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48 个结果
  • 简介:目的:构建带Myc标签的LC3B—PLA2基因的真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B的切割作用。方法:以本实验室保存的乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建的重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白的表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染的方法检测Atg4B对LC3B的切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用的研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用的研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中的作用奠定了基础。

  • 标签: LC3B-PLA2 Atg4B 自噬 重组质粒
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  • 简介:Uponencounteringtheantigen(Ag),theimmunesystemcaneitherdevelopaspecificimmuneresponseofenteraspecificstateofunresponsiveness,tolerance.TheresponseofBcellstotheirspecificAgcanbeactivationandproliferation,leadingtotheimmuneresponse,oranergyandactivation-inducedcelldeath(AICD),leadingtotolerance.AICDinBlymphocytesisahighlyregulatedeventinitiatedbycrosslinkingoftheBcellreceptor(BCR).BCRengagementinitiatesseveralsignalingeventssuchasactivationofPLCγ,Ras,andPI3K,whichgenerallyspeaking,leadtosurvival.However,intheabsenceofsurvivalsignals(CD40orIL-4Rengagement),BCRcrosslinkingcanalsopromoteapoptoticsignaltransductionpathwayssuchasactivationofeffectorcaspases,expressionofpro-apoptoticgenes,andinhibitionofpro-survivalgenes.ThecomplexinterplaybetweensurvivalanddeathsignalsdeterminestheBcellfateand,consequently,theimmuneresponse.

  • 标签: B淋巴细胞 B细胞受体 AICD 激活诱发细胞死亡 mIgM 细胞生长停滞
  • 简介:ApoptosisproducedinBcellsthroughFas(APO-1,CD95)triggeringisregulatedbysignalsderivedfromothersurfacereceptors:CD40engagementproducesupregulationofFasexpressionandmarkedsusceptibilitytoFas-inducedcelldeath,whereasantigenreceptorengagement,orIL-4Rengagement,inhibitsFaskillingandinsodoinginducesastateofFas-resistance,eveninotherwisesensitive,CD40-stimulatedtargets.SurfaceimmunoglobulinandIL-4RutilizeatleastpartiallydistinctpathwaystoproduceFas-resistancethatdifferentiallydependonPKCandSTAT6,respectively.Further,surfaceimmunoglobulinsignalingforinducibleFas-resistancebypassesBtk,requiresNF-κB,andentailsnewmacromolecularsynthesis.TerminaleffectorsofBcellFas-resistanceincludetheknownanti-apoptoticgeneproducts,Bcl-XLandFLIP,andanovelanti-apoptoticgenethatencodesFAIM(FasApoptosisInhibitoryMolecule).faimwasidentifiedbydifferentialdisplayandexistsintwoalternativelysplicedforms;faim-Sisbroadlyexpressed,butfaim-Lexpressionistissue-specific.TheFAIMsequenceishighlyevolutionarilyconserved,suggestinganimportantroleforthismoleculethroughoutphylogeny.InducibleresistancetoFaskillingishypothesizedtoprotectforeignantigen-specificBcellsduringpotentiallyhazardousinteractionswithFasL-bearingTcells,whereasautoreactiveBcellsfailtobecomeFas-resistantandaredeletedviaFas-dependentcytotoxicity.InadvertentoraberrantacquisitionofFas-resistancemaypermitautoreactiveBcellstoescapeFasdeletion,andmalignantlymphocytestoimpedeanti-tumorimmunity.

  • 标签: B淋巴细胞 FAS介导 细胞凋亡 FAIM FLIP CD40
  • 简介:<正>ThesusceptibilityofprimaryBcellstoFas(APO-1,CD95)-mediatedapoptosisisregulatedbysignalsderivedfromadditionalsurfacereceptors.CD40engagementproducesupregulationofFasexpressionandinducesmarkedsensitivitytoFas-inducedcelldeath,whereasBcellantigenreceptor(BCR)engagementinhibitsFaskillingandtherebyproducesFas-resistance,eveninotherwisesusceptible,CD40-stimulatedtargets.BCRsignalingforinducibleFas-resistancedevelopsoveraperiodof12hoursanddependson

  • 标签: 初级B淋巴细胞 Fas介导细胞凋亡 耐受性 信号转导
  • 简介:利用基因工程表达的志贺毒素B亚基纯化产物研究志贺毒素的分子组装机理。首先对StxB进行了分离纯化,并将蛋白质纯品溶解在磷酸缓冲液中。利用蛋白质交联的方法证实,在磷酸缓冲液体系中StxB可以自发聚合为不同的分子结构形式(单体至五聚体),并可以与游离和细胞膜表面的受体结合,对志贺毒素全毒素的细胞毒性有竞争抑制作用。结果表明,在没有A亚基存在的情况下,单独的StxB也可以自发组装为多聚体,说明StxB具有自身组装的能力。

  • 标签: 志贺毒素 B亚基 分子组装
  • 简介:被象染色体冷凝作用,面向双性人的锭子形成,染色体大会离子,分离和胞质分裂那样的一系列紧安排的事件精确通过有丝分裂调整。染色体运动被和位于着丝点以内的一个专业化染色体领域的锭子微导管的相互作用在有丝分裂期间管理。这个专业化区域,叫了kinetochore,是为锭子微导管着丝点的地点协会。除了用作在染色体和锭子微导管之间的一个物理连接,kinetochore通过微导管马达和定位在或在它附近的锭子集会检查点(囊)传感器在chromosomal分离展出一个活跃角色[例如,1]。

  • 标签: 细胞周期蛋白B1 交响乐 管弦乐队 有丝分裂 导体
  • 简介:通过对树舌多糖进行荧光标记,解决多糖本身缺少易于检测发光基团的难题,为进一步研究多糖的生物学活性提供一种新型可靠的辅助手段。利用树舌多糖还原性末端与罗丹明B活泼的氨基发生反应,形成树舌多糖-罗丹明B复合物,再经流水透析和分子筛进一步纯化得到罗丹明B标记的树舌多糖。对树舌多糖与罗丹明B的反应时间、反应温度和pH进行了单因素考察。试验结果证明:罗丹明B可以有效的标记树舌多糖,在反应时间24h、pH5、温度25℃的条件下标记效果最好。在单因素试验的基础上对罗丹明B标记树舌多糖的条件进行响应面优化,最终得到罗丹明B标记树舌多糖的最优条件为:反应时间23.10h、温度25.83℃、pH5.23,预测标记后样品在552nm波长处的最大OD值为0.135。

  • 标签: 树舌多糖 罗丹明B 荧光标记
  • 简介:目的克隆和测定剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体细胞色素b基因(cytb)的全序列。方法提取剑尾鱼肝脏的总DNA。设计合成特异引物进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖电泳检测,纯化后克隆到pGEM-Teasyvectorsystem中的T载体上,筛选转化子,提取质粒,酶切鉴定。挑取重组质粒pGEM-T-xhcytb11进行序列测定。结果获得了剑尾鱼线粒体cytb基因的全序列,共1140bp。结论用BLAST与GenBank中的线粒体DNA序列进行比较,显示剑尾鱼与其他鱼类的cytb基因具有较高的同源性,根据剑尾鱼与其他13种鱼的cytb基因序列同源性所建立的是进化树,与传统的分类地位基本吻合。

  • 标签: 剑尾鱼 线粒体 细胞色素B基因 序列分析
  • 简介:用纯化的CTB后腿肌肉注射免疫小鼠,每次12.5μg,每隔14天加强一次,共注射三次,末次免疫后两周收集血清,免疫小鼠诱导产生了特异性抗CTB抗体。在CHO细胞中,免疫小鼠血清能够中和CT的细胞病变效应;小鼠肠结扎实验表明,抗CTB血清能够抑制CT结合细胞表面受体GM1神经节苷脂。这表明转基因烟草产CTB在小鼠中能够产生抗细菌毒素的保护免疫力。

  • 标签: 霍乱毒素B亚单位 小鼠 疫苗 免疫
  • 简介:类Bscavenger受体(SR-Bs)是在vivo涉及各种各样的生理的进程的房间表面glycoproteins,包括xenobiotics的类脂化合物,绑定和吞噬作用的运输和新陈代谢,并且发信号。但是很少信息都不关于蚕SR-Bs是可得到的;为揭示他们的功能学习这些SR-Bs是必要的。在这研究,我们克隆BmSCRBQ4的全身的编码顺序,从蚕BombyxmoriL的SR-B基因。我们发现BmSCRBQ4基因由九exons和八introns组成,与编码456氨基酸的1371bp的一个开的读物框架。基因表示研究决定BmSCRBQ4送信人RNA(mRNA)在未受精的鸡蛋被表示,在胚胎的开发期间并且在整个幼虫的时期的多数。mRNA的表示在中间的内脏,中间的丝绸腺,以后的丝绸腺,头,integumentum,胖身体,睾丸和幼虫的B的卵巢被检测。moriDazao紧张,以及在蚕,房间衬里BmN和BmE。蛋白质表示研究发现BmSCRBQ4蛋白质仅仅在睾丸,胖身体和幼虫的中间的丝绸腺,以及在蚕房间行BmN和BmE被表示。BmSCRBQ4蛋白质在不同纸巾和房间在banding模式看了可变性什么时候由西方的弄污分析了。染色的Immunohistochemical证明BmSCRBQ4蛋白质本地化到组成的膜或这些纸巾的细胞的膜。这些结果显示那BmSCRBQ4基因可以在每纸巾在房间表面起一些生理地相关的作用。

  • 标签: 家蚕细胞 清道夫受体 组织定位 表达模式 B类 免疫组织化学染色
  • 简介:活性氧(ROS)是生物体有氧代谢过程中产生的一类活性含氧化合物的总称,机体细胞可通过多种途径维持ROS产生与降解的动态平衡。研究表明,活性氧可作为第二信使调节与细胞增殖、分化、凋亡相关的信号转导通路。c-JunN端激酶(JNK)通路可以介导氧化应激、细胞因子、紫外照射等引起的细胞凋亡。另外,κ基因结合核因子(NF-κB)是氧化应激调节的靶因子之一,同样也能诱导促进细胞内的氧化应激反应,还可通过活性氧蓄积抑制JNK的激活。简要综述活性氧对NF-κB和JNK信号通路的调节。

  • 标签: 活性氧 κ基因结合核因子 c-JunN端激酶 信号通路
  • 简介:Bemisiatabaci在20052008期间从B遗传因子型的优势在中国出人意料地变了到Q遗传因子型。这观察在调查环境因素,包括的主人,温度和相对湿度(RH)是否能可能在遗传因子型分发解释观察移动刺激了兴趣。结果显示所有三个参数检验了影响遗传因子型survivability。当与Q遗传因子型在辣椒植物上一起高耸了时,B遗传因子型的百分比在第一和第二代在创始人人口从66.7%显著地减少了,到13.6%和3.7%分别地。什么时候B(在66.7%点的创始人)和Q(在33.3%点的创始人)遗传因子型独自在茄子上,或在pepper-plus-eggplant联合上一起被饲养,B遗传因子型任何一个的人口尺寸仍然保持不变,或在第一和第二代有点增加了。在茄子上,在Q和B遗传因子型(3Q和6B)之间的竞争力上的RH和温度的效果不是重要的。

  • 标签: B型烟粉虱 相对湿度 生物型 竞争力 温度 主机
  • 简介:【背景】不同烟草品种会影响B型烟粉虱的取食选择性,但具体的机制尚不明确。刺吸电波图(EPG)技术是研究刺吸式昆虫对寄主植物取食选择性的重要手段,通过烟粉虱取食产生的电信号,可以分析其对不同烟草品种的取食差异。【方法】应用EPG技术对B型烟粉虱雌成虫在6个烟草品种(翠碧1号、K326、闽烟7号、云烟85、云烟87、红花大金元)上的取食行为进行比较研究。【结果】6个烟草品种上有效记录的雌成虫数均为18头,在翠碧1号、K326、闽烟7号、云烟87、云烟85和红花大金元叶片上能够到达韧皮部的个体数分别为15、15、12、13、15和15头,能够持续吸食的个体数分别为13、14、8、12、14和15头。烟粉虱雌成虫在6个烟草品种上的非刺探(np)波所占的比例差异显著,在红花大金元上所占的比例最小,显著低于其他5个品种。雌成虫在红花大金元和K326上E1波的总持续时间显著短于闽烟7号和云烟87。雌成虫在红花大金元上E2波的总持续时间显著长于其他5个品种,而在闽烟7号、云烟87和云烟85上显著短于其他3个品种。【结论与意义】在6个烟草品种中,B型烟粉虱雌成虫最喜食红花大金元,最不喜食闽烟7号和云烟87。因此,在福建省B型烟粉虱的发生区,选择烟草品种时可根据实际情况减少红花大金元的种植,增多闽烟7号和云烟87等抗B型烟粉虱品种的种植。

  • 标签: B型烟粉虱 雌成虫 取食行为 刺吸电波图 烟草品种
  • 简介:目的建立多重PCR技术鉴定选育剑尾鱼RR-B系的方法.方法根据可明显鉴定剑尾鱼RR-B系的6对特异性微卫星引物Msa012、Msa014、Msa033、Msb025、Msd003、Msd051,采用不同的组合方式对RR-B系剑尾鱼和红眼红体的非选育剑尾鱼进行多重PCR扩增.结果引物组合1(Msa014、Msb025、Msd003)和组合2(Msa012、Msa033、Msd051)两个三重PCR反应体系能清楚的扩增各个微卫星座位,且各目的片段之间无干扰,易于识别,引物组合1的排除概率为99.98%,引物组合2的排除概率为99.96%,能准确鉴定剑尾鱼RR-B系.结论本检测方法具有较高的稳定性,可快速准确鉴定剑尾鱼RR-B系.

  • 标签: 剑尾鱼 近交系 微卫星标记 多重PCR
  • 简介:IKK复合物由IKKα、IKKβ和IKKγ组成,是NF-κB通路中的重要分子,主要调控NF-κB通路的活化。近年的研究发现,IKK复合物还存在许多NF-κB非相关性的功能,主要涉及肿瘤发生、应激反应、转录调控、免疫功能及细胞周期调控等方面。IKK复合物的NF-κB非相关性的功能研究集中于IKKα和IKKβ亚基,并且存在激酶活性依赖和非依赖2种作用方式。对于该功能的深入探讨,对全面理解IKK分子的生理病理功能十分重要,并且为IKK分子的研究提出了一个新的方向。

  • 标签: IKK复合物 NF-κB非相关性 IKKα IKKΒ
  • 简介:目的:研究脂多糖(LPS)对人血清中补体系统的激活及在小鼠模型中诱导产生白三烯B4(LTB4)。方法:LPS包被ELISA板,利用血清中补体C4、C3沉积实验检测补体成分被LPS活化的情况,通过尾静脉注射小鼠LPS后不同时间点ELISA定量检测LTB4,评价补体系统的活化和炎症因子的产生。结果与结论:血清系统ELISA检测发现LPS可以激活补体系统,且以凝集素途径为主;动物实验中LTB4被LPS诱导后1~3h达到峰值,之后回落。C1INH对血清补体活化和动物模型中LTB4的产生均有显著抑制。

  • 标签: 脂多糖 补体 凝集素途径 白三烯B4
  • 简介:目的应用B超技术对恒河猴子宫内膜周期性变化进行实时监测.方法采用Aloka3.5mHz探头的B超仪,分别对6只性成熟的正常雌性恒河猴进行连续3个月经周期(n=18)的子宫内膜的周期性变化的实时测量,同时进行连续2个周期(n=12)的血清雌二醇E2及孕酮P的放射免疫检测分析.结果恒河猴子宫内膜厚度变化呈周期性.在滤泡期(月经周期的第-9~0天),B超图像表现为子宫内膜区域相对子宫肌层区域回声较低(较黑),子宫内膜厚度呈线性增长(r=0.88);黄体期(月经周期的第0~17天),B超图像表现为子宫内膜区域光点增强为强回声,子宫内膜厚度无明显增长.子宫内膜周期性变化与血清E2及P相关,子宫内膜线性增长最大值出现时间与E2分泌最高峰出现时间相一致.结论B型超声监测技术(ultrasoundexamination,US)作为一种有用的手段,能实时监测恒河猴子宫内膜周期性变化.

  • 标签: 超声检查 子宫内膜 恒河猴 雌二醇 孕酮
  • 简介:两性霉素B脂质体为作用强、抗菌谱广的抗真菌药物,临床应用广泛,但其不良反应不断有新的报道。本病例患者使用两性霉素B脂质体后导致急性胰腺炎,经给予两性霉素B脂质体减量及相应对症治疗后病情好转。

  • 标签: 两性霉素B脂质体 不良反应 胰腺炎
  • 简介:目的检测巨噬细胞对新生隐球菌活力的影响。方法新生隐球菌标准株B3501与小鼠巨噬细胞系J774细胞共孵育后,检测其出芽率,并通过电镜观察B3501在J774细胞内的超微结构。结果被吞噬的B3501超微结构完好,J774细胞对B3501菌株的吞噬指数在5.67%±1.29%-8.76%±3.09%,而B3501菌在J774细胞内的出芽率较高,可达46.85%±6.63%,出芽率随共孵育时间延长而下降,但4hrs组和8hrs组无明显差别(P〉0.05)。超微结构观察显示细胞内的新生隐球菌细胞壁完整。结论虽然巨噬细胞存在着胞内和胞外的抗隐球菌活性,但新生隐球菌仍可在其细胞内外存活并繁殖。

  • 标签: 新生隐球菌 巨噬细胞 毒性因子 凋亡