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  • 简介:摘要随着时代的进步,社会的发展,大多数疾病已经可以得到很好的治愈,但是大规模的流感病毒的爆发,仍然困扰着我们,特别是甲型H1N1流感。流感病毒传染性强,变异性强传播速度快,爆发后难以控制,极大的危害了社会的安定和谐,,影响了人们的生活质量。所以及早点了检测发现流感病毒是抑制病毒传播,控制流感病毒爆发程度的最为关键的步骤。现在国内外常用的检测流感病毒的方法主要有血清学检测、核酸扩增法检测、细胞培养法、流感病毒抗原检测法等。但是这些常用的方法耗费大量时间和精力,不适用于流感病毒的快速检查。相反,荧光定量RT-PCR是各种检测方法中最灵敏、最有效、最准确的。所以对于荧光定量RT-PCR检测流感病毒的应用的研究是有很大医学价值。

  • 标签: 荧光定量RT-PCR 检测 流感病毒 应用
  • 简介:摘要探讨乙型肝炎血清标志物和乙型肝炎病毒DNA量之间的关系,分析荧光定量PCR在乙型肝炎检测中的作用。HBVDNA定量是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一,但在指导诊疗时仍需结合血清标记物、肝损害指标乃至HBV基因分型。方法PCR核酸探针杂交法、RELISA、竞争定量PCR、实时荧光定量PCR,本文综述定量检测HBVDNA意义及PCR检测方法。结论实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA是反映HBV复制水平的可靠指标,有助于疾病的诊断及预后判断。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 核糖核酸 实时荧光定量PCR
  • 简介:【 摘要 】 目的: 评价实时荧光定量 PCR 在病毒检测中的应用效果 。 方法: 研究我中心 2019年 3月 ~2019年 9月期间纳入的 158例疑似 HFMD患者,研究中使用到的核酸检测仪器选取 ABI-7300进行 FQ-PCR检测,观察并分析 FQ-PCR检测病毒发生情况。 结果: 经检测, 158例疑似 HFMD患者中, FQ-PCR检测的 EV阳性确诊为 115例,阳性率 72.78%,其中 EV71RAN阳性有 109例, CA16PNA检测的阳性 53例;而 ELISA检测出的 EV阳性确诊为 63例,阳性率 39.87%,两者 差异大, P<0.05。 15例 HFMD患者实行 FQ-PCR检测到的 EV阳性 12例,而 ELISA检测 6例阳性数,差异显著, P<0.05。 结论: 实行 FQ-PCR检测对 HFMD病毒检测率提升,值得临床进一步研究。

  • 标签: 病毒检测 实时荧光定量 PCR 应用效果 评价
  • 简介:近年手足口病(hand-foot-mouthdisease)在儿童中流行情况较为严重,由肠道病毒感染引起,可经消化道、呼吸道传播,易造成流行[1]。主要表现为口腔黏膜溃疡性疱疹及四肢末端水疱样皮疹,主要病原为柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)[2]。1资料与方法1.1研究对象2009年南京儿童医院确诊为手足口病,持续发热并出现嗜睡、易惊、烦躁不安、抽搐等神经、呼吸系统症状,住院隔离治疗的患儿161例。男95例,女66例。年龄最小7个月,最大11岁。手足口病诊断标准参照卫生部办公厅《手足口病诊疗指南(2008年版)》[3]。1.2研究方法1.2.1标本采集征得患

  • 标签: 肠道病毒感染 手足口病 实时荧光定量 检测 柯萨奇病毒 咽拭子
  • 简介:【摘要】目的 利用实时荧光定量PCR针对乙肝DNA开展检测,分析为检测结果产生影响的各方面因素。  方法 此次研究针对300例病例,且全部确诊为乙型肝炎病毒感染,收治开始和结束时间分别为2021年3月、2022年2月,对患者血液标本开展采集,利用实时荧光定量PCR对其进行检测,分析检测结果。   结果 300例标本中,实时荧光定量PCR诊断乙肝DNA准确260例,占比86.67%;漏诊误诊40例,占比13.33%。实时荧光定量PCR诊断准确率和临床诊断无较大差异(P<0.05)。  结论 在针对乙肝DNA进行检测的过程中,使用实时荧光定量PCR可以产生较高的价值,但是可能会出现误诊等情况,所以需要进行综合预防。

  • 标签: 实时荧光定量PCR 乙肝DNA
  • 简介:【摘要】目的:研究荧光定量PCR检测乙型肝炎DNA的效果。方法:纳入169例HBV感染者和31例正常人,使用荧光定量PCR法对其血清HBV-DNA含量进行检测,研究时间是2023年3月-5月。结果:对比HBsAg、HBeAg阴性组,HBsAg、HBeAg阳性组具有更高的HBV-DNA检出率与含量。虽然HBV感染者的类型不同,但是都可检出HBV-DNA。结论:荧光定量PCR检测可以将HBV感染、复制与病程改变准确呈现出来,有利于诊断和治疗乙型肝炎。

  • 标签: 荧光定量PCR 乙型肝炎 DNA
  • 简介:摘要目的探讨实时荧光定量PCR对蕲蛇样品真伪鉴别的准确性。方法采用实时荧光定量PCR法从蕲蛇正品、混伪品中提取DNA,进行引物扩增,并通过Cq值和扩增曲线对样品真伪进行判断。结果3批蕲蛇正品的Cq值均低于30,曲线有明显的指数增长期;2批混伪品无Cq值,曲线为一直线。结论本方法鉴别蕲蛇操作简单,准确率高,重现性好,可行有效。

  • 标签: 实时荧光定量 PCR 蕲蛇 鉴别
  • 简介:摘要目的对聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒进行分析,了解其临床应用价值。方法用中山医科大学达安基因诊断中心设计的HBV-FQ-PCR试剂盒对101份临床血清标本同时进行PCR荧光定量和ELISA肝炎标志物检测,对检测结果进行分析。结果经过FQ-PCR检测,24份HbsAgHbeAgHbcAb都阳性的标本,其血清HBV-DNA也全部阳性,HBV-DNA拷贝数范围在1.4×105-7.0×109/ml之间;32份HbsAgHbeAbHbcAb都阳性的标本,阳性率为46.9%,HBV-DNA拷贝数范围在0-8.1×107/ml之间;14份HbsAb阳性的标本,阳性率为7.1%,HBV-DNA拷贝数范围在0-5.0×104/ml之间;18份全阴性的标本,阳性率为5.6%,HBV-DNA拷贝数范围在0-4.9×105/ml之间。结论FQ-PCR定量检测HBV-DNA灵敏度,特异性较高,能基本反映乙肝病毒在体内的真实复制情况,具有较高的临床应用价值。

  • 标签: 聚合酶链反应 定量 HBV-DNAFluorescence quantitative polymerase chain reaction analysis of hepatitis B viru
  • 简介:摘要目的评价美国ABIPrism®7000荧光定量PCR仪的性能及应用价值。方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准,对120份标本(HBV-DNA)进行定量检测,评价该仪器的准确性、精密度、线性范围、参考范围等指标。结果准确度相对偏倚为0.3%-7.2%;批内不精密度变异系数(CV)为6.36%,批间不精密度变异系数(CV)为7.15%;线性范围1.0E+3IU/ml-1.0E+7IU/ml;参考范围<1.0E+3IU/ml。结论ABIPrism®7000荧光定量PCR仪各项性能指标良好,验证通过。ABIPrism®7000荧光定量PCR仪在病毒基因检测具有高效快捷定量的特点,具有很高的临床价值。

  • 标签: HBV-DNAABI Prism® 7000荧光定量PCR仪性能验证应用价值
  • 简介:摘要目的自制临床基因扩增实验室HBVDNA检测的室内质控品并对其应用进行评价。方法将试剂盒自带的弱阳性对照品、自制未灭活质控血清、自制灭活质控血清作为室内质控品的选择对象,每天与样本一起检测,连续30天,通过不精密度、L-J质控图,t检验,单因素方差分析来评价三者哪一个更适合基层医院PCR实验室作为室内质控品。结果弱阳性对照品检测结果日间不精密度为7.72%,未灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为2.92%,灭活自制质控血清检测结果日间不精密度为3.70%;灭活与未灭活自制质控血清配对t检验,t=-0.860,P=0.397,P>0.05,两组检测结果无显著性差异;对灭活前后两组数据进行单因素方差分析,F=0.901,P=0.346,P>0.05,两组检测结果均值无显著性差异;SPSS17.0统计学软件绘制弱阳性对照品、未灭活自制血清质控品L-J质控图11月份30天的变化情况。结论自制质控血清无需灭活及其他特殊处理,完全能够满足PCR实验室室内质量控制的需要。

  • 标签: HBV DNA 自制质控血清 L-J质控图
  • 简介:摘要目的探讨荧光定量PCR方法检测Epstein-BarrVirusDNA(EBV-DNA)在儿童临床EB病毒感染诊断中的价值。方法对480例表现为不明原因发热、咽炎、肝脾肿大等患儿采用实时荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA。结果检测出238例患儿血浆EBV-DNA阳性,阳性率49.6%,其中男性132例,女性106例,其中阳性结果拷贝数主要集中在4~5次方之间,占44.9%;其次1~4次方32.7%。临床表现以发热、淋巴结肿大、肝脾肿大居多,分别占66.8%、54.6%、65.1%。结论荧光定量PCR方法检测对儿童EB病毒(EBV)感染的检测具有早期、快速等优点,具有广泛的应用价值。

  • 标签: FQ-PCR EB病毒 儿童
  • 简介:摘要:目的 探讨和分析荧光定量 PCR技术在临床微生物检测中的应用价值。方法 采用回顾性分析的方式,在我院 2019年 5月 -10月期间入院接受治疗的患者当中随机选择 75例,统一使用荧光定量 PCR技术进行微生物检测,统计检测结果。结果 这 75例患者当中,共有 70例患者被检测出细菌微生物。分别为沙门氏菌 20例,阳性率为 28.57%。大肠杆菌 40例,阳性率为 57.14%。白色念珠杆菌 10例,阳性率为 14.29%。结论 本次实验研究证明了荧光定量 PCR技术不仅对微生物的检测速度快,而且准确率比较高。在目前有着良好的应用价值,值得在新时期临床诊疗过程中推广使用。

  • 标签: 荧光定量 PCR技术 临床检测 微生物 应用方法
  • 简介:实时荧光定量PCR技术将光谱技术融合于传统PCR技术上,通过荧光信号积累实时监测PCR进程,实现核酸定量,具有特异性强、敏感性高、定量精准、自动化程度高等优点,被广泛运用于分子生物学等领域。本文结合近几年的研究成果,对实时荧光定量PCR技术的原理、检测方法、引物设计以及在家禽遗传育种的应用和存在的问题等进行了综述。

  • 标签: 实时荧光定量PCR 遗传育种 引物设计 家禽
  • 简介:目的:建立SYBRGreenⅠ实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法。方法:依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物,以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版,以TBP基因为参照基因,应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达。结果:POT1和TBP基因熔解曲线为单峰,无杂峰及二聚体。POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同(直线斜率0.0171〈0.1)。POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3%和2.1%;TBP基因批内变异与批间变异分别为1.2%和2.6%。结论:建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测人类POT1基因的方法,该方法简单快速,经济,灵敏度高,特异性和重复性好,可用于人类POT1基因的定量分析。

  • 标签: POT1基因 相对定量 实时荧光定量PCR
  • 简介:摘要目的探讨荧光定量PCR的检测流感病毒中的应用。方法采用实时荧光定量PCR法对60份经胶体金快速检测法筛查检测的标本进行检测,进行统计分析,评估不同方法灵敏度和特异性差异。结果实时荧光定量PCR法和胶体金快速检测法的阳性率分别为78.33%和58.33%,胶体金快速检测法较于实时荧光定量PCR的灵敏度和特异性分别为74.47%和53.85%。结论实时荧光定量PCR检测技术可作为流感防控的病原快速检测技术。

  • 标签: 流感病毒 胶体金快速检测 实时荧光RT-PCR
  • 简介:摘要目的对杭州安杰思医学科技有限公司的AFD9600实时荧光定量PCR仪的主要性能指标进行验证,为其检测结果的可靠性提供依据。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》(CNAS-CL36)和美国临床实验室标准化协会(CLSI)制定的验证标准,验证该仪器精密度、正确度、线性以及灵敏度指标。结果AFD9600定量检测HBV-DNA低值和高值的批内精密度CV分别为1.6%和1.3%,其总精密度CV分别为2.1%和1.6%。正确度3个标准物质检测结果的偏倚为-1.05%~3.49%,均在可接受范围内。线性线性相关系数为0.9992,直线回归方程为Y=0.9937X-0.0697。灵敏度对HBV-DNA浓度5×102IU/mL的检出率均为100%,CV分别为5.97%。结论AFD9600的主要性能指标符合实验要求,可满足临床实验室需求。

  • 标签: 实时荧光定量PCR仪 性能验证 临床实验室
  • 简介:定量荧光样品分析时,需要确定油层及刻度曲线,这需要分析人员具备地层识别能力,而且对于区域地层构造了解不清晰或地层复杂时,其确定难度较大。通过兮析待测样品与原油谱图形态相似程度,实现智能判断原油层位及进行刻度曲线选择,提高了定量荧光兮析的准确性。该方法实现了油层的智能识别,不需要人工判断原油层位及进行刻度曲线选择,便于在油田现场录井作业中推广和应用。

  • 标签: 定量荧光 谱图形态 油层识别 刻度曲线识别
  • 简介:  【摘 要】 目的:采用实时荧光定量 PCR仪检测流感样病例标本中的流感病毒,分析其检测效果。方法:在 2018年 1月至 2019年 12月实验室所收集的 120例流感样病例患者作为本次研究对象,分别采取流感病毒细胞分离检测法和实时荧光定量 PCR检测法,分析其检测结果。结果:实时荧光定量 PCR法检测阳性率明显高于流感病毒细胞分离检测法, P<0.05具有统计学意义。结论:对流感病毒进行检测时可以优先考虑选择实时荧光定量 PCR法,其检出阳性率更高,值得进行推广应用。    【关键词】 实时荧光定量 PCR仪 ;细胞培养 ;流感病毒检测    [Abstract] Objective: to detect influenza virus in influenza like cases by real-time fluorescent quantitative PCR and analyze its detection effect. Methods: 120 cases of influenza like patients collected in the laboratory from January 2018 to December 2019 were selected as the research objects, and influenza virus cell isolation and detection method and real-time fluorescence quantitative PCR detection method were adopted to analyze the detection results. Results: the positive rate of real-time fluorescent quantitative PCR was significantly higher than that of influenza virus cell isolation detection, P < 0.05, with statistical significance. Conclusion: the real-time fluorescent quantitative PCR method can be preferred in the detection of influenza virus, and its positive rate is higher, which is worthy of promotion and application.

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