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  • 简介:背景:研究表明,移植的胚胎体细胞在受体内大量增殖及长期存活困难,与转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)介导的星状细胞联合移植有望解决这一科学难题。目的:观察TGF-β1介导的小鼠星状细胞与小鼠胚胎体细胞联合移植对急性损伤的治疗作用。方法:①建立慢病毒介导的稳定过表达TGF-β1基因的小鼠星状细胞株,通过细胞免疫荧光、qRT-PCR、westernblotting法检测星状细胞转染目的基因情况;②体外培养小鼠胚胎体细胞株mHPCs-E14.5并以细胞免疫荧光染色法鉴定;③通过CCl4腹腔注射联合2/3切除构建急性损伤小鼠模型,然后进行mHPCs-E14.5单独移植(mHPCs-E14.5移植组),mHPCs-E14.5与mHSCs-pHBLV-CMVIE-TGF-β1联合移植(过表达TGF-β1联合移植组),mHPCs-E14.5与mHSCs-pHBLV-CMVIE-GFP联合移植(对照联合移植组);④在切除后14d,共聚焦免疫荧光检测各组小鼠脾实质内ALB、CK19、a-SMA阳性表达,全自动生化分析仪检测小鼠血清谷丙转移酶、谷草转移酶活性。结果与结论:①成功建立稳定过表达TGF-β1基因的小鼠星状细胞株,与空载对照组相比,慢病毒mHSCs-pHBLV-CMVIE-TGF-β1组目的基因TGF-β1、α-SMA表达明显增高(P<0.01);②mHPCs-E14.5细胞株大量表达AFP,微弱表达ALB和CK19,提示该细胞株为胚胎体细胞;③mHPCs-E14.5移植组脾实质内存在少量CK19阳性细胞和ALB阳性细胞;对照联合移植组脾实质内存在少量CK19阳性细胞、α-SMA阳性细胞及较多的ALB阳性细胞,而过表达TGF-β1联合移植组存在大量CK19阳性细胞、α-SMA阳性细胞,少量ALB阳性细胞;④细胞移植后血清谷丙转移酶及谷草转移酶有所下降,过表达TGF-β1联合移植组下降更明显(P<0.05);⑤结果提示,移植的胚胎体细胞在脾实质内定植并分化为肝细胞和胆管细胞,TGF-β1信号介导的

  • 标签: 肝星状细胞 转化生长因子Β1 胚胎肝前体细胞 急性肝损伤 联合细胞移植 脾脏
  • 简介:目的探讨胚胎细胞(embryonicstemcell,ESC)来源的神经体细胞(Neuralprecursorcell)移植治疗帕金森病的可能性。方法将胚胎细胞诱导分化到神经体细胞阶段后移植到大鼠帕金森病模型纹状体中,并设生理盐水组做对照研究,观察两组移植后行为学改变及检查纹状体内DA、DOPAC的含量。结果移植组在2~4周后与对照组相比行为学上有明显改善(P〈0.01),纹状体内DA、DOPAC的含量显著提高(P〈0.01)。结论胚胎细胞经诱导分化成神经体细胞可用于帕金森病的修复治疗,胚胎细胞是良好的干细胞移植治疗用细胞来源。

  • 标签: 胚胎干细胞 神经前体细胞 移植治疗 帕金森病
  • 简介:啮齿类切牙一生不断生长,这就需要相关干细胞不断形成成釉细胞和成牙本质细胞。其中,上皮干细胞形成成釉细胞已经研究得比较透彻,但切牙干细胞形成成牙本质细胞方面研究得还不够。本研究目的是要观察已萌、未萌切牙牙髓细胞形成成牙本质细胞的潜能。结果显示,

  • 标签: 切牙 前体细胞 牙髓 成牙本质细胞 小鼠 细胞形成
  • 简介:目的对新生大鼠耳蜗体细胞进行分离、培养和鉴定。方法从出生7天的大鼠耳蜗中分离、培养体细胞,用免疫细胞化学的方法对体细胞进行鉴定;血清诱导分化后鉴定分化潜能,进一步了解其多向分化特性。结果原代培养的细胞,培养1d后即可见“细胞球”。细胞球内大部分细胞呈nestin、musashil、pax2和BrdU阳性,表明其具有自我更新及有丝分裂的能力。细胞球经诱导分化14d后,对分化细胞行免疫细胞化学鉴定,发现分化细胞表达毛细胞标志物myosinVIIA和phalloidin,表达成熟神经元标志物NeuN,表达不成熟神经元标志物Tujl,表达星形胶质细胞标志物GFAP,表达少突胶质细胞标志物galactocerebroside,以及谷氨酸能神经元标志物GluR-1,证明其具有多向分化潜能。结论本实验证明耳蜗体细胞具有神经干细胞的多向分化潜能,为研究通过基因治疗的方法促进耳蜗神经细胞增殖提供了一种体外模型。

  • 标签: 耳蜗前体细胞 增殖 分化
  • 简介:论述了内源激素、培养基、外源激素、外植体类型、温度、光照等内外因素对植物体细胞胚胎发生的影响,并展望了植物体细胞胚胎发生的研究前景。

  • 标签: 植物 体细胞胚胎 影响因素 研究进展
  • 简介:本文从人胚胎脑海马区分离、培养、鉴定了神经体细胞(neuralprecursorcells,NPCs),并初步观察了大鼠纹状体海人藻酸(kainicacid,KA)损伤后,人神经体细胞(HNPCs)移植到成年大鼠侧脑室和纹状体后存活和迁移的情况。取胎龄8-12w的人胚胎脑海马区细胞,用含人表皮生长因子(humanepidermalgrowthfactor,h-EGF)

  • 标签: 神经前体细胞 细胞培养 移植 免疫细胞化学 大鼠
  • 简介:《西游记》中的孙悟空法力无边,只需要拔些毫毛轻轻一吹,就能立刻变出千百个分身。如今,类似的场景有望在现实中呈现。中国科学院神经科学研究所孙强团队的研究员于2018年1月24日下午在北京宣布,团队经过5年的不懈努力,突破了体细胞克隆猴的世界难题.

  • 标签: 体细胞克隆 《西游记》 科学研究所 中国科学院 孙悟空 研究员
  • 简介:摘要目的研究兔骨髓中的成骨体细胞凝集单位——成骨性骨髓细胞球在体外的矿化过程。方法新西兰大耳白兔股骨中获得骨髓,骨钙素抗体分离出成骨体细胞,扩增传代后加入含有谷氨酰胺和转化生长因子-β1的无血清培养基,生成大量的成骨性骨髓细胞球,组织化学方法、扫描、透射电镜观察结果,能量色散谱电子探针(EDS)分析元素。结果成骨性骨髓细胞球碱性磷酸酶(ALP)及茜素红染色均呈强阳性反应;扫描电镜见细胞球状体中的体细胞呈三维球状生长,多突起,细胞之间空隙较大,且周围有基质成分分泌,骨髓细胞球周围的贴壁细胞均完全铺展,明显可见其内部的微管结构;透射电镜见细胞中基质小泡丰富;电子探针见钙磷元素在成骨性骨髓细胞球内部高度浓集。结论成骨体细胞依赖高密度细胞的三维立体方式生长才能发挥功能,使得成骨性骨髓细胞球在体外快速发生矿化。

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  • 简介:目的分离、培养成年食蟹猴脑室下区神经体细胞并研究其生物学特性。方法取成年食蟹猴脑室下区组织,经木瓜蛋白酶和脱氧核糖核酸酶消化后,接种于DMEM-F12无血清培养基中。结果神经体细胞可以增殖形成神经球,经免疫细胞化学方法检验这些细胞呈现巢蛋白nestin阳性.神经球分化后的细胞表达胶质细胞的标记物及神经元的标记物。脑室下区来源的神经球进行自主分化时可分化成神经元和胶质细胞,但分化成神经元的比例都很少。结论从食蟹猴脑室下区分离培养的细胞可以在体外增殖形成神经球.并可分化为神经元和胶质细胞,符合神经体细胞的生物学性状。

  • 标签: 脑室下区 神经前体细胞 自主分化 食蟹猴 神经球
  • 简介:目的观察BMSCs对胚胎腹侧中脑体细胞(VMP)体外扩增和定向分化的影响,并分析其可能的营养机制.方法分别取胎龄11d大鼠胚胎VMP、成年大鼠BMSCs进行体外培养,并建立二者的共培养体系.体外扩增7d的VMP分为对照组、BMSCs分化液组、BMSCs+VMP共培养分化液组,分别加入普通分化液、BMSCs分化液、BMSCs+VMP共培养分化液进行诱导分化.观察细胞生长情况.分化期末行免疫荧光染色,分析比较3组细胞中酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞占总细胞数的比例.结果诱导分化7d后,对照组、BMSCs分化液组和BMSCs+VMP共培养分化液组中细胞数分别较培养扩增(44.13±4.75)倍、(60.63±5.25)倍、(64.00±7.63)倍,TH阳性细胞比例分别为(18.76±5.20)%、(23.49±4.10)%、(28.08±5.42)%,比较差异有统计学意义(P〈0.05).结论BMSCs能够通过分泌营养因子有效促进VMP增殖并定向分化为多巴胺能神经元.

  • 标签: 间质干细胞 细胞分化 中脑前体细胞 细胞增殖
  • 简介:摘要目的综述大鼠微粒体中细胞色素CYP450活性研究方法。方法查阅国内外文献,对微粒体CYP450进行介绍,并总结和归纳中药在CYP450酶活性研究方法的应用。结果CYP450研究方法主要包括体外实验CO吹泡法,化学显色法,体外温孵和体内cocktail探针实验。该方法的应用从中药单体成分逐渐发展到中药提取物、中药复方。结论随着科研水平的提高,体外方法对CYP450研究越来越深入,合体内cocktail探针法,提高药物体内代谢清除预测的准确性。

  • 标签: 中药 P450 肝微粒体 温孵 cocktail探针
  • 简介:目的研究成年大鼠内源性神经体细胞在局灶性脑缺血后不同时间窗的增殖分化情况.方法用Longa线栓法制作大鼠脑缺血模型,用免疫组化的方法检测大鼠内源性神经体细胞最佳增殖时间及最大增殖效果.结果脑缺血半球室管膜下区、嗅球和头端迁徙渠道(rostralmigratorystream,RMS)Brdu阳性细胞数在脑缺血后1d明显增多,3~7d达高峰,14d后开始下降;Brdu阳性细胞数在脑缺血半球室管膜下区和嗅球成正相关;脑缺血侧海马齿状回未见Brdu阳性细胞数明显增多;Brdu阳性细胞在脑缺血后第3周数量最大,从第4周开始下降.结论成年大鼠局灶性脑缺血后3~7d内源性神经体细胞增殖达高峰,在该期进行外源性细胞移植治疗可能更有效.

  • 标签: 大鼠 局灶性脑缺血 神经前体细胞 细胞增殖 细胞移植 脑组织再生
  • 简介:目的从正常成人脑海马分离鉴定多潜能神经体细胞并探讨体外培养条件.方法材料取自8例非神经系统疾病的死亡者.分离正常成人脑海马细胞,在培养基中添加生长因子体外培养.通过细胞培养成球和BrdU染色鉴定培养细胞的增殖能力.利用免疫细胞化学三标染色来鉴定分化神经细胞的表型.结果从正常人海马分离的细胞培养2周时,开始增殖成簇,致一个月时,形成细胞球,这些细胞能与BrdU结合,并能在体外分化成神经系统不同谱系的细胞.结论与在啮齿类动物和猴的研究中结果一致,从正常成人脑海马区分离的细胞是多潜能神经体细胞.

  • 标签: 正常人脑 海马 多潜能神经前体细胞 体外培养
  • 简介:摘要垂体细胞瘤是一种罕见的发生于鞍内或鞍上的实质性肿瘤,世界卫生组织(WHO)肿瘤分级为Ⅰ级。临床表现和影像学表现与垂体腺瘤十分相似,确诊主要依赖于术后病理学诊断,治疗方法以手术为主。本文对垂体细胞瘤的诊疗现状进行综述。

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  • 简介:摘要垂体细胞瘤是一种罕见的发生于鞍内或鞍上的实质性肿瘤,世界卫生组织(WHO)肿瘤分级为Ⅰ级。临床表现和影像学表现与垂体腺瘤十分相似,确诊主要依赖于术后病理学诊断,治疗方法以手术为主。本文对垂体细胞瘤的诊疗现状进行综述。

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  • 简介:牛奶体细胞数,是指每毫升牛奶中所含的体细胞的数量。简称SCC,其主要成份是白血细胞,占99%。国际乳业通识,SCC越低,生鲜乳质量越高;SCC越高,对生鲜乳的质量影响越大。因此被各国专家认为是生鲜乳质量标准中最重要的指标之一。牛奶体细胞数是乳房健康的指示性指标.反映乳房的健康与奶牛的产奶能力、牛奶质量的好坏有关,也反映一个牧场的总体管理水平。牛奶中体细胞数增加会使产奶量减少,还会影响牛奶的质量,使牛奶产生酸败气味,并且减少奶制品存储时间。在奶牛的养殖中控制、降低体细胞数具有重要意义。现就影响牛奶体细胞数的因素介绍如下:

  • 标签: 牛奶质量 体细胞数 乳房健康 指示性指标 SCC 乳质量
  • 简介:猪附红体细胞病作为近年来最新流行的猪病之一,已严重危害养猪业发展和畜产品安全。腾冲市固东镇自2003年以来常有该病发生,肉食品检疫中也曾先后多次检出感染该病的病猪肉,给当地养猪业造成较大危害。本文以45例病畜的治疗为例,介绍了猪附红体细胞病的治疗原理、治疗方法。

  • 标签: 附红体细胞病 诊治
  • 简介:在哺乳动物体细胞核移植中,供体细胞是影响其效率的主要因素之一.供体细胞的类型、细胞周期、细胞的培养代数、冷藏与冷冻处理,以及供体动物的性别、年龄等都可能影响核移植胚胎的发育.根据现有资料,简要综述了在哺乳动物体细胞核移植中有关供体细胞的研究进展.

  • 标签: 体细胞核移植 供体细胞 细胞类型 细胞周期
  • 简介:1教材分析“胚胎分割及胚胎细胞”是普通高中课程标准实验教科书人教版生物选修三“现代生物科技专题”中的内容。该内容属于专题三胚胎工程中第三节“胚胎工程的应用及前景”的第二课时。选修模块是为了满足学生多样化的需要而设计的,它有助于拓展学生的生物科技视野,增进学生对生物科技与社会关系的理解,提高学生的实践和探究能力。但鉴于教学内容的现代性与我校实验设备条件之间的矛盾,因此发展探究能力将比较多地集中在学习资料的收集分析、撰写专题综述、口头交流、讨论或辩论等方面,并辅以适量可行的调查或实验活动。

  • 标签: 胚胎干细胞 教学设计 分割 实验教科书 生物科技 专题综述