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  • 简介:摘要:本研究主要探讨了温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达影响。在适宜温度范围内,大肠杆菌生长速率会随着温度升高而加快。过高温度会导致细菌生长受到抑制,同时也会影响外源蛋白表达。此外,低温可以改善外源蛋白稳定性和可溶性。本研究旨在为重组大肠杆菌优化培养提供理论参考,以期提高外源蛋白表达水平。

  • 标签: 重组大肠杆菌 温度 外源蛋白 表达水平
  • 简介:目的构建人卵细胞ZP3蛋白原核重组载体并进行表达和鉴定。方法提取人卵巢中总RNA,逆转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增ZP3蛋白编码序列,PCR产物经BamHI/NheⅠ双酶切后,克隆至表达载体pET—His中,在E.coliBL21-DE3中诱导ZP3融合蛋白表达。结果在异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下,重组菌高效表达出一个相对分子质量约为50000产物。结论人卵细胞ZP3蛋白全长编码序列已被克隆ZP3蛋白融合表达载体pET—His,并在E.coliBL21-DE3中获得高表达

  • 标签: 人卵细胞ZP3蛋白 克隆 基因表达
  • 简介:摘要:凝集素因其具有结合糖能力,在癌症诊断和治疗方面具有潜在价值。体外高效重组表达是实现其后续开发和利用最为关键第一步。有研究表明,大肠杆菌会根据营养环境向不同生物代谢、合成途径分配资源,而代谢网络是生物合成成本和微生物生长关键决定因素,因此揭示营养环境与其代谢网络结构之间联系是必要

  • 标签: 凝集素 大肠杆菌 高效表达 培养条件
  • 简介:摘要:目的 测定美罗培南、阿米卡星、哌拉西林 /他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮 /舒巴坦对肺炎克雷伯菌、大肠杆菌体外抗菌活性。 方法 根据CLSI2010年版标准,采用琼脂稀释法测定美罗培南、阿米卡星、哌拉西林 /他唑巴坦、头孢他啶、孢哌酮 /舒巴坦对肺炎克雷伯菌、大肠杆菌最低抑菌浓度( MIC)。 结果 美罗培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮 /舒巴坦对肺炎克雷伯菌及大肠杆菌敏感性分别为 95.0%、 65.0%、 75.0%、 40.0%、 65.0%和 100.0%、 95.0%、 95.0%、 20.0%、 80.0%。美罗培南、阿米卡星、哌拉西林 /他唑巴坦、头孢他啶、头孢哌酮 /舒 1巴坦对肺炎克雷伯菌及大肠杆菌MIC50分别为 0.13、 2、 8、 12、 4mg/L和 0.13、 1、 6、 8、 3mg/L, MIC90分别为 3.65、 256、 64、 64、 128mg/L和 0.13、 14、 16、 64、 64 mg/L。 结论 美罗培南对肺炎克雷伯和大肠杆菌有良好抗菌活性,头孢他啶敏感率较低,临床治疗应根据药敏试验结果选择抗菌药物。

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  • 简介:有许多不同酵母已经有效地被利用来分析或表达真核蛋白。酵母优点是生长快速,发酵条件可轻易批量化,设备相对简单.各项遗传和生物特性都被充分了解,更重要是可以像哺乳动物细胞一样做转译后修饰.所以非常适合于真核重组蛋白大量生产。

  • 标签: 酵母 重组蛋白 真核蛋白 发酵 遗传特性 生物特性
  • 简介:摘要:重组蛋白表达系统是生物制药领域中重要工具,用于大规模生产具有特定功能蛋白质。通过基因工程技术将目标基因导入到适当宿主细胞中,利用宿主细胞生物合成机制来表达和产生目标蛋白质。重组蛋白表达系统构建和优化对于提高蛋白质产量、纯度和活性至关重要。本文将介绍重组蛋白表达系统构建和优化在生物制药中应用。

  • 标签: 重组蛋白 表达系统 构建与优化 生物制药
  • 简介:目的探讨血清胰蛋白酶原-2在大肠肿瘤中表达及意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2011年9月—2012年12月收治经内镜及病理证实大肠癌39例、大肠腺瘤35例及同期健康体检者35例(对照组)血清胰蛋白酶原-2水平进行检测。结果血清胰蛋白酶原-2水平大肠癌组和大肠腺瘤组均高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.01)。绘制出胰蛋白酶原-2含量ROC曲线,以1.25μg/L为最佳截断值,敏感性和特异度分别为54.00%和83.00%,ROC曲线下面积为0.72。结论血清胰蛋白酶原-2在大肠癌及大肠腺瘤中表达明显高于正常人群,对大肠肿瘤性病变有一定提示意义,可作为大肠肿瘤性病变早期筛查潜在标志物。

  • 标签: 肠肿瘤 胰蛋白酶原-2 酶联免疫吸附试验
  • 简介:摘要目的就神经纤毛蛋白1、2在大肠癌组织中表达与意义进行探讨。方法采用免疫组化定性检测60例大肠癌患者癌组织、癌旁组织、正常组织中NRP-1、2表达情况,计数PCR值。结果NRP-1、NRP-2在大肠癌组织、癌旁组织、正常组织中表达阳性率分别为71.7%、28.3%、0以及83.3%、16.7%、0,各组之间对比差异较为明显,具有统计学意义(P<0.05)。PCR在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中计数分别为(35.67±5.27)、(14.28±3.35)、(6.85±1.6),各种间对比,差异较为明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论NRP-1、2在大肠血管新生中起重要作用,并且与大肠癌侵袭和转移关系密切,在治疗大肠癌患者时可以结合这点进行治疗。

  • 标签: 神经纤毛蛋白1 2 大肠癌 表达与意义
  • 简介:目的分析焦炉工外周血中DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白表达情况,探讨焦炉工人肺癌筛查生物标志物。方法以152名男性焦炉工人为接触组,以141名男性水处理工为对照组。采集2组人员晨尿,用高效液相色谱法检测其内暴露指标1-羟基芘(1-OH-Py)水平。同时采集晨起空腹静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中DNMT1、HDAC1蛋白表达,并分析DNMT1、HDAC1蛋白表达与焦炉工人工龄、工种、吸烟、饮酒等关系。结果接触组尿1-OH-Py水平[(0.043±0.011)μg/mmolCr]和血清中DNMT1[(28.4±7.2)μg/L]、HDAC1蛋白[(382±64)μg/L]表达高于对照组[(0.017±0.004)μg/mmolCr、(17.6±3.0)μg/L、(246±25)μg/L],差异有统计学意义(P〈0.001)。接触组中不同工种间DNMT1、HDAC1蛋白表达水平也不同,差异有统计学意义(P〈0.05)。随着焦炉作业工龄增加,接触组DNMT1、HDAC1蛋白表达水平都有逐渐升高趋势,差异有统计学意义(P〈0.001)。结论血清中DNMT1、HDAC1蛋白可作为焦炉工人肺癌早期筛查生物标志物。

  • 标签: DNA甲基化 肺肿瘤 组蛋白去乙酰基酶1
  • 简介:大肠癌是指在大肠黏膜上皮和腺体发生恶性肿瘤,主要包括结肠癌和直肠癌,是消化系统常见恶性肿瘤之一,其发生率居消化道肿瘤第三位[1]。大肠发生机制受到各种因素影响,其体内中期因子(Midkine,MK)含量阳性概率高低与肠癌发生有很大关联。研究表明早期大肠癌不易被发现,大面积侵袭和转移成为导致大肠癌患者死亡主要因素[2]。若未及时发现病情,则会给患者带来痛苦。目前研究表明大肠癌病变出现与MK在体内

  • 标签: 大肠癌组织 MIDKINE 肠癌患者 消化道肿瘤 结肠癌 肠黏膜上皮
  • 简介:大肠癌(colorectalcarcinoma,CRC)是我国最常见恶性肿瘤之一,也是西方国家恶性肿瘤患者主要病死原因之一,目前居恶性肿瘤死亡率第3位目前,许多学者发现PI3K/AKT信号传导信号通路异常与人类一些恶性肿瘤发生发展密切相关。VEGF(vascularen—dothelialgrowthfactor)是血管内皮细胞特异有丝分裂原,可诱导血管内皮细胞增殖,促进新生血管生成,增加肿瘤转移几率,为观察pAKT和VEGF与其发生发展及临床关系,我们应用免疫组化法检测50例大肠癌患者pAKT和VEGF表达,旨在探讨其对大肠癌发生、发展影响及探讨治疗大肠新靶点。

  • 标签: 大肠癌患者 VEGF 临床意义 血管内皮细胞增殖 恶性肿瘤患者 carcinoma
  • 简介:目的应用自制大肠癌相关蛋白SCAP47作为抗原制备兔多抗血清和鼠单克隆抗体,测定效价,鉴定特性,为相关抗体临床应用提供可行性依据。方法①制备兔多抗血清:实验动物为纯种新西兰白兔,卡介苗基础免疫后,分次多点注射抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和双向凝胶扩散法测血清效价,分离高效价血清。②制备小鼠单克隆抗体:实验动物为BALB/c小鼠,分次腹腔、脾内注射抗原蛋白乳剂和水剂,采用ELISA测血清效价,高效价鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,有限稀释法亚克隆阳性细胞株,克隆细胞种植小鼠腹腔,收获腹水,纯化单克隆抗体,鉴定抗体效价、亚类、纯度。结果①3只实验兔中2只产生了一定效价多抗血清,多抗血清效价:间接ELISA结果兔1为1:6400,兔2为1:1600;琼脂糖双扩试验结果兔1为l:32,兔2为1:4。②克隆了2株能产生抗SCAP47抗原单克隆抗体细胞株抗SCAP47-B1和抗SCAP47-B2,将细胞种植于BALB/c小鼠腹腔,成功诱导小鼠腹水生成,以50、22kD为主要蛋白,Westernblot试验证实为小鼠IgG,琼脂糖双扩试验显示为小鼠IgG2a亚型;免疫荧光细胞组织化学试验显示,SCAP47蛋白大肠癌细胞膜表面可表达,正常对照细胞未见表达大肠癌细胞膜表面表达SCAP47蛋白可与抗SCAP47-B1细胞株分泌抗体产生特异性结合反应;纯化单克隆抗体效价:SCAP47-B1为1:1600,SCAP47-B2则达到1:6400。结论通过杂交瘤单克隆抗体技术制备和纯化抗SCAP47单克隆抗体,经效价检测和性质鉴定,证明初步达到了免疫试验要求,为进一步临床应用提供了可行性依据。

  • 标签: 结直肠肿瘤 相关蛋白 抗体 单克隆 小鼠
  • 简介:目的探讨细胞周期蛋白E(CyelinE)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、生存素(Survivin)及染色体同源丢失性磷酸酶和张力蛋白基因(PTEN)表达大肠癌临床病理特征相关性,以期在分子水平上更准确地判断大肠癌患者预后,寻找相应基因治疗方法。方法采用免疫组织化学Envision两步法检测66例大肠癌组织标本中CyelinE、MMP-9、Survivin及PTEN表达情况,12份大肠健康黏膜组织作为健康对照。结果66例大肠癌中CyelinE、MMP-9、Survivin蛋白表达阳性率分别为62%、76%、71%,明显高于正常大肠黏膜上皮表达(8%、25%、0),两者比较差异有统计学意义(P〈0.01);PTEN在大肠癌中阳性表达率为53%,明显低于大肠健康黏膜中表达(92%),两者比较差异有统计学意义(/9〈0.05)。CyelinE异常表达大肠癌Dukes分期及淋巴结转移相关(P〈0.05);MMP-9表达与浸润深度、组织分化程度、Dukes分期及淋巴结转移均相关(P〈0.05);Survivin表达与Dukes分期及淋巴结转移相关(P〈0.05);FFEN表达大肠癌浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移相关(P〈0.05)。结论CyelinE、MMP-9、Survivin及PTEN基因蛋白表达与一些临床病理特征具有相关性,CyclinE、MMP-9和Survivin基因表达上调与PTEN基因表达下调可能在大肠发生、发展进程中发挥协同作用,检测这4种基因蛋白对于评估大肠生物学行为具有重要价值,有助于估计患者预后,为临床治疗提供依据。

  • 标签: 肠肿瘤 细胞周期蛋白E 明胶酶B 生存素 PTEN
  • 作者: 牟学清
  • 学科: 医药卫生 > 药学
  • 创建时间:2019-06-16
  • 出处:《药物与人》 2019年第6期
  • 机构:四川省眉山市洪雅县中医医院外一科牟学清肠癌是胃肠科常见的恶性肿瘤之一,发病率仅位于胃癌和食道癌之下,最常见的发病部位是大肠,占比在60%以上,高发人群是中老年人,且男性患病比例比女性高,常见的肠癌类型是结肠癌和直肠癌。肠炎就是肠道粘膜发炎引起的,肠炎是肠道系统发炎的简单症状。如果患有肛肠疾病的患者一定要提高警惕,发病后及时到医院接受检查与治疗,若延误病情会增加癌变的可能。因为肠炎与肠癌的发病症状类似,人们易混淆肠癌与肠炎,真正的区分如下:
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  • 简介:过去几年中建立了一些非侵入性检测幽门螺杆菌(Hp)感染方法,其中临床应用较多是培养Hp菌体抽提物作为抗原检测血清总抗体或尿素酶抗体。近年国外应用基因工程表达多克隆或单克隆基因蛋白作为抗原,并结合到固相载体上,同时应用酶标记抗人IgG(或IgA)可以检测相应血清—

  • 标签: 幽门螺杆菌 基因克隆 Cag-A HSP-58 UreaA UreaB
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