h后出现大量圆形贴壁细胞和悬浮细胞，培养4~5 d后有大量长梭形细胞聚集性贴壁生长，仍可见明显的杂质细胞，经胰酶消化并传代至第3代以长梭形贴壁细胞为主，基本纯化为BMSC。体内实验显示，与对照组比较，肾损伤模型组大鼠SCr、BUN、Cys C、IL-1β、IL-18水平均明显升高〔SCr（μmol/L）：85.22±2.29比21.80±0.59，BUN（mmol/L）：11.50±0.64比5.86±0.83，Cys C（mg/L）：0.13±0.01比0.11±0.02，IL-1β（ng/L）：31.49±1.42比4.74±0.49，IL-18（ng/L）：29.01±1.95比1.52±0.03，均P<0.05〕，NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高〔NLRP3 mRNA（2-ΔΔCt）：3.635±0.296比1.000±0.002，caspase-1 mRNA（2-ΔΔCt）：4.020±0.228比1.001±0.003；NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin）：1.560±0.868比0.902±0.036，caspase-1蛋白（caspase-1/β-actin）：1.392±0.097比0.895±0.046，均P<0.05〕。与肾损伤模型组比较，BMSC组大鼠SCr、BUN、IL-1β、IL-18水平均明显下降〔SCr（μmol/L）：51.64±3.84比85.22±2.29，BUN（mmol/L）：9.90±0.46比11.50±0.64，IL-1β（ng/L）：24.20±1.45比31.49±1.42，IL-18（ng/L）：12.97±1.25比29.01±1.95，均P<0.05〕，NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显下降〔NLRP3 mRNA（2-ΔΔCt）：1.488±0.136比3.635±0.296，caspase-1 mRNA（2-ΔΔCt）：1.643±0.143比4.020±0.228；NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin）：1.227±0.053比1.560±0.868，caspase-1蛋白（caspase-1/β-actin）：1.159±0.107比1.392±0.097，均P<0.05〕。结论在体内，BMSC可以减轻LPS所致肾损伤大鼠的细胞焦亡。

简介：摘要目的观察WNT2B对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向脂肪细胞分化的影响。方法采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组)，以空慢病毒载体作为对照(对照组)，并将hMSCs进行脂肪细胞诱导分化7 d，以实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测脂肪细胞标志基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、脂蛋白脂酶(LPL)和降脂素(Adipsin)的表达，在光镜下计数油红O染色阳性细胞的数目，并对油红O染色强度进行定量检测。计量数据组间比较采用t检验或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成脂肪细胞诱导分化过程中，WNT2B的蛋白表达水平在分化早期即发生改变，实验组hMSCs的PPARγ2(3.85±0.01比0.70±0.10，t＝54.289，P<0.01)、LPL(17.78±1.78比1.29±1.30，t＝12.958，P<0.01)、Adipsin基因表达强度(0.88±0.11比0.38±0.05，t＝7.167，P<0.01)显著低于对照组，实验组hMSCs单位面积形成脂肪细胞的数量显著低于对照组[(30.50±2.07)个比(10.33±1.63)个，t＝50.230，P<0.01]，油红染色定量分析显示实验组吸光度值显著低于对照组(0.77±0.02比0.49±0.02，t＝10.397，P<0.01)，差异均有统计学意义。结论过表达WNT2B可以抑制体外hMSCs向脂肪细胞的分化。

简介：摘要急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由多种原因引起的一种临床急危重症，发展非常迅速，病死率极高。肺泡巨噬细胞M1/M2免疫失衡参与ALI/ARDS的发生发展。间充质干细胞可通过调控巨噬细胞由促炎性M1型向抗炎性M2型极化，抑制下游炎症反应，促进组织修复和再生，达到治疗ALI/ARDS的目的。因此，深入探讨间充质干细胞在治疗ALI中对巨噬细胞极化的调控机制，从而为临床治疗提供新的靶点。

简介：摘要：众所周知，脐带是母亲与婴儿营养传送的介质，脐带间还包含羊膜，而羊膜经过研究发现包含两条脐脉，还有一条脐静脉，通过研究人员研究发现，脐带间含有一种特殊的胚胎结缔组织，将其命名为华尔通氏胶，近年来，为了寻找更多的成人干细胞来源，研究人员将注意力转向了"废弃物"的脐带，通过偶然研究发现，脐带中含有的干细胞是很有医用价值的，自2013年以来，Mitchell等人提出对脐带间华尔通氏胶来源进行大量研究，以及在其基质细胞间发现许多干细胞，并进一步研究干细胞特性，运用于临床诊治，为临床应用提供了新的思路和方向。本文浅谈人脐带间充质干细胞的医学领域的应用以及干细胞应用前景。

简介：摘要目的探索成肌细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞成肌分化的可行性。方法大鼠骨骼肌卫星细胞经体外培养成肌分化，提取成肌细胞外泌体与骨髓间充质干细胞共孵育，诱导其向骨骼肌分化，检测成肌分化以及各生长因子分泌变化。结果通过酶消化分离、差速贴壁提取的肌卫星细胞，Pax7表达阳性，增殖、分化后Myogenin、Desmin及Myosin表达阳性，Desmin流式细胞鉴定阳性率为94. 5%。超速离心法提取到圆形或椭圆形的成肌细胞外泌体，外形呈杯状，磷钨酸负染；WB检测CD9、CD63、CD81及TSG101表达阳性。GFP标记的外泌体可被骨髓间充质干细胞摄取。外泌体与骨髓间充质干细胞共同孵育，3 d后Myogenin表达阳性，6 d后Desmin与Myosin表达阳性。ELASA检测细胞上清胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin like growth factor，IGFⅠ）、肝细胞生长因子（heptocyte growth factor，HGF）及成纤维生长因子（fibroblast growth factor2，FGF2）水平明显升高。结论成肌细胞外泌体在体外能诱导骨髓间充质干细胞向成肌分化，刺激各种生长因子分泌可能是外泌体促进细胞增殖、分化的机制之一。

简介：摘要：线缆组装件是系统之间、单元之间相互联系的纽带，线缆组件的质量是系统可靠、安全工作的基础。在生产过程中往往忽略其连接工艺，本文主要对比论述了我司电连接器常用的焊接和压接两种连接方式的工艺特点及失效模式，为电缆组件设计和生产人员提供一定的实操及理论指导。

简介：摘要：人骨髓间充质干细胞主要是在人体内发挥分化和免疫调节作用。因为血脑血脑屏障的存在，阻碍了药物对颅内肿瘤的治疗，而人骨髓间充质干细胞作用于肿瘤细胞中产生相互作用，结合这一作用机理采用人骨髓间充质干细胞对肿瘤患者进行治疗，使其在肿瘤治疗中发挥有效作用，能够为肿瘤疾病的治疗探索新的路径。本文综述了人骨髓间充质干细胞在肿瘤治疗中的应用方法，希望通过本文总结能够为人骨髓间充质干细胞治疗肿瘤疾病提供更丰富的理论指导和经验借鉴。

简介：摘要：如今美容与健康已成为时流行，怎样才可以既美丽又健康已是每个人关心的问题。而如何能既健康又美容呢？这就得从日常的肌肤护理中做起，不论是选购化妆品还是使用化妆品时都应该特别注意，除了使用美容用品来保持肌肤健康美丽外还应注意饮食健康。本文就从选购、使用、饮食三个方面来告诉您如何保养肌肤，让您美丽与健康兼得。

简介：摘要目的探究单侧皮质下脑卒中半球间同位脑区经胼胝体结构连接变化与临床运动功能障碍的关系。材料与方法招募34例单侧皮质下脑卒中患者和43例健康人并采集磁共振弥散张量成像数据。利用高分辨经胼胝体纤维束模板(trancallosal tract template，TCATT)计算并比较卒中组与健康对照组通往半球间同位脑区(包括感觉运动区、前额叶、顶叶、颞叶和枕叶)的32条经胼胝体神经纤维束的各向异性分数(fractional anisotropy，FA)的差异，进一步与皮质脊髓束(corticospinal tract，CST)的FA比率(FA ratio，rFA)和上肢运动功能评分(fugl-meyer assessment of upper extremity，FM-UE)进行相关性分析。结果与健康对照组相比，卒中组半球间同位脑区的32条经胼胝体神经纤维束在中矢状面区域的FA值均降低，其中差异有统计学意义的有29条(不包括直回、中央旁小叶和内侧眶回的同位脑区经胼胝体纤维束)。这29条经胼胝体神经纤维束在中矢状面区域的FA值与rFA (CST)、FM-UE均存在显著正相关(P＜0.05)。卒中组rFA (CST)与FM-UE评分亦呈显著正相关(r=0.596，P=0.0004)。结论本研究证实皮质下脑卒中的胼胝体微结构受损与病灶同侧CST损伤密切相关。继发性跨半球结构连接损伤对皮质下脑卒中运动功能障碍具有同样重要的影响。

简介：摘 要：电路板间电连接分领域下的CPC分类体系对该技术领域进行了进一步的新增和细分，覆盖范围更全面，文献分布更加合理，为高效检索提供了便利条件。本文对电路板间电连接分领域下的CPC与IPC分类号进行了梳理和对比，并结合具体案例探索CPC分类号在该领域的应用，体现了CPC分类准确且利于检索的特点。

简介：摘要目的研究槲皮素对人牙龈间充质干细胞（GMSCs）的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、表面标志物表达和成骨分化能力的影响。方法以不使用槲皮素处理GMSCs为对照组，CCK-8法检测2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素对GMSCs细胞增殖的影响。10 μmol/L、20 μmol/L槲皮素处理GMSCs细胞96 h后，流式细胞术检测细胞凋亡及表面标志物的表达，免疫印迹法检测GMSCs细胞Cleaved PARP、p-BCL-2、Bax和Cleaved Caspase 3蛋白表达。10 μmol/L槲皮素处理4周后，茜素红染色检测槲皮素对GMSCs成骨分化能力的影响。结果与对照组相比，不同浓度的槲皮素干预GMSCs后细胞存活率明显下降；2.5、5、10、20 μmol/L槲皮素处理96 h后GMSCs的存活率分别为78.93%、66.81%、56.35%、39.22%（P<0.05）。不同浓度槲皮素处理96 h后流式细胞术检测显示GMSCs的早期凋亡和晚期凋亡细胞数量均明显增加，对照组、10 μmol/L槲皮素组、20 μmol/L槲皮素组的细胞凋亡率分别为8.30%、17.88%、20.77%（P<0.05）；免疫印迹法检测显示，与对照组比较，10 μmol/L槲皮素组和20 μmol/L槲皮素组GMSCs的促凋亡蛋白Cleaved PARP、Bax和Cleaved Caspase 3表达增加，抑制凋亡蛋白p-BCL-2表达减少（均P<0.05）；流式细胞术检测显示，与对照组相比，10 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD90阳性率从88.4%降低至15.3%；20 μmol/L槲皮素干预GMSCs后CD45阳性率从3.18%上升至9.77%，CD34阳性率从1.08%上升至5.70%（均P<0.05）。茜素红染色显示，10 μmol/L槲皮素组处理4周后GMSCs未见矿化结节形成。结论槲皮素能显著抑制GMSCs细胞功能，提示在进行GMSCs培养或者治疗时应避免槲皮素等黄酮类物质的干扰作用。

简介：摘要目的探讨间变性淋巴瘤激酶（ALK）易位性肾细胞癌的临床病理学、分子遗传学、鉴别诊断及预后。方法回顾性分析解放军东部战区总医院2011年1月至2020年12月收集的2例ALK易位性肾细胞癌的组织形态学特征、免疫组织化学表达以及相关预后信息，采用荧光原位杂交（FISH）技术、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、高通量靶向测序等多项分子检测分析其分子病理特征。结果男女各1例，年龄分别为59岁和57岁。形态学上，例1类似于肾集合管癌或髓质癌，呈小管状、微囊网状结构，具有显著的黏液背景及淋巴细胞浸润；例2则类似于Xp11.2易位性肾细胞癌或Ⅱ型乳头状肾细胞癌，呈管状乳头状、局部实性结构，肿瘤细胞胞质呈絮状，间质内见多量泡沫样组织细胞，未见黏液背景及淋巴细胞浸润。免疫表型方面，2例均强阳性表达ALK蛋白，此外细胞角蛋白7、E-cadherin、波形蛋白、PAX8和CD10呈现不同程度的表达，其余标志物均为阴性。多种分子检测技术均明确显示ALK基因易位，例1为罕见的VCL-ALK融合基因，融合位点为VCL基因的第16号外显子和ALK基因的第20号外显子；例2为EML4-ALK融合基因，融合位点为EML4基因的第2号外显子和ALK基因的第20号外显子。结论ALK易位性肾细胞癌较为罕见，形态多样，容易漏诊和误诊。特征性的ALK蛋白表达和分子检测ALK基因重排有助于该类型肾癌的确诊。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞条件培养基(UCMSC-CM)对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其机制。方法体外培养肝癌细胞系HepG2和BEL-7402，常规培养肝癌细胞系作为对照组，UCMSC-CM处理的肝癌细胞系作为UCMSC-CM组。采用细胞增殖与毒性检测(CCK-8)法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；划痕试验和Transwell侵袭试验分别检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测细胞中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、p-GSK-3β、Bak、Bax、兔抗人大分子B淋巴细胞瘤蛋白(BCL-XL)、髓细胞白血病-1蛋白(MCL-1)、存活素蛋白表达；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中上皮间质转化(EMT)相关标志物mRNA的表达水平。结果CCK-8法检测结果显示，UCMSC-CM处理HepG2细胞和BEL-7402肝癌细胞24、48、72 h后的光密度值与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；流式细胞术检测结果显示，UCMSC-CM组与对照组处理HepG2、BEL-7402细胞早期(Q4)、晚期(Q2)凋亡率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。UCMSC-CM处理组处理HepG2细胞24、48 h后划痕愈合面积百分率[(53.00±2.45)%、(87.33±1.25)%]均高于对照组[(21.00±2.45)%、(43.67±4.64)%]，差异有统计学意义(P<0.05)；UCMSC-CM处理组处理BEL-7402细胞48 h后划痕愈合面积百分率[(65.33±11.26)%]高于对照组[(36.67±8.81)%]，差异有统计学意义(P<0.05)。侵袭试验结果显示，UCMSC-CM处理HepG2细胞24 h后，UCMSC-CM组侵袭细胞数[(630.00±62.33)个]高于对照组[(386.00±42.53)个]，差异有统计学意义(P<0.05)；UCMSC-CM处理BEL-7402细胞24 h后，UCMSC-CM组侵袭细胞数[(228.00±17.91)个]低于对照组[(491.00±10.34)个]，差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示，对照组与UCMSC-CM组肝癌细胞凋亡相关信号分子GSK-3β、p-GSK-3β、Bak、Bax、BCL-XL、MCL-1及存活素蛋白表达比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示，UCMSC-CM处理的HepG2、BEL-7402细胞E-钙黏蛋白的mRNA表达水平[(0.18±0.06)、(0.48±0.25)]较对照组[(1.33±0.06)、(1.01±0.12)]均明显下调(P<0.05)。BEL-7402细胞中snail的mRNA表达水平(3.37±0.41)较对照组(1.01±0.18)明显上调(P<0.05)，而HepG2细胞中N-钙黏蛋白、snail和波形蛋白的mRNA表达水平均无明显变化(P>0.05)。结论UCMSC-CM可能通过EMT过程促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力。