VEGFR2、NRP-1在非小细胞肺癌中的表达及意义分析

VEGFR2、NRP-1在非小细胞肺癌中的表达及意义分析

毕晨明

毕晨明

桐庐县中医院311502

【摘要】目的：对VEGFR2、NRP-1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及意义进行分析。方法：选择2013年5月到2014年10月在我院手术切除并经病理确诊的NSCLC石蜡包埋标本62例以及10例肺组织良性标本，应用免疫组化法对VEGFR2、NRP-1的表达进行检测，并对其表达与NSCLC临床病理参数之间的关系进行分析。结果：62例NSCLC患者VEGFR2高表达率为（80.65%），NRP-1高表达率为（67.74%），两者在肺良性组织中表达均为阴性，与肺良性组织相比，差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。结论：VEGFR2、NRP-1在NSCLC组织中的表达增高，对NSCLC的诊断和预后指导有重要价值。

【关键词】VEGFR2；NRP-1；非小细胞肺癌（NSCLC）

【中图分类号】R734.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-04-234-01

肺癌是常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率极高，严重危害着人类的健康与生命。NSCLC是常见的肺癌类型，其预后比较差，以手术为主要的治疗方法，肿瘤术后转移是NSCLC治疗失败和死亡的常见原因[1]。随着分子生物技术的发展，临床上开展了肺癌分子靶向治疗的研究，VEGFR2在NSCLC组织中表达增高，除此之外，亦发现NRP-1在胃癌、乳腺癌以及NSCLC等多种肿瘤组织中表达增高，与肿瘤的发生发展有着密切的关系。本研究选择我院NSCLC石蜡包埋标本62例以及10例肺组织良性标本应用免疫组化法对VEGFR2、NRP-1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及意义进行分析，结果如下：

1资料与方法

1.1一般资料

选择2013年5月到2014年10月在我院手术切除并经病理确诊的NSCLC石蜡包埋标本62例以及10例肺组织良性标本，患者的年龄介于42~69岁之间，平均年龄为（59.6士6.8）岁，发病时间介于3个月~2年不等，平均发病时间为（12.89士0.98）月。纳入标准为：（一）62例为确诊为NSCLC的患者，10例确诊为肺组织良性的患者；（二）年龄介于40~70岁之间；（三）无心、肝、肾等重要脏器疾病。患者的病情等基本资料比较差异不显著，具有可比性，P＞0.05。

1.2方法

1.2.1主要试剂

VEGFR2抗体-美国Anbobio公司，DAB试剂盒-中杉金桥，NRP-1抗体-美国Epitomics公司。

1.2.2免疫组织化学染色[2]

将制成4pm厚的连续标本蜡块切片在60℃下烤2小时，然后进行VEGFR2、NRP-1免疫组化染色。将滴加有适量3%H₂O₂的脱蜡切片置于37℃恒温箱中进行10min封闭，经PBS洗涤后放于室温下进行冷却，再次PBS洗涤后滴加一抗。将1：200稀释的抗VEUFR2抗体以及抗NRP-1抗体放于4℃冰箱中孵育过夜，次日滴加IgGHRP多聚体后于恒温箱中进行20min的孵育，依次PBS洗涤DAB显色，将各组同一批染色的标本以PBS替代一抗作阴性对照。最后对组织进行病理学检测。

1.3结果判定标准[3]

免疫组化染色结果分别经由2位有经验的病理医师进行评价。VEUFR2和NRP-1主要在肿瘤细胞以及肿瘤间质血管内皮细胞的胞质及细胞膜上表达，若出现棕黄色颗粒则为阳性。随机在切片镜下选择5个高倍视野并计数100个细胞，对各个视野中阳性细胞的百分率进行计算，即为该切片的阳性细胞百分率。0分：无阳性细胞为；1分：小于30%，2分：30%~70%之间；3分：大于70%。以大多数切片呈现的染色特征做为染色强度标准，0分：无染色，1分：染色淡黄，2分：棕黄色，3分：棕褐色。结果以阳性细胞百分率计分和强度计分相加的总分作为判定标准，0分-阴性，1~2分-弱阳性（+），3~4分-中度阳性（++），5~6分-强阳性（+++）。评分小于2分为低表达，大于2分为高表达。

1.4统计学处理

应用统计学软件SPSS22.0，对患者NSCLC组织中的VEGFR2、NRP-1表达情况进行统计学分析，以t检验或χ2检验表示组间差异，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1免疫组化结果

在62例NSCLC患者中有50例患者VEGFR2为高表达，高表达率为（80.65%），12例患者为低表达，VEGFR2在10例肺良性病变组织中表达均为阴性，两者差异显著，有统计学意义（P＜0.05）。62例NSCLC患者中有42例患者NRP-1为高表达，20例患者为低表达，高表达率为（67.74%），NRP-1在肺良性病变组织中表达均为阴性，两者差异显著，有统计学意义（P＜0.05），详见表1：

表1.免疫组化结果[n（%）]

3讨论

NSCLC发病率呈逐年上升趋势，严重威胁人类健康和生命。近年来肿瘤分子生物学发展迅速，对NSCLC的发病机制有了新的认识[4]。

VEGFR2为主要分布在血管内皮细胞的VEGF特异性受体，与VEGF特异性结合后通过一系列后续反应使血管内皮细胞分裂、增殖、迁移增多，从而促进肿瘤的生长。本研究中62例NSCLC患者VEGFR2高表达率为（80.65%），在肺良性组织中表达为阴性，与肺良性组织相比，差异显著，具有统计学意义（P＜0.05），与Carrillo等关于VEGFR2在恶性肿瘤细胞中表达的报告相符。NRP-1存在于肿瘤细胞及肿瘤血管内皮细胞上，主要在上皮源性的癌细胞中表达，在肺癌、食管癌等多种肿瘤组织中表达均增高，与肿瘤的发生发展有密切的关系[5]。本研究中62例NSCLC患者NRP-1高表达率为（67.74%），在肺良性组织中表达为阴性，与肺良性组织相比，差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。

本实验结果显示，62例NSCLC患者VEGFR2高表达率为（80.65%），NRP-1高表达率为（67.74%），两者在肺良性组织中表达均为阴性，与肺良性组织相比，差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，VEGFR2、NRP-1在NSCLC组织中的表达增高，对NSCLC的诊断和预后指导有重要价值。

参考文献：

[1]张荣.蒋晓东.乔云.等.不同肺癌细胞株中VEGFR2mRNA表达的实验研究[J]临床肿瘤学杂志，2013，18（10）：879-881.

[2]蒋晓东.戴鹏.宋大安.等.HIF-1a，VEGF，VEGFR2在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义[J]临床肺科杂志，2012，16（3）：383-388.

[3]刘宏侠.NRP-1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J].实用预防医学，2012，18（10）：1941-1943.

[4]周冬.神经纤毛蛋白-1与肿瘤血管生成的关系[J].国际妇产科学杂志，2012，36（4）：263-266.

[5]丁曼华.刘亮.刘毅.人非小细胞肺癌VFGFR2和NRP-1表达意义分析[J].中华肿瘤防治杂志，2014，21（11）：841-846.