简介：AIM:Toelucidatethemechanism(s)bywhichS-adenosyl-L-methionine(SAM)decreaseshepatitisCvirus(HCV)expression.METHODS:WeexaminedtheeffectsofSAMonviralexpressionusinganHCVsubgenomicrepliconcellculturesystem.Huh7HCV-repliconcellsweretreatedwith1mmol/LSAMfordifferenttimes(24-72h),thentotalRNAandproteinswereisolated.cDNAwassynthesizedandrealtime-PCRwasachievedtoquantifyHCV-RNA,superoxidedismutase1and2(SOD-1,SOD-2)catalase,thioredoxin1,methionineadenosyltransferase1Aand2A(MAT1A,MAT2A)expression,andGAPDHandRPS18asendogenousgenes.Expressionofcellularandviralproteinwasevaluatedbywestern-blotanalysisusingantibodiesvsHCV-NS5A,SOD-1,SOD-2,catalase,thioredoxin-1,MAT1A,MAT2A,GAPDHandactin.TotalglutathionelevelsweremeasuredatdifferenttimesbyEllman’srecyclingmethod(0-24h).Reactiveoxidativespecies(ROS)levelswerequantifiedbythedichlorofluoresceinassay(0-48h);Pyrrolidindithiocarbamate(PDTC)wastestedasanantioxidantcontrolandH2O2asapositiveoxidantagent.RESULTS:SAMexpositiondecreasedHCV-RNAlevels50%-70%comparedtonon-treatedcontrols(24-72h).SAMinducedasynergicantiviraleffectwithstandardIFNtreatmentbutitwasindependentofIFNsignaling.Inaddition,1mmol/LSAMexpositiondidnotmodifyviralRNAstability,butitneedscellulartranslationmachineryinordertodecreaseHCVexpression.TotalglutathionelevelsincreaseduponSAMtreatmentinHCV-repliconcells.Transcriptionalantioxidantenzymeexpression(SOD-1,SOD-2andthioredoxin-1)wasincreasedatdifferenttimesbutinterestingly,therewasnosignificantchangeinROSlevelsuponSAMtreatment,contrarytowhatwasdetectedwithPDTCtreatment,whereanaverage40%reductionwasobservedinexposedcells.TherewasaturnoverfromMAT1A/MAT2A,sinceMAT1Aexpressionwasincreased(2.5fold-timesat48h)andMAT2Awasdiminished(from24h)uponSAMtreatmentatboththetranscriptionalandtranslationall

简介：

简介：目的构建HCV感染相关干扰素IFNL4蛋白融合His标签的真核表达载体,并将其在293-T细胞中表达后进行初步纯化鉴定。方法采用PCR法从含人IFNL4基因序列的质粒pFC14A-p179中扩增出目的片段,将其定向连接到pcDNA3.1-His真核表达载体中,经酶切和测序鉴定正确后,以脂质体法转染293-T细胞,培养72h后裂解细胞,采用抗His-Tag抗体行蛋白质印迹法检测目的蛋白的表达。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-IFNL4-His,转染后经Westernblot法检测显示20kDa位置有目的蛋白条带,大小与目的蛋白相符。结论我们成功构建了HCV感染相关IFNL4与His标签融合的真核表达载体,体外转染293-T细胞后鉴定其工作良好,为后续对干扰素在HCV感染及抗肝纤维化治疗中的研究奠定了基础。

简介：胃癌是我国高发病率、高死亡率的恶性肿瘤之一。晚期胃癌治疗采用以系统性化疗为主的综合治疗,5年生存率仍不足5%。近年肿瘤的免疫治疗取得了振奋人心的进展,其中针对程序性死亡受体-1(PD-1)及其配体PD-L1的单克隆抗体已用治疗于包括胃癌在内的多种肿瘤。本文就PD-1/PD-L1免疫治疗在胃癌中的研究进展作一综述。

简介：例1男，17岁，因“右上腹疼痛伴发烧5天”入院。5天前无诱因右上腹疼痛，慢性钝痛持续性加剧、畏寒、发烧。查体：T39．0℃，皮肤粘膜无黄染；腹平、软，右上腹深压痛，无反跳痛，Murphy，S征(-)，肝区叩痛。B超：肝脏中部脏面探及-7×3cm大小囊性肿物，囊壁较厚，内有数块大小不等的强回声光团，正常胆囊位置未探及胆囊。输液、应用抗生素治疗两

简介：柿石是最常见的植物性类石,多形成于胃内,并可进入十二指肠和空肠。而食管柿石症较少见,我院在胃镜检查中发现2例,并成功地经胃镜取出,现报告如下。例1:患者,女,78岁,因吞咽困难10天于1996年3月4日入院。入院前15天患者食柿子2个后逐渐出现吞咽困难,进食后呕吐,当地地区医院拟诊“食道癌”遂来我院。体检无阳性发现。纤维胃镜插入35cm见4.0cm×3.5cm×3.5cm大小褐

简介：肝性皮质盲又称肝脑眼综合症,是终末期肝病合并肝性脑病的一种特殊表现,临床较少见。我院在近期收治2例,现报告如下：病例摘要例1女性,32岁。

简介：例1，女，58岁，发现右腹部包块3天入院。主要表现为腹胀、纳差。查体：腹部膨胀，右上腹触及一约15cm×15cm×15cm大的包块，质稍硬，活动度小，与周围边界不清，触之无压痛。腹部揉面感。实验室检查：血白细胞5．9×10^9/L，中性0．73，淋巴0．27；尿镜检正常；肝功、尿素氮均正常；B超示腹膜后肿瘤。初步诊断为腹膜后肿瘤。

简介：AIMTodeterminetheroleofcorticotropinreleasingfactorreceptor(CRF2)inepithelialpermeabilityandenterocytecelldifferentiation.METHODSForthispurpose,weusedratSpragueDawleyandvariouscoloncarcinomacelllines(SW620,HCT8R,HT-29andCaco-2celllines).ExpressionofCRF2proteinwasanalyzedbyfluorescentimmunolabelinginnormalratcolonandthenbywesternblotindissociatedcolonicepithelialcellsandinthelysatesofcoloncarcinomacelllinesorduringtheearlydifferentiationofHT-29cells(tenfirstdays).ToassesstheimpactofCRF2signalingoncoloniccelldifferentiation,HT-29andCaco-2cellswereexposedtoUrocortin3recombinantproteins(Ucn3,100nmol/L).Insomeexperiments,cellswerepre-exposedtotheastressin2b(A2b)aCRF2antagonistinordertoinhibittheactionofUcn3.Intestinalcelldifferentiationwasfirstanalyzedbyfunctionalassays:thetrans-cellularpermeabilityandthepara-cellularpermeabilityweredeterminedbyDextran-FITCintakeandmeasureofthetransepithelialelectricalresistancerespectively.Morphologicalmodificationsassociatedtoepithelialdysfunctionwereanalyzedbyconfocalmicroscopyafterfluorescentlabelingofactin(phaloidin-TRITC)andintercellularadhesionproteinssuchasE-cadherin,p120ctn,occludinandZO-1.Theestablishmentofmatureadherensjunctions(AJ)wasmonitoredbyfollowingthedistributionofAJproteinsinlipidraftfractions,afterseparationofcelllysatesonsucrosegradients.Finally,themRNAandtheproteinexpressionlevelsofcharacteristicmarkersofintestinalepithelialcell(IEC)differentiationsuchasthetranscriptionalfactorkrüppel-likefactor4(KLF4)orthedipeptidylpeptidaseIV(DPPIV)wereperformedbyRT-PCRandwesternblotrespectively.ThespecificactivitiesofDPPIVandalkalinephosphatase(AP)enzymesweredeterminedbyacolorimetricmethod.RESULTSCRF2proteinispreferentiallyexpressedinundifferentiatedepithelialcellsfromthecryptsofcolonandinhumancoloncarcinoma

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简介：Medicaltherapyfortype2diabetesmellitusisineffectiveinthelongtermduetotheprogressivenatureofthedisease,whichrequiresincreasingmedicationdosesandpolypharmacy.Conversely,bariatricsurgeryhasemergedasacost-effectivestrategyforobesediabeticindividuals;ithaslowcomplicationratesandresultsindurableweightloss,glycemiccontrolandimprovementsinthequalityoflife,obesity-relatedco-morbidityandoverallsurvival.Thefindingthatglucosehomeostasiscanbeachievedwithaweightloss-independentmechanismimmediatelyafterbariatricsurgery,especiallygastricbypass,hasledtotheparadigmofmetabolicsurgery.However,theprimaryfocusofmetabolicsurgeryisthealterationofthephysio-anatomyofthegastrointestinaltracttoachieveglycemiccontrol,metaboliccontrolandcardio-metabolicriskreduction.Todate,metabolicsurgeryisstillnotwelldefined,asitisusedmostfrequentlyforlessobesepatientswithpoorlycontrolleddiabetes.Themechanismofglycemiccontrolisstillincompletelyunderstood.Publishedresearchfindingsonmetabolicsurgeryarepromising,butmanyaspectsstillneedtobedefined.Thispaperexaminestheproposedmechanismofdiabetesremission,theefficacyofdifferenttypesofmetabolicprocedures,thedurabilityofglucosecontrol,andtherisksandcomplicationsassociatedwiththisprocedure.Weproposeatailoredapproachfortheselectionoftheidealmetabolicprocedurefordifferentgroupsofpatients,consideringtheindicationsandprognosticfactorsfordiabetesremission.

简介：目的探讨微小RNA-363(miR-363)靶向调控E2F转录因子3(E2F3)的表达对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞,采用Lipofectamine法将miR-363抑制剂或其阴性对照转染到HepG2细胞,继续培养48h,收获细胞,采用四噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖率,使用流式细胞术法检测细胞凋亡率,采用实时荧光RT-PCR法检测HepG2细胞miR-363mRNA水平,采用WesternBlot法检测HepG2细胞E2F3、BAX和Caspase-3蛋白表达水平。结果对照组HepG2细胞增殖率为(96.4±9.7)%,显著高于抑制剂处理组【(72.3±6.5)%,P<0.05】,凋亡率为(8.2±1.4)%,显著低于抑制剂处理组【(9.7±0.8)%,P<0.05】;对照组HepG2细胞miR-363mRNA相对水平为(1.0±0.1),显著高于抑制剂处理组【(0.6±0.2),P<0.05】,E2F3蛋白表达量为(1.0±0.1),显著高于抑制剂处理组【(0.6±0.1),P<0.05】,而对照组HepG2细胞Bax和Caspase-3蛋白表达量分别为(0.4±0.0)和(0.5±0.1),均显著低于抑制剂处理组【(0.6±0.1)和(0.7±0.0),P均<0.05】。结论miR-363可靶向调控E2F3的表达,抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。本研究结果为肝癌靶向治疗提供了一定的理论依据。

简介：程序性死亡分子-1（PD-1）是T淋巴细胞膜表面表达的负向协同刺激分子，与其主要配体（PD-L1）形成通路后，可以减弱T淋巴细胞的免疫反应，甚至导致T淋巴细胞功能衰竭。PD-1／PD-L1信号通路在乙型肝炎病毒感染后的效应T细胞免疫耐受中具有重要作用，阻断该途径可能是抗病毒治疗的方向之一，具有良好的应用前景。

简介：病例1：患者女性,42岁,因＂间断腹泻18年,加重伴呕吐2个月＂于2010-09-16就诊于北京协和医院。18年前因进食生冷食物出现腹泻,为黄色水样便,量约300~500mL/次,每日5~6次,因夜间腹泻而影响睡眠,伴脐周胀痛,便后缓解,无黏液脓血便,无发热。外院曾考虑＂胃肠炎＂、＂肠易激综合征（IBS）＂,予止泻等对症治疗后好转。此后间断发作类似腹泻,每1~2周1次。

简介：目的探讨应用S-腺苷-L-蛋白氨酸(SAMe)治疗老年性药物性肝损伤的疗效以及还原型谷胱甘肽对判断疗效的意义。方法应用S-腺苷-L-蛋氨酸(SAMe)对24例因各种药物引起的肝损害给予治疗，连续静脉给药800mg／日，3周，动态观察治疗前后临床表现和各项肝功能指标及GSH水平变化情况。结果治疗后精神、睡眠、食欲好转，乏力减轻，肝功能指标明显下降，GSH水平从治疗前的6．21±0．89mmol／L升至7．40±0．61mmol／L。结论S-腺苷-L-蛋氨酸(SAMe)对治疗老年性药物性肝损害有明显疗效，能明显改善肝功能和抗氧化作用。检测血清GSH水平变化情况对判断肝损害的疗效及预后有重要和直接的意义。

简介：瞄准：Disabled-2(DAB2)是在卵巢的癌症识别否定地影响生长因素和块地岬活动的致有丝分裂信号转导变异的候选人tumor-suppressor基因。在最近的研究，我们用cDNA在ESCC观察了DAB2抄本的下面规定微数组。在现在的学习，我们试图在食道的肿瘤发生决定DAB2蛋白质的损失的临床的意义，假设那个DAB2倡导者调停hypermethylation的基因silencing可以说明蛋白质的损失。方法：DAB2表示被免疫组织化学在50主要食道的有鳞的房间分析癌(ESCC)，30不同增生，15发育异常和10非恶意的食道的纸巾。决定倡导者hypermethylation是否在ESCC贡献DAB2表示的损失，DAB2倡导者的甲基化地位用methylation特定的PCR在DAB2免疫否定的肿瘤被分析。结果：DAB2蛋白质的损失在5/30(17%)被观察增生，10/15(67%)发育异常和34/50(68%)ESCC。DAB2蛋白质的重要损失从食道的正常粘膜被观察到增生，发育异常和侵略癌症(P(趋势)<0.001)。DAB2的倡导者hypermethylation在10中的2个被观察(20%)DAB2免疫否定的ESCC。结论：DAB2蛋白质表示的损失发生在食道的癌症的开发的早pre肿瘤的阶段并且在致瘤的小径下面被支撑。在ESCC的很少发生的DAB2倡导者甲基化建议渐成说基因silencing仅仅是在ESCC引起DAB2表示的损失的机制之一。

简介：肝脏的外分泌功能具有非常重要的作用,除了参与消化吸收以外,人体内大量化合物的代谢都需肝脏的处理并由胆汁排泄,这个外分泌过程就需要肝胆转运系统的参与,肝脏的转运系统中包含着许多的载体蛋白,这些载体蛋白与肝炎,肝内胆汁郁积,肿瘤化疗药物的耐受以及多种肝脏遗传性疾病有着密切的关系.本文所要综述的多药耐药相关蛋白2(themuhidrugresistanceprotein2,MRP2)就是这类载体中的一个.目前关于MRP2的研究主要集中在MRP2介导的肿瘤耐药以及MRP2缺乏所导致的高胆红素血症这两个方面.本文从MRP2的结构功能、与肿瘤化疗耐药之间的关系,MRP2缺乏与高胆红素血症之间的关系以及MRP2表达障碍时MRP3对其代偿作用等方面,对MRP2的研究进展作一简单介绍.

简介：瞄准：检验矩阵metalloproteinase-2(MMP-2)在胃的癌症纸巾并且到的表示与淋巴节点评估它的关系微转移。方法：作者从30学习了850淋巴结resected与淋巴腺切除术经历了胃切除术用的有胃的癌的病人颠倒抄写聚合酶链反应(RT-PCR)试金除了他染色。肿瘤纸巾的MMP-2表示被免疫检测组织化学的技术(EliVision加)。结果：MMP-2表示在21是积极的(70%)在9的盒子和negative(30%)盒子。没有重要关联在象年龄，性，肿瘤地点，肿瘤直径，Lauren分类和淋巴的侵略那样的MMP-2表示和另外的变量之间被发现。相反，MMP-2表示与肿瘤渗入的深度显著地相关(P=0.022)，淋巴节点转移(P=0.030)并且肿瘤区别(P=0.043)。淋巴节点微转移在77被检测(12.5%)14的淋巴节点(46.7%)胃的癌病人。MMP-2表示在12是积极的(85.7%)有淋巴节点的14个病人微转移，并且在9(56.3%)没有淋巴节点的16个病人微转移(P=0.118)。结论：我们的结果证明那MMP-2表情与肿瘤侵略，肿瘤区别和淋巴节点转移有重要关联。MMP-2表示可以是一个重要生物特征和胃的癌的重要预示的参数。我们也断定MMP-2可以参予淋巴节点的发展胃的癌的微转移。进一步的调查被需要得出一个结论。

简介：AIM:ToinvestigatetheeffectofhepatitisBvirus(HBV)XgeneonapoptosisandexpressionsofapoptosisfactorsinXgene-transfectedHepG2cells.METHODS:TheHBVXgeneeukaryonexpressionvectorpcDNVA3-XwastransientlytransfectedintoHepG2cellsbylipid-mediatransfection.UntransfectedHepG2andHepG2transfectedwithpcDNA3wereusedascontrols.ExpressionofHBxinHepG2wasidentifiedbyPT-PCR.MTTandTUNELwereemployedtomeasureproliferationandapoptosisofcellsin.threegroups.Semi-quantifiedRT-PCRwasusedtoevaluatetheexpressionlevelsofFas/FasL,Bax/Bcl-xL,andc-mycineachgroup.RESULTS:HBVXgenewastransfectedintoHepG2cellssuccessfully.RT-PCRshowedthatHBxwasonlyexpressedinHepG2/pcDNA3-Xcells,butnotexpressedinHepG2andHepG2/pcDNA3cells.AnalyzedbyMTT,cellproliferationcapacitywasobviouslylowerinHepG2/pcDNA3-Xcells(0.08910±0.003164)thaninHepG2(0.14410±0.004927)andHepG2/pcDNA3cells(0.12150±0.007159)(P＜0.05andP＜0.01).AnalyzedbyTUNEL,cellapoptosiswasmuchmoreinHepG2/pcDNA3-Xcells(980/2000)thanHepG2(420/2000),HepG2/pcDNA3cells(520/2000)(P＜0.05andP＜0.01).Evaluatedbysemi-quantifiedRT-PCR,theexpressionlevelofFas/FasLwassignificantlyhigherinHepG2cellstransfectedwithHBxthaninHepG2andHepG2/pcDNA3cells(P＜0.05andP＜0.01).Bax/Bcl-xLexpressionlevelwasalsoelevatedinHepG2/pcDNA3-Xcells(P＜0.05andP＜0.01).Expressionofc-mycwasmarkedlyhigherinHepG2/pcDNA3-XcellsthaninHepG2andHepG2/pcDNA3cells(P＜0.05andP＜0.01).CONCLUSION:HBVXgenecanimpaircellproliferationcapacity,improvecellapoptosis,andupregulateexpressionofapoptosisfactors.TheinterventionofHBVXgeneontheexpressionofapoptosisfactorsmaybeapossiblemechanismresponsibleforthechangeincellapoptosisandproliferation.

简介：