简介:建立免疫磁珠分离(ImmunomagneticSeparation,简称“IMS”)联合荧光定量聚合酶链式反应PCR(PolymeraseChainReaction,简称“PCR”)快速检测阪崎肠杆菌的方法。制备以生物素介导偶联的链霉亲和素免疫磁珠,优化偶联和捕获条件。合成阪崎肠杆菌ITS(InternalTranscribedSpacer简称“ITS”)靶基因序列的引物和探针,同时构建内参质粒(InternalAmplificationControl,简称“IAC”),建立能够实时监控反应过程的荧光定量PCR反应体系。在1mL体系中添加粒径为80nm的链霉亲和素免疫磁珠0.3mg,孵育30min,可获得80.5%以上的捕获效率。建立的基于内参的荧光PCR体系针对质粒检测时,Ct值(Cyclethreshold,简称“Ct值”)与模板拷贝数有着良好的线性关系(R2=0.998),IMS-PCR检测体系对阪崎肠杆菌菌液的检测灵敏度为33.3CFU/mL,可在3h内完成。针对4株阪崎肠杆菌标准菌株和5株非阪崎肠杆菌菌株的检测也显示出较好的特异性和稳定性,人工模拟样品的检测结果与采用国标法检测的结果完全一致,可用于快速检测样品中的阪崎肠杆菌和疾病预防。
简介:三舅不识字,这不怪别人,也不是外界的因素,是他自己太顽劣,不肯去上学。终于在一家人的威逼利诱下,勉强背着书包走进了学校。可是,你怎么也想不到,大家还处在把三舅这个调皮王送去读书的兴奋中时,老师竟拎着三舅的书包来家了,后面跟着蹦蹦跳跳,向大家做鬼脸的三舅。老师一脸忧心,先开口了:'你家这孩子,真没见过这样的,一翻开书本,看到那字,就说肚子疼,还满地打滚。'姥姥不相信,老师只好拿出书给三舅看,果是如此,正嬉皮笑脸的三舅突然就捂着肚子躺倒在地上。我妈和大舅都说装的,可姥姥看看三舅脑门上豆大的汗珠,一下子心疼坏了。三舅是姥姥中年以后得的孩子,虽说早已有儿有女,却宝贝得不行。姥姥当下就命令:'以后谁也别逼小三子了,随他吧。'