简介:目的建立裂解液加热煮沸法抽提血液HBVDNA的方法。方法选取浓度分别为10^6、10^5、10^4、10^3copies/ml的HBVDNA阳性血清,采用5种方法抽提HBVDNA,并用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测抽提产物。结果在HBVDNA浓度为10^6、10^5、10^4copies/ml时5种抽提法(异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/kit/SDS加热煮沸/chelex-100加热煮沸)均能得到阳性结果,而在HBVDNA为低浓度10^3copies/ml时,只有异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/chelex-100加热煮沸能得到阳性结果。结论chelex-100裂解液加热煮沸抽提HBVDNA操作简便、省时、经济,为血液标本HBV基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。
简介:摘要目的研究四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种的传代稳定性,确保毒种适用于疫苗生产。方法将WHO推荐的季节性流感疫苗甲型H1N1和H3N2、乙型BV和BY病毒株(原始种子批)在鸡胚中传代扩增,制备生产用主种子批和工作种子批毒种。按中国药典2015年版三部的要求对毒种进行检定,包括鉴别试验、病毒滴度和血凝滴度测定、外源微生物检查等。将毒种连续传10代,用反转录PCR扩增第2、3、4、5、10代病毒鸡胚尿囊液中的血凝素和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的基因片段,并进行序列测定,分析传代过程中血凝素和NA的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果主种子批和工作种子批毒种的抗原性均与推荐的病毒株一致。各型病毒滴度均>6.5 lg半数鸡胚感染量/ml,血凝滴度均≥1∶160。2个种子批的支原体和无菌检查结果均为阴性,主种子批外源性禽白血病病毒和禽腺病毒检查结果亦为阴性。毒种在鸡胚中连续传代后,各型病毒株血凝素和NA的核苷酸序列同源性均>99%,氨基酸序列同源性均为100%。结论四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种具有良好的传代稳定性,可用于疫苗生产。
简介:摘要:急冷系统的日常运行维护的目的就是让设备有效率的运转,提高使用寿命,延长装置的运行周期,提高产品的整体收率,产生更大的效益。急冷系统的维护大体分为急冷油系统的维护,焦油系统的维护,急冷水、工艺水系统的维护。本文主要介绍了急冷系统的排放步骤及注意事项。
简介:摘要:挤管工艺作为一种成熟工艺,不仅生产效率高、制造成本相比于焊接等工艺较低,而且不会额外增加产品重量。对座椅高调功能的四连杆机构应用该工艺紧固前后横管与连杆不仅有效率高、成本低等优点,而且该工艺可在不影响连接强度的前提下使用更薄的管壁厚,实现轻量化。本文针对某项目座椅在侧向耐久试验中后横管在齿板处的挤管凸包开裂的原因分析验证,最终确认导致失效的主因,并提供了一种低成本、效果显著的改善方案。