简介：摘要目的探讨微小RNA miR-369-3p靶向调控α-辅肌动蛋白4(ACTN4)表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测肝癌及癌旁组织中miR-369-3p、ACTN4的表达水平。采用脂质体法将miR-369-3p mimics、miR-NC、si-ACTN4、si-NC转染至肝癌MHCC97H细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率，双荧光素酶报告实验验证miR-369-3p对ACTN4的靶向调控作用，Western blot法检测细胞周期蛋白1(cyclin D1)、p21、B淋巴细胞瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)的表达。结果肝癌组织中miR-369-3p mRNA的表达水平为0.46±0.04，低于癌旁组织(1.00±0.08, P<0.001)；ACTN4 mRNA的表达水平为3.12±0.29，高于癌旁组织(1.01±0.09, P<0.001)；ACTN4蛋白的表达水平为0.61±0.06，高于癌旁组织(0.25±0.03，P<0.001)。与miR-NC组细胞比较，miR-369-3p过表达肝癌MHCC97H细胞增殖能力降低(细胞培养72 h吸光度分别为0.71±0.06和1.26±0.11，P<0.001)，G1期细胞比例升高[分别为(51.56±5.23)%和(31.14±3.36)%，P<0.001]，S期细胞比例降低[分别为(14.33±1.45)%和(32.44±3.56)%，P<0.001)]，细胞凋亡率升高[分别为(20.16±2.11)%和(6.25±0.64)% , P<0.001]，cyclin D1和Bcl-2蛋白相对表达量降低(均P<0.001)，p21和Bax蛋白相对表达量升高(均P<0.001)。与si-NC组比较，抑制ACTN4的表达后，肝癌MHCC97H细胞增殖能力降低(细胞培养72 h吸光度分别为0.78±0.07和1.24±0.12，P<0.001)，G1期细胞比例升高[分别为(48.69±4.21)%和(30.33±3.01)%，P<0.001]，S期细胞比例降低[(分别为18.54±1.61)%和(36.21±3.42)%，P<0.001]，细胞凋亡率升高[分别为(18.32±1.82)%和(6.58±0.66)%，P<0.001]，cyclin D1和Bcl-2蛋白水平降低(均P<0.001)，p21和Bax蛋白水平升高(均P<0.001)。与miR-369-3p+pcDNA组比较，过表达ACTN4后，肝癌MHCC97H细胞增殖能力提高(细胞培养72 h吸光度分别为1.12±0.11和0.68±0.06，P<0.001)，G1期细胞比例显著降低[(38.81±3.24)%和(51.80±4.57)%，P<0.001]，S期细胞比例显著升高[(31.65±3.11)%和(15.69±1.44)%，P<0.001]，细胞凋亡率降低[分别为(13.86±1.37)%和(22.69±2.24)%, P<0.001]，cyclin D1和Bcl-2蛋白相对表达量升高(均P<0.001)，p21和Bax蛋白相对表达量降低(均P<0.001)。结论miR-369-3p可通过靶向调控ACTN4的表达使肝癌细胞周期阻滞于G1期，抑制肝癌细胞增殖，促进肝癌细胞凋亡。

简介：AbstractBackground:Long non-coding RNA (lncRNA) actin filament-associated protein 1 antisense RNA 1 (AFAP1-AS1) functions as a competing endogenous RNA to regulate target genes expression by sponging microRNAs (miRs) to play cancer-promoting roles in cancer stem cells. However, the regulatory mechanism of AFAP1-AS1 in cervical cancer (CC) stem cells is unknown. The present study aimed to provide a new therapeutic target for the clinical treatment of CC.Methods:Hyaluronic acid receptor cluster of differentiation 44 variant exon 6 (CD44v6)(+) CC cells were isolated by flow cytometry (FCM). Small interfering RNAs of AFAP1-AS1 (siAFAP1-AS1) were transfected into the (CD44v6)(+) cells. The levels of AFAP1-AS1 were measured by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Sphere formation assay, cell cycle analysis, and Western blotting were used to detect the effect of siAFAP1-AS1. RNA pull-down and luciferase reporter assay were used to verify the relationship between miR-27b-3p and AFAP1-AS1 or vascular endothelial growth factor (VEGF)-C.Results:CD44v6(+) CC cells had remarkable stemness and a high level of AFAP1-AS1. However, AFAP1-AS1 knockdown with siAFAP1-AS1 suppressed the cell cycle transition of G(1)/S phase and inhibited self-renewal of CD44v6(+) CC cells, the levels of the stemness markers octamer-binding transcription factor 4 (OCT4), osteopontin (OPN), and cluster of differentiation 133 (CD133), and the epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins Twist1, matrix metalloprotease (MMP)-9, and VEGF-C. In the mechanism study, miR-27b-3p/VEGF-C signaling was demonstrated to be a key downstream of AFAP1-AS1 in the CD44v6(+) CC cells.Conclusions:LncRNA AFAP1-AS1 knockdown inhibits the CC cell stemness by upregulating miR-27b-3p to suppress VEGF-C.

简介：摘要目的探讨薄层液基细胞学检测（TCT）联合P16免疫细胞染色检查在宫颈癌前病变筛查中的价值。方法以2019年5月至10月在本院就诊的108例患者为研究对象，收集宫颈脱落细胞，应用免疫组化检测P16表达；应用薄层液基细胞学筛查（TCT）对脱落细胞进行宫颈癌筛查；在阴道镜下对可疑病变区进行多点病理活组织取样，进行病理学诊断。以病理组织学检查结果为金标准，比较TCT、P16及两者联合检测对宫颈癌前病变筛查的灵敏度、特异度和准确度等指标。结果TCT检测的灵敏度、特异度和准确度分别为85.53%、90.63%及87.04%，TCT检测结果与病理学诊断结果一致性较好（Kappa=0.71）。P16检测的灵敏度、特异度和准确度分别为67.11%、93.75%及75%，P16检测与病理诊断结果一致性一般（Kappa=0.51），但P16特异性高并且对高级别CIN病变灵敏度高。TCT+P16联合检测的灵敏度、特异度和准确度分别为94.74%、84.38%及91.67%；联合检测结果与病理学诊断结果高度一致（Kappa=0.798），与P16或TCT单独检测结果比较，差异有统计学意义（均P<0.005）。结论TCT和P16联合检测可提高宫颈癌前病变早期筛查的灵敏度和准确度，对宫颈癌的早期防治有重要临床价值。

简介：【摘要】目的 分析P型空肠袢代胃术在胃癌胃切除患者消化道重建中的应用效果。方法 将68例胃癌患者作为本次研究对象，均来源于我院2019年7月—2020年11月期间，按随机数字表法将其分为B组与A组，各34例，A组予以常规Lahey + Braun 吻合术，B组予以P型空肠袢代胃术，分析2组治疗价值。结果 B组术中出血量、手术时间、体质量增加明显优于A组（P＜0.05）；B组、A组并发症总发生率分别为5.88%、29.41%，B组发生率明显低于A组（P＜0.05）。结论 胃癌胃切除患者消化道重建中实施P型空肠袢代胃术可获得显著价值，能够有效规避并发症发生率，优化体质量，缩短手术时间，因此值得临床应用及推广。

简介：摘要目的研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(P<0.05)，VDAC1表达显著升高(P<0.05)，Bcl-2表达下调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(P<0.05)，而ROS水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(P<0.05)，ROS水平显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(P<0.05)。结论miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。

简介：摘要目的探讨miR-145-5p对胶质细胞源性神经营养因子受体（glial cell-derived neurotrophic factor receptor，GFR）α1表达的调控及其与先天性巨结肠（Hirschsprung's disease，HSCR）的关系。方法选择2016年3月至2018年6月湖南省儿童医院新生儿外科收治的HSCR患儿巨结肠根治术后痉挛段结肠组织为HSCR组，同期新生儿坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）患儿手术切除坏死肠段两端正常结肠组织为NEC组作为对照，进行前瞻性研究。采用实时定量聚合酶链反应检测两组结肠组织内miR-145-5p及GFRα1表达水平，荧光素酶活性实验检测GFRα1与miR-145-5p的关系；采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后miR-145-5p及GFRα1表达水平，CCK8法检测转染后SH-SY5Y细胞活力。结果HSCR组24例，NEC组18例。HSCR组miR-145-5p mRNA水平明显高于NEC组［（5.62±2.04）比（1.11±0.48）］，GFRα1 mRNA水平明显低于NEC组［（0.39±0.18）比（1.00±0.37）］，差异有统计学意义（P<0.01），且miR-145-5p表达水平与GFRα1表达水平成负相关（r=-0.676，P<0.01）。荧光素酶活性实验证实GFRα1为miR-145-5p的靶基因。SH-SY5Y细胞转染miR-145-5p模拟物后GFRα1的表达水平明显降低（P<0.01），SH-SY5Y细胞活力下降。结论GFRα1是miR-145-5p的靶基因，HSCR患儿病变结肠组织中GFRα1低表达可能与miR-145-5p高表达有关。

简介：摘要目的探讨微小RNA-139-5p（miR-139-5p）在食管鳞状细胞癌（ESCC）发生发展中的作用及其对ESCC细胞增殖和侵袭的影响和分子机制。方法收集2017年2月至2018年3月在郑州大学第一附属医院胸外科手术获得的75例ESCC组织和癌旁正常食管组织标本。实验分2组：ESCC（n=75）和正常食管组织（n=75）。采用GEO数据集和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ESCC组织和细胞中miR-139-5p的表达。将miR-139-5p抑制剂、miR-139-5p模拟物、阴性对照、对照siRNA、T盒转录因子1（TBX1） siRNA、pcDNA3.1和pcDNA3.1-TBX1转染ESCC Eca109和TE1细胞，用qRT-PCR检测转染后ESCC细胞中miR-139-5p和TBX1的表达水平，分别用细胞计数试剂盒8（CCK-8）和Transwell小室检测ESCC细胞的增殖和侵袭。双荧光素酶报告实验分析miR-139-5p与TBX1的相互作用，qRT-PCR、Western印迹法和免疫组织化学检测TBX1在ESCC组织中的表达，Western印迹法检测转染后E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。结果ESCC组织中miR-139-5p水平明显低于正常组织（1.17±0.43比5.16±3.62，P<0.001）。Log-rank检验发现，高miR-139-5p表达水平的ESCC患者（n=43）生存率显著高于低miR-139-5p水平的ESCC患者生存率（n=32）（67.44%比25.00%，P=0.005）。ESCC细胞中miR-139-5p的表达水平均显著低于正常食管上皮细胞Het-1A（均P<0.001）。miR-139-5p高表达的Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭能力明显低于阴性对照（NC）转染的Eca109和TE1细胞（均P<0.05）。双荧光素酶报告实验表明，miR-139-5p能结合致TBX1的3′-非翻译区。miR-139-5p模拟物或抑制剂分别抑制或促进Eca109和TE1细胞TBX1蛋白表达（均P<0.05）。TBX1下调显著抑制Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭，而TBX1的过表达显著促进Eca109和TE1细胞的增殖和侵袭（均P<0.05）。此外，pcDNA3.1-TBX1能部分逆转miR-139-5p介导的细胞侵袭能力的抑制（均P<0.05），而TBX1 siRNA能部分逆转miR-139-5p抑制剂介导的侵袭能力的增强（均P<0.05）。结论miR-139-5p通过靶向TBX1抑制ESCC细胞的增殖和侵袭。

简介：[摘要]: 目的:研究疏肝活血方对血管性痴呆( VaD)海马区P38MAPK磷酸化的影响。方法:雄性SD大鼠90只，采用改进的

简介：无

简介：摘要目的探究精神分裂症患者不同等级暴力风险下事件相关电位P300的变化特点及精神分裂症患者暴力行为的影响因素。方法收集2019年1月至2020年8月就诊于石河子市绿洲医院的精神分裂症患者158例，并对其进行为期3 d的暴力风险评估，将符合纳入标准的患者按照评估结果分为低风险组(n＝78)、中风险组(n＝51)和高风险组(n＝29)，各组患者在3 d内完成听觉P300的检测，并观察1周内患者是否发生暴力攻击行为。采用SPSS 20.0软件进行数据处理，使用方差分析研究不同暴力风险分组P300的变化，使用Logistic回归分析研究精神分裂症患者暴力行为的影响因素。结果三组患者的P300的潜伏期差异无统计学意义(χ2＝4.71，P＝0.10)，波幅差异有统计学意义(F＝6.67，P<0.01)。两两比较发现，与低风险组[(12.14±9.19) μV]比较，中风险组[(8.25±7.13) μV]和高风险组[(6.71±4.97)μV]患者的P300波幅均降低，差异有统计学意义(t＝-3.14，-5.45，均P<0.05)。高风险组与中风险组比较，两组患者的P300波幅差异无统计学意义(t＝-2.31，P>0.05)。发生暴力行为的精神分裂症患者与未发生暴力行为的患者相比，其P300潜伏期和波幅差异均有统计学意义(Z＝-6.30，9.78，均P<0.01)。BVC等级高(与高风险组相比，低风险组：OR＝0.03，95%CI：0.00～0.35；中风险组：OR＝0.09，95%CI：0.01～0.62)、P300潜伏期(OR＝1.30，95%CI：1.13～1.48)延长和波幅降低(OR＝0.50，95%CI：0.36～0.70)、有被害妄想(OR＝0.12，95%CI：0.02～0.76)是发生暴力行为的危险因素。结论P300的潜伏期和波幅可以作为评估精神分裂症患者暴力风险的可靠性神经电生理指标，对于评估精神分裂症患者的暴力行为有重要的临床应用价值。

简介：摘要目的探讨miR-187-5p通过RANKL/NFκB信号通路对骨质疏松症中破骨细胞活性的影响及机制分析。方法使用小鼠巨噬细胞264.7细胞株（RAW246.7），设置正常组（con）、核因子κB配体的受体激活子（receptor activator of nuclear factor-κBligand，RANKL）诱导的骨质疏松症组（RANKL-induced OP）、阴性对照（mimic negative control，mimic NC）、OP+miR-187-5p模拟物（OP+miR-187-5p mimic），通过细胞计数试剂盒（the cell counting kit 8，CCK8）检测破骨细胞的增殖水平，RT-qPCR检测TRAPmRNA、miR-187-5p表达水平，免疫印迹检测p65和TNFα蛋白表达。最后，通过双荧光素酶报告基因（dual luciferase reporter assays）检测miR-187-5p和p65间的相互作用。结果RAW264.7细胞转染miR-187-5p后，OP组的细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著高于con组（P=0.008、0.017），OP+miR-187-5p mimic组细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著低于OP+miR-187-5p NC组（P=0.023、0.037）。而miR-187-5p在OP组显著低于con组（P=0.031），转染miR-187-5p mimic后升高其表达水平（P=0.041）。此外，OP组的p65和TNFα蛋白水平明显高于con组（P=0.034; P=0.024），OP+miR-187-5p mimic组的p65和TNFα蛋白水平显著低于OP+miR-187-5p NC组（P=0.028；P=0.036）。同时OP组的p65显著高于con组（P=0.039），OP+miR-187-5p mimic组的p65基因水平明显高于OP+miR-187-5p NC（P=0.025）。双荧光素酶报告分析，miR-187-5p与p65间存在靶向关系。结论miR-187-5p通过抑制NFκB信号通路抑制破骨细胞的活性。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达，观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、HO-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株，定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Western blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR-4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05)，在OVCAR-3细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR-4699-3p后，实验组OVCAR-3细胞中miR-4699-3p表达量显著升高(P<0.01)，证明转染成功。生物信息学软件预测，miR-4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)，双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3′-非翻译区(UTR)(P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比，实验组过表达miR-4699-3p后，MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)，细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞的增殖能力降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞迁移能力降低(P<0.01)。结论miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达，上调OVCAR-3细胞中的miR-4699-3p表达可通过干扰MRPS23基因表达，抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨胃癌患者血清外泌体中微小RNA(miR)-181-5p的表达变化及其临床意义。方法收集60例在2015年1月至2015年12月间就诊于邢台人民医院普外科且前期未接受过任何治疗的胃癌患者术前术后血清标本，收集同期20例健康体检者血清标本，分离血清外泌体，提取RNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测血清外泌体miR-181-5p的相对表达量，通过t检验比较胃癌组与正常体检组之间，及胃癌患者术前术后外泌体miR-181-5p的表达差异。通过χ2检验比较血清外泌体miR-181-5p表达与患者临床病理特征的关系，通过Log-rank检验分析胃癌患者血清外泌体miR-181-5p表达与预后的关系。结果胃癌患者术前血清外泌体miR-181-5p表达量低于健康体检者(5.325±0.594比17.390±2.095，t＝7.642，P<0.01)。胃癌患者术后血清外泌体miR-181-5p水平高于术前(8.993±0.696比5.325±0.594，t＝4.010，P<0.01)。肿瘤患者血清外泌体miR-181-5p表达与肿瘤临床分期呈负相关，Ⅰ/Ⅱ期患者血清外泌体miR-181-5p术前表达量高于Ⅰ/Ⅱ期患者(6.977±0.871比3.672±0.699，t＝2.959，P<0.01)。胃癌患者血清外泌体miR-181-5p高表达组总生存时间少于低表达组(35.23个月比44.68个月，χ2＝4.286，P<0.05)。结论胃癌患者血清外泌体中miR-181-5p的表达显著降低，其表达量与肿瘤临床分期及预后呈负相关。

简介：摘要目的探讨外泌体微RNA-93-5p（miR-93-5p）作为慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）早期诊断的生物标志物的可能性。方法选取2018年12月至2020年12月于南通大学附属医院诊断为CKD的患者（≥18周岁）和同期年龄匹配的健康志愿者，分为CKD组（160例）与对照组（70例），其中CKD组行肾活检者60例（包括糖尿病肾病、IgA肾病、膜性肾病各20例），以20例行肾切除手术的肾癌患者癌旁正常肾组织作为对照。采用实时定量PCR法检测血清、尿液外泌体miR-93-5p的表达水平，分析其与临床指标及肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）的相关性；采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）评估血清、尿液外泌体miR-93-5p诊断CKD的价值；采用荧光原位杂交技术（FISH）对不同病理类型CKD患者肾组织miR-93-5p进行定位定量分析。结果CKD组血清外泌体miR-93-5p表达低于对照组，尿液外泌体miR-93-5p表达高于对照组。Spearman秩相关分析结果显示，CKD患者血清外泌体miR-93-5p相对表达水平与血红蛋白呈正相关（r=0.70，P=0.04），与血肌酐（r=-0.57，P=0.03）、血胱抑素C（Cys-C）（r=-0.71，P=0.02）、血清β2微球蛋白（β2-MG）（r=-0.23，P=0.03）及RIF指数（r=-0.57，P=0.03）呈负相关；尿液外泌体miR-93-5p相对表达水平与血清β2-MG（r=0.89，P=0.01）、尿β2-MG（r=0.54，P=0.03）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）（r=0.35，P=0.02）及RIF指数（r=0.65，P=0.03）呈正相关。血清外泌体miR-93-5p、尿液外泌体miR-93-5p诊断CKD的ROC曲线下的面积分别为0.627（P<0.05）和0.741（P<0.05）。FISH检测结果显示，不同病理类型CKD患者肾组织内miR-93-5p表达水平均高于对照组，并且表达于肾小管内。结论血清、尿液外泌体miR-93-5p与肾小管间质损伤相关，对CKD诊断有一定参考价值，可作为CKD早期诊断的生物标志物。

简介：摘要缺血性脑卒中(IS)是脑卒中的主要亚型，它是一种复杂的多基因疾病，由多种环境因素和遗传因素共同影响，因此了解IS的遗传危险因素是阐明IS发病机制、优化预防策略、确定新的治疗靶点的重要步骤。2012年和2015年2项全基因组关联研究(GWAS)结果显示在染色体6p21.1区存在与IS发病相关的风险位点，但后续的重复验证研究结果却存在争议，而且染色体6p21.1区遗传变异影响IS易感性的生物学功能和分子机制的探索目前尚处于初始阶段。本文对染色体6p21.1区遗传变异与IS易感性之间的关联研究进行综述，以期进一步阐明其在IS中的作用机制，从而为IS的防治提供理论依据。

简介：摘要目的探讨左西孟旦（levosimendan，Levo）对冠状动脉微栓塞（coronary microembolization, CME）后心肌损伤和LOX-1/p38 MAPK信号通路的影响。方法采用随机数字表法将24只巴马小型猪随机分为假手术组（Sham组）、CME组、CME+左西孟旦预治疗+对照腺相关病毒转染组（CME+Levo+NC组）及CME+左西孟旦预治疗+ LOX-1过表达腺相关病毒转染组（CME+Levo+LOX-1组），每组6只。经冠脉介入法于前降支注射栓塞微球构建CME模型；Sham组则注射等量生理盐水代替。CME+Levo+NC组和CME+Levo+LOX-1组于造模前2周分别转染对照病毒和LOX-1过表达病毒，并均于造模前24 h开始持续静滴左西孟旦。心脏超声检测心功能指标；苏木精-伊红（HE）染色和苏木精碱性复红-苦味酸（HBFP）染色分别用于观察心肌组织病理改变和心肌微梗死区域；酶联免疫吸附测定（ELISA）用于检测血清肌钙蛋白I（cTnI）；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNLE）检测心肌细胞凋亡率；免疫荧光观察心肌组织LOX-1、Bcl-2、Bax、Caspase-3 p12和p-p38 MAPK蛋白表达情况。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。结果⑴与Sham组比较，CME组小型猪左心室射血分数（LVEF） [（69.73±4.79）% vs （47.18±2.33）%，P<0.05]、左心室短轴缩短率（LVFS） [（42.47±2.54）% vs （21.43±1.76）%，P<0.05]、心输出量（CO）[（4.42±0.27）L/min vs （2.57±0.17）L/min，P<0.05]均显著下降，而左心室舒张期末径（LVEDd）[（32.37±1.33）mm vs （41.21±1.86）mm，P<0.05]显著增加，心肌微梗死面积占比[（3.73±0.87）% vs （20.72±2.49）%，P<0.05]显著增加，血清cTnI水平[（51.92±16.62）pg/mL vs （236.80±19.56）pg/mL，P<0.05]显著升高，心肌细胞凋亡率[（1.15±0.47）% vs （14.15±3.24）%，P<0.05]显著升高，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显上调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显下调（P<0.05）。⑵与CME组比较，CME+Levo+NC组小型猪LVEF[（47.18±2.33）% vs （55.48±3.92）%，P<0.05]、LVFS[（21.43±1.76）% vs （32.02±1.75）%，P<0.05]、CO[（2.57±0.17）L/min vs （3.45±0.25）L/min，P<0.05]均显著升高，而LVEDd[（41.21±1.86）mm vs （36.78±1.56）mm，P<0.05]显著下降，心肌微梗死面积占比[（20.72±2.49）% vs（11.63±3.12）%，P<0.05]显著减小，血清cTnI水平[（236.80±19.56）pg/mL vs （157.40±15.13）pg/mL，P<0.05]显著降低，心肌细胞凋亡率[（14.15±3.24）% vs （8.33±1.28）%，P<0.05]显著下降，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显下调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显上调（P<0.05）。⑶与CME+Levo+NC组比较，CME+Levo+LOX-1组小型猪LVEF[（55.48±3.92）% vs（48.52±1.69）%，P<0.05]、LVFS[（32.02±1.75）% vs （23.80±2.51）%，P<0.05]、CO[（3.45±0.25）L/min vs （4.25±0.23）L/min，P<0.05]均显著降低，而LVEDd[（36.78±1.56）mm vs （41.12±1.57）mm，P<0.05]显著增加，心肌微梗死面积占比[（11.63±3.12）% vs （18.93±1.58）%，P<0.05]显著增加，血清cTnI水平[（157.40±15.13）pg/mL vs （244.40±15.97）pg/mL，P<0.05]显著升高，心肌细胞凋亡率[（8.33±1.28）% vs （12.28±1.93）%，P<0.05]显著增加，心肌组织Bax、Caspase-3 p12、LOX-1和p-p38 MAPK蛋白表达明显上调（均P<0.05），Bcl-2蛋白表达明显下调（P<0.05）。结论左西孟旦可通过抑制LOX-1/p38 MAPK信号通路介导的心肌细胞凋亡而减轻CME后心肌损伤。

简介：摘要目的探讨尿液外泌体miR-150-5p在不同年龄段人群中表达量的变化及miR-150-5p在肾脏衰老过程中的作用。方法选择2014年1月至2016年12月于北京友谊医院老年医学科就诊的76例为研究对象，其中青年组15例，中年组35例，老年组26例，提取尿液外泌体，利用实时定量荧光PCR法检测miR-150-5p表达情况，并通过Logistic回归分析评估不同含量miR-150-5p与年龄、性别、高血压病史、冠心病病史、高脂血症之间的相关性；在人肾小管上皮细胞HK2细胞中过表达和敲低miR-150-5p后，通过蛋白质印迹法分析HK-2细胞中上皮细胞黏附分子相关蛋白表达量情况；通过细胞学实验明确miR-150-5p过表达或敲低后对HK-2细胞增殖、细胞周期的影响。结果Logistic回归分析发现年龄与尿液外泌体中miR-150-5p相对含量密切相关(P<0.05)，老年组尿液外泌体内miR-150-5p相对含量(1.33±0.41)较青年组(0.88±0.40)明显增加(P<0.05)，且随着年龄增长，尿液外泌体内miR-150-5p相对含量与肾小球滤过率水平成反比。体外实验发现在肾小管上皮细胞HK-2中敲低miR-150-5p后上皮细胞黏附分子Zo-1、E-Cadherin表达量略有下降；而过表达miR-150-5p后，Zo-1、E-Cadherin表达略有增高，miR-150-5p可能影响HK-2细胞的凋亡。结论尿液外泌体miR-150-5p在老年组人群中表达量略有增加，且与肾功能相关；miR-150-5p可影响肾小管上皮细胞中部分上皮细胞黏附分子相关蛋白的表达，有望成为肾脏衰老相关性基因之一。

简介：摘要目的结直肠癌组织标本中Numb甲基化状况，p53基因的突变情况，探讨p53突变与Numb/Notch1表达模式的关系。方法分别采用甲基化特异性的聚合酶链反应(MSP)检测Numb基因启动子区甲基化状况、聚合酶链反应(PCR)及DNA测序检测p53基因突变状况，采用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测Numb在60例切除结直肠癌组织中的表达，分析p53突变状态与Numb表达水平的相关性，研究两者表达模式关系与表观遗传关系。结果60例结直肠癌组织中Numb基因启动子甲基化状况，与正常肠黏膜组织比较，其中25例(41.7%)结直肠癌组织Numb基因启动子呈部分甲基化，但与其mRNA及蛋白表达并无明显相关性(P>0.05)。60例患者中31例存在p53基因突变，突变率为51.7%，外显子(E) 5、6、7、8的突变次数分别为5、6、12、11例次(其中有2例检出E7、E8 2个外显子突变，1例为E5、E8 2个外显子突变)，Numb在p53突变组表达水平(0.45±0.13)显著低于非突变组(0.87±0.12，P<0.05)。p53突变与Numb蛋白表达呈线性负相关，相关系数为-0.69，p53突变与Notch1蛋白表达呈线性正相关，相关系数为0.33，而与Delta及Jagged1蛋白表达无明显相关。Numb低表达(39例)预后差于Numb高表达患者(21例)，差异有统计学意义(P<0.05)。结论p53突变状态与Numb表达水平密切相关，有助于判断结直肠癌某些生物学行为及预后。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达，观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、HO-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株，定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Western blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR-4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05)，在OVCAR-3细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR-4699-3p后，实验组OVCAR-3细胞中miR-4699-3p表达量显著升高(P<0.01)，证明转染成功。生物信息学软件预测，miR-4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)，双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3′-非翻译区(UTR)(P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比，实验组过表达miR-4699-3p后，MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)，细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞的增殖能力降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞迁移能力降低(P<0.01)。结论miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达，上调OVCAR-3细胞中的miR-4699-3p表达可通过干扰MRPS23基因表达，抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的报道1例儿童间质性肺疾病家系的临床及胸部CT影像学特点，并对患儿及其家系进行致病基因突变分析。方法为明确先证者间质性肺疾病的致病原因，对患儿的家系展开调查，采集5例先证者家系成员的临床资料，并对4例有呼吸道症状的家系成员进行胸部HRCT检查；进一步对先证者血样进行人类全外显子测序进行致病性分析，且对其及其家属进行一代验证。结果家系调查发现，该家系7人中存在5例间质性肺疾病患者，男性3例，女性2例，其中1例死亡。4例存活的患者均存在SFTPC基因突变(exon4，c.342G>T，p.K114N)，考虑变异来源于先证者父亲，为致病性突变，其在各数据库中无收录，为新发突变。并且家系中不同患者的表现度存在明显差异。结论SFTPC基因p.K114N新发突变可导致儿童间质性肺疾病，且该突变在家系成员中存在外显不全现象，胸部CT和全外显子测序对儿童间质性肺疾病的诊断具有重要意义。