微生物检验操作规范

微生物检验操作规范

岳敏

南江县人民医院 四川省 巴中市 636600

微生物检验是临床上常见的一种检验方法，在检验过程中，如果操作人员操作不规范，很容易导致微生物感染。

一、样品打开和处理
接收和打开样本的人员应了解样本对健康的潜在危害，并接受如何使用标准保护方法的培训，特别是在处理破损或泄漏的容器时。标本的内容器应在生物安全柜中打开，并准备消毒剂。
打开试样进行加工时：
1、标本管应在生物安全柜内打开。
2、必须戴手套，并建议保护眼睛和粘膜（护目镜或口罩）。
3、打开试样管时，用纸或纱布抓住塞子，防止飞溅。
二、避免注入传染性物质
1、通过认真的实践和操作，避免了因损坏玻璃器皿刺伤而引起的接种感染。尽量用塑料制品代替玻璃制品。
2、尖锐的工具损坏（如通过皮下注射针、巴斯德玻璃吸管和碎玻璃）可能导致意外注入感染性物质。
3、以下两点可以减少针刺损伤：（1）减少注射器和针头的使用（可以使用一些简单的工具打开瓶塞，然后用吸管代替注射器和针头取样）；（2）当必须使用注射器和针头时，采用配套的锐器装置以确保安全安装。
4、不要再将护套放在用过的注射器针头上。一次性物品应丢弃在容器中，容器盖应能防止锐器渗透。
三、血清分离
1、这项工作只能由受过严格训练的人员进行。
2、术中戴手套及眼、粘膜防护用品。
3、标准的实验操作技术可以避免或减少飞溅物和气溶胶的产生。血液和血清应小心吸取，不得倾倒。禁止用嘴吸液体。
4、吸管使用后应完全浸入消毒剂中。移液管应在消毒剂中浸泡一段时间，然后丢弃或消毒并清洗以供再次使用。
5、带血凝块的废弃样品管加盖后，应放置在适当的防漏容器中进行高压灭菌和/或焚烧。
6、应准备一种合适的消毒剂，以清洗溅出的样本。
四、血液和其他体液、组织和排泄物的标准保护方法
设计标准保护方法（包括“常规预防措施”），以降低已知或未知感染源的微生物传播风险。
五、玻璃器皿和锐器
1、尽量用塑料制品代替玻璃制品。只能使用实验室级（硼硅酸盐）玻璃，任何破碎或破裂的玻璃产品都应丢弃。
2、皮下注射针不能用作吸管。
六、显微镜观察用玻璃罩和涂片
当用于显微镜观察的血液、唾液和粪便样本固定并染色时，不必杀死涂片上的所有微生物和病毒。应使用镊子取下，妥善存放，并在去污和/或高压灭菌器后丢弃。
七、一次性接种环
一次性接种环的优点是无需灭菌，可用于生物安全柜。否则，使用明火会干扰气流。一次性接种环使用后应置于消毒剂中，作为污染废物处理。
八、培养皿、试管、试剂瓶
由于没有明显的事故和明显的泄漏，所以无法确定开放板、试管和试剂瓶中的一些微生物是否会引起实验室感染。但在这些高传染性因素中，也有可能发生一些传染病。打开装有真菌的平板、试管和瓶子时应特别小心，因为在操作过程中可能会释放大量孢子。一些培养物应该在生物安全柜中操作。为了确保液体培养液成为均匀的悬浮液，在液体培养液被吸收之前，应振动并均匀混合。剧烈的震动会产生大量的气溶胶。轻微的旋转可以制成均匀的悬浮物，但也会伴随着少量的气溶胶产生。当液体培养物恢复原状并停留一段时间后再打开容器时，气溶胶产生量减少。当金属接种环或针插入液体或倾斜培养基中时，会发生飞溅，产生气溶胶。为了减少气溶胶的产生，金属接种环应在空气中冷却，或在容器内壁上冷却，或在没有物体生长的培养基的琼脂表面冷却。用特殊设计的电或气烧灼装置消毒的接种环或针比用明火加热的接种环或针更可取。这种小的烧灼装置有一个圆筒，可以容纳从接种环或针头上飞溅出来的任何物质。为了在加热后立即消毒，先放入消毒剂容器中后再将其丢弃。
将培养物接种在粗糙、不均匀的带接种环或针线的培养基上，可导致气溶胶的形成。如果介质表面光滑整齐，通常没有气溶胶。丢弃粗糙不平的介质是一种很好的安全保护。
在覆盖培养皿中培养的水中通常有活的微生物，在覆盖物和倒板边缘之间形成薄膜。当平板打开时，薄膜破裂，释放出气溶胶。盖有塑料的培养皿，盖子和边缘之间只有三个接触点，可以减少危险。使用完全干燥的培养板也可以降低这种风险，但从厌氧池中取出的培养板（用于厌氧培养）很容易弄湿。安装在盖子上的滤膜可以减少有害物质的产生，但不能防止扩散。如果平板明显潮湿，应在生物安全柜中打开。
当带螺帽的瓶子和带塞子的管子打开时，会产生看不见的气溶胶。这是因为当塞子或盖子打开时，塞子边缘的感染性液体形成的膜会被破坏，产生气溶胶。振动或离心后，立即取下长颈瓶、瓶、离心管的棉塞或塞盖，会产生气雾，造成环境污染。长颈瓶或离心机不处于垂直状态，移除湿塞也可能造成伤害。此外，在离心过程中会产生少量泡沫，塞子可能会稍湿。由于这些可能性，在生物安全柜内打开液体传染菌和有害物质，同时戴手套和穿长袖实验室工作服，是一种很好的安全措施。干燥的感染性培养物可以收集在盖子的边缘或培养管/培养瓶的壁上，并在受到干扰时传播到空气中。含有干粉状危险的容器应在生物安全柜中打开。