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  • 简介:以水解度为优化指标,利用单因素试验考察解温度、pH值、时间等因素对鱼蛋白水解的影响,利用中心组合试验方法优化的添加量和蛋白质浓度.结果表明,复合蛋白水解蓝圆够的最佳工艺条件为:加量2700U·g^-1蛋白蛋白质浓度1.56%、水解温度60℃、反应体系pH7.5、反应时间8h.在此条件下,水解体系的氨基酸态氮含量达1.27mg·mL^-1,水解度为50.98%,挥发性盐基氮含量为0.032mg·mL^-1

  • 标签: 蓝圆鲹 复合蛋白酶 水解 优化
  • 简介:为提高罗非鱼加工下脚料的综合利用率,开发新型的食品级蛋白制剂,对罗非鱼肠道蛋白的提取及催化特性进行了探讨.试验结果表明,罗非鱼肠道中含有非常丰富的碱性蛋白,其提取率可达到6200U/g;该蛋白在pH9.0、温度60℃的条件下有最大催化活性;在pH7~9的范围内,温度低于50℃的条件下有很好的稳定性;Fe2+离子、PMSF及EDTA对该表现出较强的抑制作用,初步显示该为金属离子依赖型丝氨酸蛋白.

  • 标签: 罗非鱼肠道 蛋白酶 催化性质
  • 简介:研究了磺酸盐类阴离子型、脂肪酸聚氧乙烯酯和脂肪醇聚氧乙烯醚非离子型、聚有机硅氧烷(氨基聚硅氧烷、聚醚聚硅氧烷)等多种类型的表面活性助剂及其复配混合体系对酸性蛋白活力的影响。结果表明,磺酸盐类阴离子型对活力影响较大,起抑制作用甚至使失活;脂肪酸聚氧乙烯酯和脂肪醇聚氧乙烯醚非离子型对活力影响较小,或是起激活作用;氨基聚有机硅氧烷对活力有较小抑制作用,而聚醚聚有机硅氧烷有激活作用,能提高活力20%以上。助剂复配体系中,非离子助剂可明显削弱磺酸盐类阴离子助剂对活力的抑制作用。

  • 标签: 表面活性助剂 酸性蛋白酶 酶活力
  • 简介:介绍了制革蛋白活力常用的测定方法LVU法、福林法和胰转化倍数法的测定原理和方法.对21种制革中常用的胰蛋白酶、高浓度的细菌蛋白和制革工业用酶制剂,分别用三种方法进行了活力检测,结果表明,在相同的反应pH和温度下(LVU标准条件pH8.2,37℃),福林法和LVU法两种测定方法的结果基本一致.活力1:24倍国产胰的LVU法活力为2.4万左右.以此为基础,在确定酶制剂用量时,对于用不同活力测定方法表征的酶制剂可更方便地换算.

  • 标签: 蛋白酶 酶活力 福林法 LVU法 制革
  • 简介:为了探究口含烟烟碱(NIC)在人体胃部的吸收特性,配制了特定浓度的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液使其pH=2.0,并在该条件下配制不同浓度的烟碱溶液样品,随后用该样品作用于胃蛋白,利用多种光谱学方法(分子荧光光谱、紫外光谱、红外光谱、圆二色谱)和分子模拟对接技术观察添加不同浓度烟碱前后胃蛋白的光谱学变化,初步研究了NIC与胃蛋白(Pepsin)相互作用机理。光谱学与分子模拟对接结果表明:1)NIC与Pepsin之间为静态荧光猝灭机制;2)NIC与Pepsin之间通过氢键和范德华力自发的发生相互作用;3)NIC与Pepsin之间存在着一个高亲和力的结合位点;4)NIC和Pepsin之间的相互作用不仅使Pepsin中氨基酸残基的微环境极性增加,同时使得Pepsin多肽链的C=O、C-N和N-H发生了变化,进而导致Pepsin的构象和空间结构发生变化,同时NIC的加入对Pepsin活性呈明显的增强效应。以上研究结果对口含烟产品开发、质量控制和安全评价具有重要理论意义。

  • 标签: 烟碱 胃蛋白酶 光谱学 分子对接 作用机理
  • 简介:摘要 血清组织蛋白的种类有很多,包括了组织蛋白B、S、L、K、D等等,各自有其特点和功能,应用在临床诊断当中。本文主要综述了血清组织蛋白在临床诊断中的应用,例如血清组织蛋白D在非酒精性脂肪性肝病的诊断应用,血清组织蛋白K在骨质疏松症诊断中的应用,血清组织蛋白L在卵巢癌中的应用等,希望能对血清组织蛋白有一个更加清晰、完整的认识。

  • 标签: 血清组织蛋白酶 临床诊断 分析
  • 简介:目的探讨阴道黏膜、子宫主韧带中基质金属蛋白-1(MMP-1)表达变化与盆腔器官脱垂(POP)发生的关系。方法选择因重度盆腔脏器脱垂行子宫全切术的绝经后患者30例为POP组;以同期无盆腔脏器脱垂及尿失禁、因妇科良性疾病行子宫全切术的绝经后患者30例为对照组,于手术中取阴道黏膜、子宫主韧带。采用免疫组化法检测两组阴道黏膜、子宫主韧带中MMP-1表达变化。结果POP组中阴道组织,子宫主韧带组织中MMP-1表达较对照组增强(P〈0.05)。结论POP患者阴道组织、主韧带组织弹性纤维组织中MMP-1者表达增加,可能与POP发生有关。

  • 标签: 女性盆腔器官脱垂 基质金属蛋白酶-1 胶原蛋白
  • 简介:摘要目的探讨基质金属蛋白1(MMP1)基因在肝癌组织中的表达及其作用机制。方法利用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库分析MMP1在肝癌组织中的表达及其与患者总体生存时间、无病生存时间之间的关系。设计并合成靶向MMP1的小干扰RNA(siMMP1)和阴性对照siCON,并在肝癌细胞株HepG2(购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)中进行转染,利用实时定量反转录聚合链反应(RT-qPCR)检测目的基因mRNA的表达情况验证敲降效率。在HepG2中进行siMMP1和siCON转染,利用Transwell实验检测siMMP1组和siCON组细胞的迁移和侵袭能力。两组比较采用Student t检验。生存分析采用Kaplan-Meier方法,组间比较采用Log-rank检验。结果MMP1 mRNA在肝癌中表达水平高于癌旁正常组织(0.248±0.038比0.075±0.010,t=7.566,P<0.05),生存分析表明高表达MMP1 mRNA的肝癌患者较低表达MMP1 mRNA的患者有更短的总体生存时间[风险比(HR)=1.987,95%可信区间(CI):1.623~2.287,P<0.01]和无病生存时间(HR=1.413,95%CI:1.114~1.852,P<0.05)呈负相关。siMMP1和siCON瞬时转染HepG2细胞48 h后,siMMP1对HepG2细胞MMP1 mRNA表达的抑制率为(80.2±5.8)%,差异有统计学意义(t=13.283,P<0.01)。Transwell迁移实验表明在转染后siMMP1组迁移细胞数明显小于阴性对照组[(124±19)个比(243±27)个,t=6.145,P<0.01],差异有统计学意义。Transwell侵袭实验表明在转染后siMMP1组侵袭细胞数明显小于阴性对照组[(96±7)个比(144±14)个,t=5.334,P<0.05],差异有统计学意义。结论MMP1高表达是肝癌患者预后不良因素,下调MMP1表达抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力。

  • 标签: 基质金属蛋白酶1 肝癌 小干扰RNA 迁移 侵袭 预后
  • 简介:目的探讨膜型基质金属蛋白-1(MT1-MMP)蛋白在乳腺癌中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测106例乳腺癌患者手术标本中MT1-MMP蛋白的表达;用统计学软件SPSS11.0作为统计分析的工具,MT1-MMP表达与临床病理因子的关系用卡方检验和Pearson等级相关分析检验;预后分析采用Kaplan—Meier检验CoxRegression。结果乳腺癌组织中MT1-MMP蛋白表达阳性率为62.3%,表达强度在不同分期和不同淋巴结转移数目患者间差异有统计学意义且呈正相关(P〈0.050),在不同大小肿瘤间及在ER、PR和HER-2不同表达的患者间差异无统计学意义。MT1-MMP阴性患者与弱至中度阳性或强阳性患者间的无病生存期比较,MT1-MMP(-)为65.0%,MT1-MMP(+-++)为27.1%,MT1-MMP(+++)为27.8%,差异有统计学意义(P〈0.050)。不同MT1-MMP免疫组织化学染色强度患者的7年生存率也明显不同,MT1-MMP(-)为77.5%,MT1-MMP(+-++)为60.4%,MT1-MMP(+++)为50.0%,差异有统计学意义(P〈0.050)。根据不同分期和不同淋巴结转移状态分层分析发现,MT1-MMP蛋白不同表达强度的患者预后差异有统计学意义(P〈0.050);根据不同肿瘤大小的分层分析发现,不同MT1-MMP表达强度的T2期和T4期患者预后差别有统计学意义(P〈0.050),但T1和T3期患者预后没有差别。多因素分析显示MT1-MMP是有意义的预后因子,MT1-MMP强阳性患者死亡风险增加2倍,弱到中度阳性患者死亡风险增加1.3倍。结论MT1-MMP的表达与乳腺癌侵袭转移有关,MT1-MMP是乳腺癌的预后因子。

  • 标签: 膜型基质金属蛋白酶-1 乳腺肿瘤 预后
  • 简介:[目的]研究在卒中易感型自发性高血压大鼠(stroke-pronespontaneouslyhypertensiverat,SHR-SP)肾脏中,基质金属蛋白(Matrixmetalloproteinases,MMPs)-2,-9以及组织型基质金属蛋白抑制剂(tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinases,TIMPs)-1,-2的表达与活性的变化.[方法]分别采用40只7周龄雄性SHR-SP大鼠及10只同周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠作为高血压组与阴性对照组.观察期间定期测量各组大鼠无创鼠尾压.6个月后,处死存活大鼠留取血液及肾脏标本,测定血清肌酐及尿素氮浓度,采用组织病理染色观察两组大鼠肾脏组织学改变,采用明胶谱法分析存活大鼠肾脏MMP-2和MMP-9蛋白活性,并采用逆明胶谱法及蛋白质印迹分析TIMP-1和TIMP-2蛋白表达和活性.[结果](1)明胶谱分析显示:SHR-SP肾脏中MMP-2活性较WKY组明显增高[(3.28±1.17)vs.(1.26±0.62);P<0.01].(2)逆明胶谱分析显示:高血压大鼠肾脏TIMP-2的活性明显高于WKY组[(1.12±0.43)vs.(0.78±0.34),P<0.05].(3)蛋白质印迹结果显示:高血压组大鼠肾脏TIMP-1、TIMP-2表达较对照组高[(TIMP-1:(3.44±0.13)vs.(2.31±0.15),TIMP-2:(6.44±0.49)vs.(4.94±0.68),P<0.01].[结论]SHR-SP肾脏组织中MMP-2及TIMP-2的活性增高,TIMP-1及TIMP-2的表达均明显升高.

  • 标签: 高血压 基质金属蛋白酶 组织型基质金属蛋白酶抑制剂 肾纤维化
  • 简介:研究了取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫Propylaeajaponica(Thunberg)体内解毒和中肠蛋白活性的影响。利用饲喂结合比色方法,比较龟纹瓢虫取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉和非转基因玉米花粉后体内α-乙酸萘酯、乙酰胆碱酯、谷胱甘肽-S-转移、中肠总蛋白、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白活性。结果发现:在解毒方面,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫4龄幼虫和蛹的α-乙酸萘酯活性显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫(对照组),取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的乙酰胆碱酯和谷胱甘肽-S-转移活性在各个发育时期与对照相比均无显著差异。在中肠蛋白方面,与对照组相比,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的总蛋白和强碱性类胰蛋白酶活性在各个发育时期均无显著差异;但取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的弱碱性类胰凝蛋白和类胰凝乳蛋白活性在蛹期显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫。由此可见,龟纹瓢虫取食含有Cry1Ah杀虫蛋白的玉米花粉后,体内代谢解毒和中肠蛋白与Cry1Ah杀虫蛋白相互作用,可能会引起某些活性的变化。因此,转cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫的潜在影响还需要进一步的研究。

  • 标签: 转Bt-cry1 Ah基因玉米 花粉 龟纹瓢虫 解毒酶 中肠蛋白酶
  • 简介:UHT灭菌牛乳是指采用超高温灭菌(137~150℃保持4~20s)和无菌灌装的工艺过程加工而成的牛乳制品。UHT乳以其高品质,饮用方便,长保鲜期以及可远距离销售等特点。然而,UHT乳在贮存过程中常会出现一些质量问题影响到产品品质。胶凝现象就是一个限制UHT灭菌乳货架期,阻碍其商业化发展的主要问题。胶凝是以贮存过程中产品的流动性损失为特征的。在贮存过程中UHT灭菌乳发生黏度变化,通常起始阶段产品变薄,接

  • 标签: UHT乳 胶凝 灭菌乳 贮存过程 超高温灭菌 蛋白酶
  • 简介:摘要诊断牙周疾病的传统方法,包括临床指标的检查和生化指标的检测。生化指标可以弥补临床指标检查的低敏感性。检测龈沟液中的弹性蛋白,可以早期发现并诊断牙周炎。本文综述了龈沟液中的弹性蛋白与牙周炎的诊断。

  • 标签: 牙周炎 龈沟液 弹性蛋白酶
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  • 简介:恶性肿瘤的侵袭和转移的分子调控机制是目前肿瘤分子生物学研究的热点课题,众多研究表明,肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导产生基质金属蛋白的能力密切相关。基质金属蛋白(MMPs)是一个由多个成员组成的蛋白水解家族,是丝氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、天门冬氨酸蛋白和基质金属蛋白4类蛋白水解中较为重要的一类,它们几乎能降解细胞外基质的所有成分。

  • 标签: 基质金属蛋白酶 肿瘤侵袭转移 蛋白水解酶 肿瘤分子生物学 天门冬氨酸 细胞外基质