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  • 简介:摘要目的观察前列腺癌相关转录物6(PCAT6)在肝癌患者血清中的表达及其表达对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法定量聚合酶链反应(qPCR)法检测2017年6月至2019年6月新乡医学院第一附属医院收治的64例肝癌患者血清和正常肝细胞THLE-3、肝癌Hep3B、HepG2细胞株中长链非编码RNA(lncRNA) PCAT6水平;将肝癌Hep3B细胞随机分为空白对照组(NC组)、阴性空载体转染组照(si-con组)和lncRNA PCAT6沉默组(si-PCAT6组),通过蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达;通过噻唑蓝(MTT)检测NC组、si-con组和si-PCAT6组细胞增殖;流式细胞术检测3组细胞凋亡率;Transwell小室法检测3组细胞迁移和侵袭。应用SPSS 22.0统计软件分析。结果中或高分化患者血清lncRNA PCAT6高表达(60.94%)多于低分化程度患者(6.25%,χ2=22.968,P<0.01),差异有统计学意义,T分期Ⅱ~Ⅳ患者血清lncRNA PCAT6高表达占比(57.81)多于Ⅰ期患者(9.38%,χ2=8.529,P<0.01),差异有统计学意义;Hep3B细胞(3.72±0.67)和HepG2细胞(3.38±0.53)中lncRNA PCAT6表达高于THLE-3(1.03±0.14,t=9.322、8.144,P<0.05),差异有统计学意义。si-PCAT6组lncRNA PCAT6表达(0.21±0.11)显著低于si-con组(0.96±0.15,t=9.915,P<0.05),24、48、72 h细胞活力显著降低(t=3.280、6.144、6.373,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot检测si-PCAT6组cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9蛋白、p-PI3K和p-Akt表达表达显著增加(t=11.408、14.628、8.683、9.585,P<0.01),差异有统计学意义,MMP-2和MMP-9蛋白表达减少(t=10.568、10.814,P<0.01),差异有统计学意义;流式细胞术检测Hep3B细胞凋亡率显著增高(t=21.075,P<0.01),差异有统计学意义;Transwell细胞迁移和侵袭显著降低(t=12.816、12.707,P<0.01),差异有统计学意义。结论HCC患者血清中lncRNA PCAT6处于高表达状态,与HCC分化程度、T分期有关,沉默lncRNA PCAT6可抑制其生物学行为,抑制Akt信号通路活化是其作用机制。

  • 标签: 长链非编码RNA 前列腺癌相关转录物6 肝癌 生物学功能
  • 简介:摘要目的评估重组人干扰素α2b(rhIFNα2b)口咽部喷雾治疗小儿疱疹性咽峡炎的有效性和安全性。方法本研究采用前瞻性、随机、开放、对照、多中心研究方法,2018年8月至2019年3月参加本研究的安徽省内11家三甲医院共收集了疱疹性咽峡炎患儿180例,按住院的时间顺序随机分为干扰素治疗组和利巴韦林对照组。在清热解毒和抗感染治疗基础上,治疗组患儿咽部喷洒rhIFNα2b 9 g/L盐水溶液[100万IU/mL,10万IU/(0.1 mL·揿)],对照组患儿咽部喷洒利巴韦林喷剂(0.5 mg/揿,150揿),2组治疗方法相同,均为每次3揿,每日4次,连续给药5 d,提前痊愈者不再给药治疗。所有患儿观察至临床痊愈,比较2组患儿的疗效、症状和体征消失时间,并评估口咽局部喷洒rhIFNα2b的安全性。结果180例患儿均完成研究,其中治疗组90例,对照组90例,2组性别、年龄、体质量和就诊前病程等方面比较差异均无统计学意义(均P>0.05),具有临床可比性。治疗组显效率[63.3%(57/90例)]显著高于对照组[38.9%(35/90例)],差异有统计学意义(χ2=10.934,P=0.004);治疗组总有效率为96.7%(87/90例),与对照组[92.2%(83/90例)]比较差异无统计学意义(χ2=2.924,P=0.169)。治疗组发热[(32.59±20.73) h比(45.72±26.96) h]、充血[(76.48±23.12) h比(92.44±24.31) h]、疱疹[(72.99±25.77) h比(85.09±26.62) h]、流涎[(45.44±24.96) h比(54.42±31.20) h]和畏食[(62.70±23.99) h比(78.71±30.54) h]等症状和体征持续时间均短于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。用药前2组血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)[(13.02±4.41) ng/L比(13.57±9.27)ng/L]、白细胞介素-6(IL-6)[(26.48±11.31) ng/L比(30.15±15.55) ng/L]和C反应蛋白(CRP)[(19.34±14.11) mg/L比(19.83±14.57) mg/L]比较差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后,治疗组血清TNF-α和IL-6水平分别为(7.26±1.99) ng/L和(2.42±0.73) ng/L,均低于对照组[(12.09±6.39) ng/L和(7.32±11.51) ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.05),但2组患儿血清CRP水平[(2.21±3.34) mg/L比(2.99±4.81) mg/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组患儿咽拭子治疗前后病毒阳性率分别为65.3%(32/49例)和40.6%(13/32例),与对照组[66.7%(36/54例)和41.0%(16/39例)]比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗期间2组均未见严重不良反应事件,治疗组不良反应发生率为1.1%(1/90例),对照组不良反应发生率为5.6%(5/90例);对照组治疗后的血红蛋白水平显著低于治疗前和治疗组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论rhIFNα2b口咽部喷雾治疗疱疹性咽峡炎相对利巴韦林可明显提高临床显效率,加快临床症状和体征消失,缩短总病程且安全性良好,值得临床应用。

  • 标签: 疱疹性咽峡炎 重组人干扰素α2b 利巴韦林 咽部喷雾
  • 简介:摘要目的探讨降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞(CD64)、干扰素诱导蛋白10(IP-10)联合检测在儿童上呼吸道感染性疾病诊断中的应用价值。方法选取2017年1月至2018年12月绍兴文理学院附属医院收治的上呼吸道感染性疾病患儿122例为研究对象,根据患儿临床症状及诊断项目结果,患儿均为细菌感染(感染组),另选同期体检健康儿童作为对照组(n=61),分别对两组受试者PCT、CRP、CD64、IP-10水平进行检测,同时对各指标之间相关性以及联合检测的诊断价值进行分析。结果对照组和感染组PCT分别为(0.55±0.13)μg/L、(10.81±1.25)μg/L,CRP分别为(1.85±1.07)mg/L、(15.18±5.05)mg/L,CD64指数分别为(4.37±0.51)、(9.91±1.62),IP-10分别为(0.08±0.01)μg/L、(0.70±0.20)μg/L,差异均有统计学意义(t=63.847、20.362、26.040、24.163,均P<0.001)。与对照组比较,感染组的PCT、CRP、CD64、IP-10均显著升高(均P<0.05);治疗后,感染组PCT、CRP、CD64、IP-10水平均下降(均P<0.05);经Pearson相关性分析发现,PCT与CRP、PCT与CD64、PCT与IP-10、CRP与CD64、CRP与IP-10、CD64与IP-10之间均呈正相关(均P<0.05);采用ROC曲线进行细菌感染性诊断价值分析,PCT、CRP、CD64、IP-10联合诊断的灵敏度为98.36%、特异度为97.52%,均高于单指标。结论PCT、CRP、CD64、IP-10联合检测有较高的敏感性、特异性,可作为诊断儿童上呼吸道感染性疾病早期细菌感染的指标。

  • 标签: 呼吸道感染 细菌感染 C反应蛋白质 中性白细胞浸润 干扰素类 诊断 敏感性与特异性
  • 简介:摘要目的探讨细胞因子信号转导抑制蛋白1(suppressor of cytokine signaling, SOCS1)在小蘖碱(berberine, BBR)抑制小胶质细胞激活中的作用。方法联合应用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)和γ-干扰素(interferon γ,IFN-γ)激活N9小胶质细胞模拟神经炎症。将细胞分为对照组、模拟神经炎症组(10 ng/ml LPS+10 U/ml IFN-γ)、BBR处理组(1 μmol/L BBR+LPS/IFN-γ)、SOCS1-siRNA处理组(SOCS1-siRNA+BBR+LPS/IFN-γ)和乱序-siRNA处理组(SC-siRNA+BBR+LPS/IFN-γ)。孵育24 h后,采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)表达水平,采用蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和核因子κB(nuclei factor-κB, NF-κB)蛋白表达水平,采用免疫细胞化学法观察细胞形态和iNOS表达。结果与对照组相比,LPS/IFN-γ可显著增高培养基内TNF-α和IL-6含量,上调iNOS和NF-κB表达水平(P均<0.05),并增大小胶质细胞体积。1 μmol/L BBR可显著抑制小胶质细胞TNF-α和IL-6释放量,降低iNOS和NF-κB表达水平(P均<0.05),并改善细胞形态。SOCS1-siRNA能显著逆转BBR对小胶质细胞激活的抑制作用(P均<0.05)。结论BBR可能通过SOCS1分子介导抑制LPS和IFN-γ对小胶质细胞的激活。

  • 标签: 小檗碱 小胶质细胞 脂多糖类 干扰素-γ 炎症 细胞因子信号转导抑制蛋白1 细胞因子类 消炎药
  • 简介:摘要目的探讨重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗在手足口病患者感染防控护理中的应用。方法选择2016年6月至2018年1月入院治疗的手足口病患者140例,根据护理方案不同分为对照组和观察组,各70例。两组均予以常规方法对症支持治疗,均采用重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗,对照组采用常规方法护理干预,观察组采用对症护理干预,两组均进行1个月护理。记录并统计两组护理后退热、疱疹结痂、疱疹消退、初次进食及住院时间;采用双抗体夹心法测定两组护理前后C-反应蛋白(CRP)水平;采用酶联免疫吸附试验测定两组护理前后1个月白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(TNF-γ)及白细胞介素-1β(IL-1β)水平;记录并统计两组护理后感染、骨髓抑制、白细胞减少、胃绞痛及嗜酸粒细胞增多发生率,比较两组护理效果及对感染率的影响。结果观察组护理后1个月退热、疱疹结痂、疱疹消退、初次进食及住院时间均短于对照组;观察组与对照组护理后1个月CRP、IL-6、TNF-r和IL-1β水平均低于护理前;观察组治疗、护理后1个月CRP、IL-6、TNF-r和IL-1β水平均低于对照组;观察组护理后1个月感染、骨髓抑制、白细胞减少、胃绞痛及嗜酸粒细胞增多发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论将重组人干扰素α-2b雾化吸入联合高压氧综合治疗用于手足口病患者中有助于缩短症状改善时间,降低炎性因子水平,治疗过程中加强患者对症护理干预有助于降低感染率,值得推广应用。

  • 标签: 重组人干扰素α-2b 雾化吸入 高压氧 手足口病
  • 简介:摘要目的分析α-2b干扰素联合恩替卡韦在慢性乙型肝炎患者中的应用效果及对T淋巴细胞百分比的影响。方法选取2017年1月至2019年1月本院收治的慢性乙型肝炎患者68例,随机分为两组,各34例。对照组给予恩替卡韦治疗,研究组给予α-2b干扰素联合恩替卡韦治疗。观察分析两组患者T淋巴细胞指标变化情况、不良反应发生率以及HBV-DNA不可检测率、HBeAg转换率和HBeAg阴转率变化情况。结果研究组HBV-DNA不可检测率、HBeAg转换率、HBeAg阴转率分别为50.0%(17/34)、67.6%(23/34)、61.8%(21/34),均高于对照组23.5%(8/34)、41.2%(14/34)、35.3%(12/34),差异均有统计学意义(均P<0.05);治疗前,两组患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后,研究组CD4+、CD4+/CD8+水平分别为(47.2±9.8)%、(2.9±1.3),均高于对照组,CD8+水平为(23.4±5.6)%,低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);研究组不良反应发生率为11.8%(4/34),低于对照组35.3%(12/34),差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者应用α-2b干扰素与恩替卡韦联合治疗效果较为理想,可有效减轻患者不适感,改善炎性因子水平,临床可推广使用。

  • 标签: α-2b干扰素 恩替卡韦 慢性乙型肝炎 T淋巴细胞百分比
  • 简介:摘要目的探讨家族序列相似性13A(FAM13A)基因与慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)小气道重塑的关系,及干扰FAM13A基因表达对人气道上皮细胞(16HBE细胞)凋亡和增殖表型的影响。方法收集2018年1月至2020年1月宁夏医科大学总医院胸外科因肺部肿瘤或肺大泡行手术治疗的患者74例,根据肺功能和吸烟史分为4组:肺功能正常不吸烟组(正常组,23例)、肺功能正常吸烟组(吸烟组,24例)、慢阻肺不吸烟组(11例)和慢阻肺吸烟组(16例),采用免疫组化检测各组小气道FAM13A基因表达,并分析其与肺功能气流受限指标的相关性。设计FAM13A基因短片断干扰RNA(shRNA)片段,构建和包装FAM13A基因shRNA慢病毒载体,转染16HBE细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹法检测FAM13A基因表达水平,并筛选最佳shRNA序列。运用流式细胞技术检测细胞凋亡率和细胞增殖标志物Ki-67荧光强度。结果FAM13A主要表达于小气道上皮细胞的胞质,慢阻肺不吸烟组和慢阻肺吸烟组小气道上皮细胞FAM13A吸光度(A)值均高于正常组和吸烟组(0.365±0.026、0.412±0.053比0.113±0.018、0.105±0.009,均P<0.05),且其与肺功能气流受限指标第一秒用力呼气容积(FEV1)与用力肺活量(FVC)的比值(FEV1/FVC)及FEV1占预计值百分比(FEV1%pre)呈负相关(r=-0.48和r=-0.40,均P<0.05)。成功构建FAM13A基因shRNA慢病毒载体,并在16HBE细胞系上实现FAM13A干扰。转染16HBE细胞后,shRNA的靶标序列2(shRNA-target-2)的FAM13A表达量降低(均P<0.01);相比于阴性对照组(shRNA-NC),FAM13A shRNA组细胞凋亡率降低(P=0.023),且Ki-67荧光强度也降低(P=0.042)。结论FAM13A基因在慢阻肺小气道上皮细胞中表达增高,且与慢阻肺气流受限相关,FAM13A基因可能通过影响人气道上皮细胞凋亡和增殖而参与慢阻肺小气道重塑的过程。

  • 标签: 肺疾病,慢性阻塞性 气道重塑 细胞凋亡 细胞增殖 家族序列相似性13A基因
  • 简介:【摘要】目的:探讨高频电刀宫颈电圈切除术配合重组人干扰素注射液及壳聚糖妇科凝胶在治疗宫颈上皮内瘤变CINI~CINⅢ合并高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染中的应用。方法:随机抽取60例宫颈CINI~CINⅢ合并高危型HPV感染患者,按照随机数表法分为观察组、对照组,每组30例。观察组实施高频电刀宫颈电圈切除术配合重组人干扰素注射液及壳聚糖妇科凝胶治疗,对照组仅给予高频电刀宫颈电圈切除术,对比疗效。结果:观察组治疗总有效率、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于对照,且CD8+低于对照组(P<0.05);两组不良反应比较无明显差异(P>0.05)。结论:高频电刀宫颈电圈切除术配合重组人干扰素注射液及壳聚糖妇科凝胶在治疗宫颈

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  • 简介:摘要目的研究高氧暴露和小分子干扰RNA(siRNA)对A549细胞中细胞核转录相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)表达的影响,探讨其在高氧肺损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法将体外培养A549细胞随机分为4组:Ⅰ组为无干扰空气组;Ⅱ组为无干扰高氧组;Ⅲ组为Nrf2 siRNA转染空气组;Ⅳ组为Nrf2 siRNA转染高氧组;将Ⅱ组、Ⅳ组持续暴露于常压高浓度氧(950 mL/L O2,50 mL/L CO2)中;Ⅰ组、Ⅲ组仍置于50 mL/L CO2培养箱中。通过预实验从目的基因靶点siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3(分别加入对应脂质体复合物)中筛选出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot分别检测4组Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表达水平,应用免疫荧光和激光共聚焦显微镜分析干扰Nrf2后A549细胞中Nrf2、kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、抗氧化物反应元件蛋白的分布,观察各组细胞凋亡情况。结果1.Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表达,siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组Nrf2 mRNA表达均被抑制,其中siRNA-1组的抑制效率最高(80.57%)。2.Ⅱ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为4.553±0.498和5.866±0.582,与Ⅰ组相比,mRNA及蛋白表达量显著增高,细胞凋亡率[(21.67±0.75)%]增加,差异均有统计学意义(均P<0.01)。3.Ⅳ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为0.937±0.057和0.789±0.058,与Ⅱ组相比,mRNA及蛋白表达显著减弱,细胞凋亡率[(35.83±0.42)%]进一步增高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论高氧暴露和siRNA导致A549细胞中Nrf2和NQO1表达异常,提示Nrf2和NQO1参与高氧肺损伤的发病过程;Nrf2、NQO1可能在高氧所致肺损伤及细胞凋亡中发挥保护作用。

  • 标签: 高氧肺损伤 核转录相关因子-2 NAD(P)H:醌氧化还原酶1 早产
  • 简介:摘要目的比较浙江省新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)患者早期接受阿比多尔+洛匹那韦/利托那韦+重组干扰素α-2b(Recombinant interferon α-2b,rIFNα-2b)三药联合与洛匹那韦/利托那韦+rIFNα-2b二药联合的抗病毒效果。方法对2020年1月22日至2月16日浙江省15家医疗机构纳入的237例新冠肺炎患者开展多中心、前瞻性研究。所有患者均接受rIFNα-2b(500万U,2次/d)雾化吸入治疗,其中196例患者同时口服阿比多尔(200 mg,3次/d)+洛匹那韦/利托那韦(2片,1次/12 h)作为三联抗病毒治疗组,41例患者口服洛匹那韦/利托那韦(2片,1次/12 h)作为二联抗病毒治疗组;进一步将接受三联抗病毒治疗患者分为48 h内、3~5 d和>5 d开始抗病毒治疗组。比较三联和二联抗病毒药物,以及三联药物不同抗病毒时间的治疗效果。采用SPSS 17.0软件对数据进行分析。结果三药联合治疗组呼吸道标本病毒核酸转阴时间为(12.2±4.7) d,较两药联合组[(15.0±5.0) d]时间缩短(t=6.159,P<0.01)。三药联合治疗组住院中位时间[12.0(9.0,17.0) d ]亦短于两药联合治疗组[15.0(10.0,18.0) d](H=2.073, P<0.05)。三药联合治疗组在48 h内、3~5 d以及>5 d开始抗病毒治疗,从发病到病毒核酸转阴的中位时间分别为13.0(10.0,17.0)、17.0(13.0,22.0)和21.0(18.0,24.0) d,从抗病毒到病毒核酸转阴的平均时间分别为(11.8±3.9)、(13.5±5.1)和(11.2±4.3) d,三组之间差异具有统计学意义(Z=32.983和6.722,P<0.01或<0.05)。结论三药联合治疗组较二药联合治疗组可以缩短呼吸道标本病毒核酸转阴时间和住院时间,且三药联合抗病毒治疗时间越早,病毒核酸转阴时间越快。

  • 标签: 新型冠状病毒肺炎 抗病毒治疗 阿比多尔 洛匹那韦/利托那韦 重组干扰素α-2b