简介：摘要目的探讨动态对比增强MRI（DCE-MRI）定量参数评估软组织肿瘤生物学行为的价值。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月青岛大学附属医院经病理证实的69例软组织肿瘤患者的临床资料。所有患者术前行常规MRI平扫及DCE-MRI检查，经后处理软件分析获得肿瘤的DCE-MRI参数，包括容量转移常数（Ktrans）、速率常数（Kep）、血管外细胞外间隙容积分数（Ve）。术后病理切片通过免疫组织化学方法检测微血管密度（MVD）和Ki-67标记指数（Ki-67 LI）。利用Spearman相关检验分析DCE-MRI定量参数与MVD、Ki-67 LI的相关性。采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验比较良恶性软组织肿瘤间各参数的差异。绘制受试者操作特征（ROC）曲线，评估参数诊断良、恶性软组织肿瘤的效能。结果Ktrans、Kep与MVD呈正相关（r值分别为0.633、0.727，P<0.01），与Ki-67 LI亦呈正相关（r值分别为0.557、0.612，P<0.01），Ve与MVD、Ki-67 LI间无相关性（P>0.05）。恶性软组织肿瘤Ktrans、Kep、MVD、Ki-67 LI均高于良性软组织肿瘤，差异有统计学意义（P<0.05），Ve值差异无统计学意义（P>0.05）。Ktrans和Kep诊断良、恶性软组织肿瘤的ROC曲线下面积分别为0.859和0.846，鉴别良、恶性软组织肿瘤的灵敏度分别为84.6%、92.3%，特异度分别为85.8%、83.3%。结论DCE-MRI定量参数Ktrans、Kep可以用于评估软组织肿瘤的生物学行为。

简介：目的探讨保罗样激酶1（plk1）在胃癌组织中的表达情况以及与胃癌临床病理指标、患者预后的关系。方法采用免疫组织化学回顾检测plk1在89例切除胃癌组织中的表达，分析其与胃癌临床病理学指标的关系；并分析on,1表达与患者生存的关系。结果plk1在胃癌组织中的阳性率为42．7％（38／89），明显高于邻近非癌组织的13．5％（12／89）（P〈0．01）。plk1基因表达与胃癌的分化程度、浸润深度、TNM分期密切相关（P〈0．05）。plk1表达阳性患者的预后明显较阴性患者差（P〈0．05）。结论plk1基因可能在胃癌发生发展中起促进作用，其过表达程度可作为胃癌的某些生物学行为及判定预后的新的参考指标。

简介：摘要目的病期虽然是影响胃癌预后的主要因素之一，但生物学行为不同的胃癌患者，其预后也大不相同，说明胃癌的生物学行为同样具有重要意义。本研究探讨相同病期下不同生物学行为胃癌患者的临床病理特征，并分析其对预后的影响，为外科治疗提供合理可靠的临床依据。方法采用回顾性队列研究的方法。收集1980年1月至2012年12月期间，中国医科大学附属第一医院胃肠肿瘤外科行根治性手术的进展期胃癌病例资料。研究对象纳入标准：（1）术后病理证实为进展期胃癌；（2）行根治性手术，均为R0切除；（3）随访资料完整，无失访。排除标准：（1）既往胃部手术史，术前接受新辅助治疗，术前影像学检查发现有远隔脏器转移；（2）年龄<18岁或>90岁的患者；（3）缺乏临床、病理或随访数据。采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Log-rank检验进行预后单因素分析。Cox比例风险回归模型进行预后多因素分析，比较相同病期下不同生物学行为预后的差异。结果全组共计2 522例患者，肿瘤TNM分期中，Ⅰ期（ⅠB期，T2N0M0）246例、ⅡA期422例、ⅡB期474例、ⅢA期681例、ⅢB期441例、ⅢC期256例，其5年生存率依次为79.9%、68.5%、56.1%、39.5%、22.5%和8.1%，差异比较有统计学意义（P<0.001）。预后单因素分析及多因素分析结果显示：（1）Ⅰ期胃癌患者，大体类型为浸润型（HR=1.806，95% CI：1.174~2.780，P=0.007）、生长方式为弥漫型（HR=1.370，95% CI：1.007~1.864，P=0.045）和淋巴管癌栓阳性（HR=2.073，95% CI：1.333~3.224，P=0.001）是影响其预后的独立危险因素；（2）ⅡA期胃癌患者，肿瘤大体类型为浸润型（HR=1.376，95% CI：1.008~1.878，P=0.044）、肿瘤生长方式为弥漫型（HR=1.263，95% CI：1.061~1.505，P=0.009）和淋巴管癌栓阳性（HR=2.296，95% CI：1.753~3.008，P<0.001）为影响其预后的独立危险因素；（3）ⅡB期胃癌患者，大体类型为浸润型（HR=1.445，95% CI：1.056~1.976，P=0.021）和淋巴管癌栓阳性（HR=1.528，95% CI：1.194~1.955，P=0.001）是影响其预后的独立危险因素；（4）ⅢA期胃癌患者，肿瘤大体类型为浸润型（HR=1.395，95% CI：1.095~1.777，P=0.007）、淋巴管癌栓阳性（HR=1.583，95% CI：1.315~1.905，P<0.001）和浆膜分型（腱状型+多彩弥漫型）（HR=1.188，95% CI：1.102~1.282，P<0.001）是影响预后的独立危险因素；（5）ⅢB期胃癌患者，大体类型为浸润型（HR=1.485，95% CI：1.063~2.076，P=0.021）、淋巴管癌栓阳性（HR=1.315，95% CI：1.060~1.631，P=0.013）和浆膜分型（腱状型+多彩弥漫型）（HR=1.146，95% CI：1.052~1.248，P=0.002）是影响预后的独立危险因素；（6）ⅢC期胃癌患者，肿瘤大体类型为浸润型（HR=2.986，95% CI：1.293~6.898，P=0.010）、浆膜分型（腱状型+多彩弥漫型）（HR=1.135，95% CI：1.003~1.283，P=0.045）是影响预后的独立危险因素。结论相同TNM分期下，不同的生物学行为其预后大不相同，提示胃癌的生物学行为对患者的预后判断和个体化治疗的指导与病期同样具有重要意义。

简介：摘要目的探讨miR-146a对食管鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及细胞周期等生物学行为的影响及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-146a在食管鳞癌细胞株Eca109、KYSE140和KYSE150中的表达。将miR-146a模拟物转染Eca109细胞，上调miR-146a的表达，采用细胞增殖实验检测细胞的增殖能力，Transwell实验检测细胞的侵袭能力，划痕实验检测细胞的迁移能力，流式细胞术检测细胞的凋亡和细胞周期。运用相关生物信息学技术预测miR-146a的靶基因，采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-146a与靶基因白介素1受体相关激酶1(IRAK1)3′端非翻译区(3′UTR)的结合情况，RT-qPCR技术和Western blot法分别检测靶基因mRNA和蛋白的表达。结果食管鳞癌Eca109、KYSE140和KYSE150细胞中miR-146a的相对表达量分别为0.36±0.05、0.16±0.06和0.09±0.02，均低于食管正常上皮细胞HEEC(1.00±0.05，均P<0.01)。miR-146a模拟物转染Eca109细胞后，细胞的吸光度值、穿膜细胞数[(52±18)个]、划痕减少距离[48 h为(25.29±0.77)μm，72 h为(30.66±0.91)μm]均明显低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.01)，早期凋亡率[(6.13±0.91)%]高于阴性对照组[(2.50±0.68)%，P<0.01]和空白对照组[(1.70±0.20)%，P<0.01]；G1期细胞百分比[(44.74±6.76)%]较阴性对照组和空白对照组减少(均P<0.05)，G2/M期细胞百分比[(41.88±2.88)%]较阴性对照组和空白对照组增多(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示，共转染IRAK1 WT和miR-146a模拟物组的荧光素酶活性明显低于其他对照组(均P<0.01)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示，miR-146a模拟物转染组细胞中IRAK1 mRNA的表达水平为1.02±0.28，蛋白的表达水平为1.00±0.05，均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.01)。结论miR-146a在食管鳞癌细胞株中表达降低，扮演着抑癌基因的角色。miR-146a能抑制食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移，促进其凋亡，阻滞细胞周期于G2/M期。miR-146a可能通过IRAK1的介导调控食管癌细胞的恶性生物学行为。

简介：目的对比研究纯钛表面不同微纳米图案对成骨细胞生物学活性的影响，探讨微米与纳米结构在影响细胞行为当中的不同作用。方法制备4组纯钛微纳米复合表面形貌：喷砂（S）、喷砂-酸蚀（SLA）、喷砂-碱热（SAH）及喷砂-阳极氧化（SAN）。检测各组材料表面理化性能，扫描电镜观察各组材料表面形貌及细胞黏附形态，CCK-8法测定细胞在材料表面增殖能力，碱性磷酸酶（ALP）活性检测细胞在材料表面分化能力。利用单因素方差分析进行统计分析，最小有意义差异（LSD）t检验对同时间点不同组的CCK-8及ALP结果进行比较。结果（1）粗糙度结果示：SLA组粗糙度大于其余3组，差异有统计学意义（FRa=38.449，PRa＜0.001；FRq=29.564，PRq＜0.001）。（2）扫描电镜示：S组仅形成弹坑状一级微米结构，黏附细胞伪足短小，SLA、SAH及SAN组分别修饰沟壑状、网状及管状二级纳米多孔图案，细胞于SAH、SAN组表面伪足更为伸展，其中SAH组表面细胞伪足生长进入孔隙形成机械锁结。（3）CCK-8结果示：第5天，SAH和SAN组细胞增殖A值（1.546和1.528）显著高于S组（1.31），差异有统计学意义（F=3.229，P=0.042）；第7天时，SAH和SAN组细胞增殖A值（2.646和2.57）显著高于S组（2.24），差异有统计学意义（F=3.51，P=0.035）。（4）细胞分化检测示：接种7d后，SAH组ALP活性（77.656）显著高于S、SLA及SAN组（53.132、51.052和62.207），差异有统计学意义（F=29.734，P＜0.001）；接种14d后，SAH与SAN组ALP活性（104.107和109.963）显著高于S与SLA两组（82.885和73.303），差异有统计学意义（F=46.052，P＜0.001）。结论钛片表面微纳米图案影响细胞伪足形态，促进细胞增殖及ALP活性，其中多孔形貌显著增加细胞活性，碱热处理表面早期ALP活性显著增加，且形成纳米网比纳米管更有利于形成机械锁结

简介：摘要目的探讨乳铁蛋白对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制。方法复苏冻存的人胶质母细胞瘤细胞株U87MG后，应用MTT法检测不同浓度(0、100、200及300 μg/mL)乳铁蛋白对U87MG细胞增殖能力的影响，以筛选最适药物浓度。将U87MG细胞分为空白对照组与乳铁蛋白(200 μg/mL)处理组，应用Edu染色、Transwell实验、Mito-Tracker染色、DCFH-DA染色检测2组细胞的增殖情况、迁移情况及线粒体活性、活性氧生成水平，应用免疫荧光化学染色检测2组细胞中自噬标志蛋白微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)的免疫荧光染色强度，应用化学比色法检测2组细胞中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，应用RT-PCR法检测2组细胞中上皮-间充质转化过程相关基因(E-钙黏蛋白、纤连蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白及Snail)的表达，应用Western blotting检测2组细胞中凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)的表达。结果与空白对照组比较，乳铁蛋白处理组中Edu阳性细胞比例、细胞迁移数目、Mito-Tracker阳性细胞比例明显降低，DCFH-DA阳性细胞比例明显升高，细胞质中LC3B免疫荧光染色强度明显升高，SOD含量明显降低，MDA含量明显升高，E-钙黏蛋白mRNA表达明显降低，纤连蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白及Snail mRNA表达明显升高，Bax蛋白表达明显升高，Bcl-2蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论乳铁蛋白可有效抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学行为，其机制与调控线粒体活性密切相关。

简介：摘要目的建立大鼠肺动脉内皮细胞(PAEC)、肺静脉内皮细胞(PVEC)以及肺微血管内皮细胞(PMVEC)的体外分离和培养方法，分析3种肺血管内皮细胞的生物学特征及功能。方法本研究为实验研究。精分1只雄性SD大鼠肺动脉、肺静脉，肺组织取边缘剪碎，各样本分别用混合酶液消化，以血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)免疫磁珠法分选内皮细胞，用内皮细胞专用培养基培养。倒置显微镜下观察3种肺血管内皮细胞的形态差别，通过免疫荧光鉴定各组细胞纯度。通过免疫荧光和Western blot观察3组细胞血管性血友病因子(vWF)和平滑肌激动蛋白抗体(α-SMA)蛋白表达情况。通过基质胶体外成环实验比较3组细胞1.5、2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、7.5 h成环情况。采用SPSS 22.0和FlowJo 10软件进行统计学分析和统计作图。结果3组细胞24 h后均迅速贴壁，vWF免疫荧光染色均为阳性。3组细胞形态均为铺路石状，其中PAEC为典型的铺路石状，大多数呈椭圆形；而PVEC、PMVEC形态更细长。免疫荧光显示PVEC和PMVEC细胞浆内少量α-SMA蛋白弥散表达[(0.16±0.03)、(0.23±0.01)]，而PAEC中几乎观察不到α-SMA蛋白表达(0.06±0.01)。随着时间推移，3种肺血管内皮细胞成环周长均呈先上升后下降趋势，其中PVEC组成环长度最长。3组细胞成环周长在组间、时点间、时间和组间交互作用差异均具有统计学意义(P值均<0.01)。结论该方法所获得的3种肺血管内皮细胞纯度高，可在体外稳定培养。3种血管内皮细胞生物学功能有差别，其中PVEC体外成环能力最强。PAEC细胞表达α-SMA蛋白量最少。

简介：摘要目的探讨甲基化CpG集合蛋白2(MeCP2)对晶状体上皮细胞(LECs)生物学行为和上皮－间质转化(EMT)发生的作用及其可能机制。方法根据细胞中转染物序列不同将人晶状体上皮细胞株SRA01/04分为MeCP2类似物组、MeCP2-空质粒组和小干扰RNA-MeCp2(si-MeCP2)组，分别将相应序列的质粒转染SRA01/04细胞。转染后24 h采用逆转录PCR法检测各组细胞中MeCP2 mRNA相对表达量；于转染后48 h采用划痕试验检测细胞迁移率；采用免疫荧光染色测定细胞内Wnt3a蛋白表达；采用Western blot法检测细胞内β-catenin、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-7和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)蛋白表达。结果转染后24 h，MeCP2-拟似物组、MeCP2-空质粒组和si-MeCP2组细胞中MeCP2 mRNA相对表达量总体比较，差异有统计学意义(F＝4 773.00，P<0.001)。划痕试验结果显示，MeCP2-拟似物组、MeCP2-空质粒组和si-MeCP2组细胞迁移率分别为(57.45±5.20)%、(32.71±10.02)%和(17.77±9.22)%，总体比较差异有统计学意义(F＝124.00，P<0.001)，其中si-MeCP2组细胞迁移率明显低于MeCP2-拟似物组和MeCP2-空质粒组，差异均有统计学意义(均P<0.001)。MeCP2-拟似物组、MeCP2-空质粒组和si-MeCP2组细胞中Wnt3a蛋白荧光强度(A值)分别为75.92±6.10、52.03±5.22和28.75±3.39，总体比较差异有统计学意义(F＝221.30，P<0.001)，其中MeCP2-mimics组显著高于MeCP2-CN组，si-MeCP2组细胞中Wnt3a蛋白荧光强度明显低于MeCP2-空质粒组和MeCP2-拟似物组，差异均有统计学意义(均P<0.001)。si-MeCP2组细胞内E-cadherin蛋白相对表达量明显高于MeCP2-拟似物组和MeCP2-空质粒组，细胞中β-catenin、Vimentin、MMP-9和MMP-7蛋白相对表达量明显低于MeCP2-拟似物组和MeCP2-空质粒组，差异有统计学意义(均P<0.01)。MeCP2-拟似物组、MeCP2-空质粒组和si-MeCP2组细胞内SFRP5蛋白相对表达量分别为27.19±0.03、47.54±0.05和74.93±0.05，总体比较差异有统计学意义(F＝183.49，P<0.001)，其中si-MeCP2组细胞内SFRP5蛋白相对表达量明显高于MeCP2-拟似物组和MeCP2-空质粒组，差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论MeCP2能刺激人LECs发生EMT，其作用机制可能与其靶向抑制SFRP5表达，继而激活Wnt3a/β-catenin信号通路有关。

简介：摘要胰腺神经内分泌肿瘤(pNETs)是一类异质性较高的肿瘤，多为实性，囊性较少。近年来随着CT、MRI等断层影像学检查技术的发展和广泛应用，极大地提高了无症状囊性pNETs的检出率。目前，囊性pNETs的病因仍不明确，存在多种假说，但尚缺乏研究结果验证。与实性pNETs比较，囊性pNETs多为无功能性和无症状，生物学行为更为惰性，具有较低的Ki－67增殖指数和核分裂象，较少发生淋巴结和远处器官转移，其长期预后亦优于实性pNETs，但应警惕仍有部分囊性pNETs具有侵袭性的生物学行为。囊性pNETs无特异性影像学特征，术前定性诊断仍具有挑战性。超声内镜检查联合细针穿刺可极大提高囊性pNETs诊断的灵敏度与特异度。应根据患者临床症状、肿瘤部位、肿瘤大小、囊性成分比例及危险因素分析等综合评估后个性化制订囊性pNETs治疗方案。手术是囊性pNETs的标准治疗方法，但鉴于其相对惰性的生物学行为，对于无功能、完全囊性、直径≤2 cm的囊性pNETs亦可考虑定期随诊。笔者结合团队经验及相关文献，对囊性pNETs的病因、临床特征及其诊断与治疗策略进行探讨，旨在为广大外科医师临床治疗提供参考。

简介：摘要目的探讨西咪替丁对胃癌细胞生物学行为干预和影响。方法采用MTT法检测，荧光显微镜，透射电镜观察等方法测定西咪替丁对SGC-7901细胞的影响。结果在0.5-10mmol/L浓度内，西咪替丁对SGC-7901的生长具有显著的抑制作用，并呈时间和剂量依懒性，可观察到典型细胞凋亡形态学改变，流式细胞仪检测可见凋亡峰，G0/G1期细胞明显增多，P<0.05差异有统计学意义。结论西咪替丁可改变细胞周期分别，诱导SGC-7901细胞凋亡，从而抑制细胞增殖。

简介：应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对42例膀胱移行细胞癌基因rasP21表达进行了定量分析,并结合患者随访结果进行回顾性研究。结果表明,rasP21表达与肿瘤细胞分化程度及浸润情况密切相关。rasP21表达与肿瘤复发也具有相关性,在复发的膀胱肿瘤中,P21阳性表达（87.5％）,显著高于P21阴性表达（12.5％）。

简介：摘要目的探讨热疗（HT）对舌鳞癌细胞系CAL-27铁死亡的调控作用和可能机制。方法采用CCK-8法检测铁死亡抑制剂Fer-1的半抑制浓度（IC50）并用于后续实验。CAL-27细胞系按实验设计分为HT组、对照组、Fer-1组以及HT+Fer-1组。采用各自检测试剂盒检测活性氧水平、铁离子浓度，采用实时反转录PCR检测p53、转铁蛋白受体1（TfR1）的mRNA水平，细胞划痕法检测细胞迁移，流式细胞术检测细胞凋亡。结果热疗组CAL-27细胞系活性氧水平（P<0.01）和铁离子浓度（P<0.001）显著上调，p53及TfR1的mRNA表达量也明显增加（P值均<0.01），细胞迁移能力下降（P<0.001），凋亡率升高（P<0.01）。HT+Fer-1组与HT组相比活性氧水平（P<0.001）、铁离子浓度（P<0.001）、p53及TfR1的mRNA表达量均降低（P值均<0.01），细胞迁移能力恢复（P<0.01），凋亡率也降低（P<0.01）。结论热疗可能通过激活p53/TfR1通路诱导舌鳞癌细胞系CAL-27铁死亡，抑制其迁移能力并促进其凋亡。

简介：摘要目的观察丝氨酸/精氨酸蛋白特异性激酶1(SRPK1)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并进一步探究其分子机制。方法利用Oncomine癌症数据库分析SRPK1基因在膀胱癌组织及正常膀胱组织中的表达；构建SRPK1特异的慢病毒干扰质粒(sh1和sh2)和阴性对照质粒(NC)，包装慢病毒颗粒，分别感染T24细胞和5637细胞。设空白对照组(T24和5637)、阴性对照组(T24/NC和5637/NC)、干扰组1(T24/sh1和5637/sh1)和干扰组2(T24/sh2和5637/sh2)；采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞中SRPK1 mRNA和蛋白水平的表达变化；采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力的变化；采用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测各组细胞迁移和侵袭能力的变化；采用Western blot检测各组细胞上皮间质转化(EMT)及AKT通路相关蛋白表达变化。结果Oncomine癌症数据库中SRPK1 mRNA在膀胱癌组织中的表达明显高于正常膀胱组织(P<0.001)。通过qRT-PCR和Western blot检测结果显示病毒感染后的细胞SPRK1在mRNA和蛋白水平均明显下调；在慢病毒感染后的T24细胞中，第3~5天干扰组的吸光度值均低于阴性对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)；在慢病毒感染后的5637细胞中，第2~5天干扰组的吸光度值均低于阴性对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)；Transwell细胞迁移和侵袭实验显示：与阴性对照组比较，干扰组的迁移和侵袭的膀胱癌细胞数目均明显减少，差异均有统计学意义(均P<0.05)；Western blot结果显示，与阴性对照组比较，干扰组的E-cadherin表达量增加，而N-cadherin和vimentin的表达明显减少，同时AKT通路蛋白p-AKT及p-GSK3β明显下调，差异均有统计学意义(P<0.001)。结论SRPK1基因在膀胱癌组织中高表达，下调SRPK1的表达可抑制膀胱癌细胞的增殖，并降低膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。

简介：摘要目的探讨miR-146b在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma, PTC）细胞增殖、转移和凋亡中的作用及相关机制。方法qRT-PCR检测miR-146b在PTC细胞（NPA、GLAG-66、ONCNO-DG1和B-CPAP）和正常人甲状腺细胞系HTori3中的表达水平。miR-146b抑制剂转染B-CPAP细胞后，通过qRT-PCR检测其抑制效率，利用MTT实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测miR-146b对PTC细胞增殖、侵袭能力及凋亡率的影响。SiRNA-IRAK1转染B-CPAP细胞后，利用MTT实验、细胞划痕实验和流式细胞术分别检测IRAK1对PTC细胞增殖率、转移及凋亡率的影响。利用生物信息学软件预测miR-146b的靶基因白介素1关联受体激酶1（interleukin-1 receptor-associated kinases, IRAK1），并通过双荧光素报告基因实验验证miR-146b对IRAK1的调控作用。应用SPSS 20.0软件进行分析，组间对比采用两独立样本t检验。结果qRT-PCR结果表明，与正常细胞HTori3相比，miR-146b在NPA87、KAT-5、FTC-133和B-CPAP细胞系中表达显著升高，尤以B-CPAP较高[相对表达量1 vs（1.61±0.11）、（1.92±0.21）、（1.93±0.22）、（2.43±0.31），P<0.05]。miR-146b抑制剂转染后可显著降低B-CPAP细胞中miR-146b的表达水平[相对表达量1 vs（0.41±0.12，P<0.01]。MTT结果发现，miR-146b抑制剂可抑制B-CPAP细胞的增殖能力[相对增殖率值1.00 vs（0.52±0.12）、（0.56±0.11）、（0.62±0.12），P<0.05]。流式细胞仪检测发现，miR-146b抑制剂可促进B-CPAP细胞的凋亡能力[（3.74%±0.12%）vs（7.62%±0.21%），P<0.05]。Transwell结果表明，miR-146b抑制剂可减弱B-CPAP细胞的侵袭能力[侵袭细胞数目（280.00±67.00）vs（82.00±32.00），P<0.05]。转染入siRNA-IRAK1后，B-CPAP细胞增殖率显著升高[MTT实验，相对增殖率1 vs（2.11±0.21）、（2.33±0.18）、（2.21±0.16）]、转移能力增强[细胞划痕实验，24 h相对迁移率（0.58%±0.11%）vs（0.81%±0.21%）]且细胞凋亡率显著降低[流式细胞术，相对凋亡率（6.96%±1.12%）vs（24.30±1.52%），P<0.05]。双荧光素酶报告基因结果显示，IRAK1是miR-146b的靶基因[相对荧光素酶活性（0.85±0.11）vs（1.19±0.17），P<0.05]，miR-146b抑制剂可显著上调B-CPAP细胞中IRAK1蛋白的表达水平[相对灰度值1.00 vs（2.76±0.99），P<0.05）]。结论miR-146b可能通过抑制下游靶蛋白IRAK1的表达来促进PTC细胞增殖、转移和抑制细胞凋亡的作用。

简介：摘要子痫前期（Pre-eclampsia，PE）是妊娠期特有的累及多系统的疾病，该病严重威胁母儿健康。多重因素参与该疾病的发生，尽管进行了广泛研究，到目前为止该病的具体发病机制仍未有详细阐述，一直是研究热点。本文将主要从人类白细胞抗原G（humanleukocyteantigen-G,HLA-G）参与调解滋养细胞生物学行为参与PE发生的关系入手，总结众多观点，为该病发病机制研究提供新思路。

简介：摘要目的探讨癌组织中环氧合酶（COX-2）和基质金属蛋白酶（MMP-7）的表达与胃癌组织生物学行为的关系。方法选取55例进展期胃癌手术的切除标本，以免疫组织化学SP法检测病灶中COX-2和MMP-7的表达情况。分析COX-2和MMP-7的表达与临床病理因素的关系。结果COX-2和MMP-7的阳性表达率分别为63.6%和72.7%。COX-2的阳性表达率与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期先关（P＜0.05）;MMP-7的阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期先关（P＜0.001），而与肿瘤大体类型和分化程度无关（P＞0.05）,胃癌组织中COX-2和MMP-7的表达呈等级正相关（P＜0.001）。结论COX-2和MMP-7与胃癌组织生物学行为密切相关，其高表达是胃癌组织高侵袭能力和预后不良的标志之一。COX-2和MMP-7可作为反应胃癌组织侵袭转移及判断预后的生物学指标。

简介：摘要目的探讨自噬标志基因Beclin1过表达对黑素瘤SK-MEL-2细胞生物学行为的影响。方法Western印迹技术检测黑素瘤细胞A375、SK-MEL-2中Beclin1的蛋白表达水平，选取低表达Beclin1蛋白的SK-MEL-2细胞株作为研究对象，将细胞分为空白组、阴性对照组、实验组，空白组不作处理，阴性对照组转染pcDNA.3.1/myc-His（-）A，实验组转染pcDNA3.1-Beclin1质粒。培养一定时间后，采用CCK8法分析Beclin1对细胞增殖的影响；Transwell实验和细胞划痕实验观察Beclin1过表达对SK-MEL-2细胞侵袭和迁移能力的影响。采用重复测量方差分析和完全随机设计方差分析检验各组间的指标差异，组间比较采用LSD-t检验。结果SK-MEL-2细胞Beclin1蛋白相对表达水平（0.037 ± 0.010）显著低于A375细胞（0.670 ± 0.150），F = 46.62，P<0.05。实验组Beclin1蛋白相对表达水平（0.32 ± 0.04）显著高于阴性对照组（0.06 ± 0.02）和空白组（0.07 ± 0.02），均P<0.05。CCK8实验结果显示，不同组间、不同时间细胞增殖率差异均有统计学意义（F组间 = 1 077.36，F时间 = 4 903.04，均P<0.05），组别和时间之间有交互作用（F交互 = 205.20，P<0.05）。Transwell实验显示，24 h后实验组高倍（× 200）视野下穿过小室的细胞数（18.67 ± 1.19）明显低于阴性对照组（87.89 ± 6.05）和空白组（86.78 ± 5.93），均P<0.05；划痕实验中24、48 h时实验组细胞迁移距离均显著低于空白组和阴性对照组（P<0.05）。结论Beclin1过表达可显著抑制SK-MEL-2细胞的增殖、侵袭和迁移。

简介：摘要采用CCK8检测胰腺癌PANC1细胞的存活率，划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法检测与细胞增殖、凋亡及上皮间质转化相关的蛋白表达等方法探讨黄芪甲苷对胰腺癌PANC1细胞恶性生物学行为的影响。结果显示，黄芪甲苷干预PANC1细胞后可抑制细胞的存活率，显著减少迁移和穿膜的细胞数量，影响相关蛋白的表达，提示黄芪甲苷抑制胰腺癌PANC1细胞生长的机制可能与其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制上皮间质转化过程有关。

简介：目的探讨胃组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiaml）基因的表达与胃癌生物学行为的相关性。方法应用S—P免疫组化法，对40例胃癌手术切除标本进行抗人MMP-2单克隆抗体和Tiaml多克隆抗体免疫组化染色，检测癌组织、癌旁组织、手术切缘区正常组织各区域MMP-2和Tiaml蛋白表达，并分析二者之间及二者的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果MMP-2和Tiaml蛋白表达在癌组织与手术切缘区正常组织、癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常手术切缘区组织之间差异均具有显著性。癌组织中MMP-2和Tiaml蛋白表达在患者性别、年龄之间无显著性差异，而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结及远处转移、临床TNM分期均呈正相关；且两种蛋白表达彼此间具有相关性，即同时表达阳性的胃癌病例具有更为恶性的生物学特征。结论MMP-2和Tiaml在胃癌的发生和侵袭转移中可能起着重要作用，检测MMP-2和Tiaml的表达有望成为判断胃癌病变发展、预测肿瘤转移潜能的客观指标。

简介：摘要目的观察脯氨酸羟化酶-2(PHD-2)对肝细胞肝癌(HCC)生物学行为的影响并探讨机制。方法应用2006年1月至2010年12月郑州大学第一附属医院HCC患者组织建立Hep3B肝癌细胞株，建立HCC裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植瘤模型，PHD-2沉默组利用瘤体内注射的方式将胆固醇修饰的PHD-2 RNA干扰(RNAi)注射入瘤体内，同时设立空白组(不做处理)和生理盐水对照组(注射生理盐水)进行对照研究，每4 d注射1次，观察并记录裸鼠的瘤体生长变化，开始注射药物后第16天处死裸鼠，采集瘤体标本用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测PHD-2、p-Smad2/3及癌基因c-Myc的表达。采用免疫组织化学技术(IHC)检测220例HCC临床标本中c-Myc的表达，分析其与PHD-2以及HCC患者临床病理特征的相关性。计数资料进行χ2检验，相关性分析采用Spearman等级相关检验。结果(1)在HCC裸鼠移植瘤模型中PHD-2沉默组裸鼠瘤体增长缓慢(F＝15.607，P<0.05)，差异有统计学意义。瘤体标本中PHD-2沉默组p-Smad2/3表达水平明显高于空白组和对照组(0.589±0.074比0.086±0.012、0.091±0.008，F＝286.537，P<0.05)，差异有统计学意义，而PHD-2沉默组c-Myc的表达水平明显低于其他两组(0.108±0.004比0.539±0.023、0.592±0.087，F＝189.468，P<0.05)，差异有统计学意义。(2)IHC技术检测220例HCC临床标本中PHD-2及c-Myc的表达，c-Myc的高表达与肿瘤体积较大、分化程度较低、TNM分期较晚、高水平的甲胎蛋白显著相关，与PHD-2的表达显著相关(r＝0.557，P<0.01)。结论PHD-2的高表达可以促进HCC细胞在体内的增殖，PHD-2促进HCC进展的作用有可能是通过抑制TGF-β1-Smad信号通路中的p-Smad2/3表达，进而上调癌基因c-Myc的表达来实现的。